黑龙江省科技攻关计划(GA08B101)
- 作品数：9 被引量：10H指数：2
- 相关作者：李海英于海鹏刘金玲张喜波蒙明明更多>>
- 相关机构：黑龙江大学黑龙江省农垦科学院中国农业科学院农业信息研究所更多>>
- 发文基金：黑龙江省科技攻关计划哈尔滨市科技创新人才研究专项资金项目哈尔滨市科技创新人才研究专项资金更多>>
- 相关领域：农业科学更多>>
- 导入nodD-lba串联基因的根瘤菌工程菌株的构建被引量：2
- 2013年
- 旨在利用同源序列克隆法,克隆出结瘤相关基因nodD和大豆血红蛋白基因lba。以串联的方式将nodD和lba基因连接到lac启动子的下游,通过DNA重组技术构建出带有发光酶基因luxAB的重组载体pTR-Plac-nodD-lba。通过三亲本杂交方法构建转基因费氏中华根瘤菌(Sinorhizobium fredii),Western blot试验证明导入基因能够进行表达。将初始菌株和基因工程菌株侵染大豆幼苗后进行固氮酶活的测定。测定结果表明,转基因工程菌株均能够提高固氮酶效率,导入串联基因的工程菌株在提高固氮酶活性上比导入lba和nodD基因的工程菌株高出4%和15.1%。
- 李珊珊李海英于冰
- 关键词：费氏中华根瘤菌
- 导入额外拷贝nifA基因的大豆根瘤菌工程菌株的构建
- 2010年
- 以快生型大豆根瘤菌(Sinorhizobium fredii)15067的基因组DNA为模板,采用PCR技术,克隆固氮基因nifA全长;将其连入带有lac启动子下游,构建带有LuxAB基因标记的表达载体pTR102,采用三亲本杂交技术转化土著大豆根瘤菌中,构建大豆根瘤菌工程菌株。为研究转基因工程菌株对大豆固氮能力的影响奠定基础。
- 李海英张喜波刘金玲于海鹏杨乐蒙明明贾珊珊
- 关键词：大豆根瘤菌NIFA基因
- 生防菌株SF-1对玉米安全性的测定被引量：1
- 2011年
- 通过研究SF-1发酵液对玉米品种F4019种子出苗率和幼苗生长的影响,测定了SF-1发酵液对玉米的安全性,结果表明:SF-1菌株发酵液不仅对玉米植株的生长无毒害作用,同时能够促进种子的萌发、对胚芽与胚根的生长发育也有一定的促进作用,并且有利于玉米植株地下部分的生长。
- 刘洪亮
- 关键词：发酵液玉米安全性
- 导入额外拷贝dctA基因的根瘤菌工程菌株的构建
- 2012年
- 为进一步提高大豆根瘤菌的固氮能力,以费氏中华根瘤菌(Sinorhizobium fredii)15067基因组的DNA作为模板,采用PCR扩增技术,克隆四碳二羧酸转移酶结构基因dctA的全长序列;将其连入lac启动子下游,构建带有LuxAB基因标记的pTR-Plac-dctA重组表达载体。利用三亲本杂交技术将表达载体转入费氏中华根瘤菌中,构建大豆根瘤菌工程菌株。研究表明,转基因工程菌株侵染大豆幼苗后与出发菌相比,固氮酶活性有了显著提高,为提高大豆产量的研究提供一定参考。
- 蒙明明于冰李珊珊李海英
- 生物菌剂对玉米丝黑穗病害防效研究被引量：2
- 2011年
- 以垦单7号为试材,从玉米根际土壤中筛选链霉菌株SF-1,通过测定其活性,研究其代谢产物不同剂量及与其它生物药剂混剂对玉米丝黑穗病田间防治效果,确定其最佳用量、对玉米的安全性和产量的影响。结果表明:生防制剂可提高玉米出苗率,其中SF-1 20倍液+BYM对玉米丝黑穗的防治效果较好,为69.55%,增产效果也比较明显,为13.69%。
- 刘洪亮刘辉王慧
- 关键词：生物药剂玉米玉米丝黑穗病菌
- nodD基因的克隆及其导入大豆根瘤菌工程菌株的构建被引量：2
- 2012年
- 以快生型大豆根瘤菌(Sinorhizobium fredii)15067的基因组DNA作为模板,采用PCR技术,克隆结瘤基因nodD编码区序列;利用DNA重组技术,将nodD基因连到lac启动子的下游,通过luxAB基因标记的质粒载体pTR102构建表达载体pTR102-Plac-nodD,采用三亲本杂交的方式,将构建的表达载体转化土著大豆根瘤菌,构建转基因工程菌株,为研究转基因工程菌株对大豆结瘤能力的影响提供依据。
- 刘金玲张喜波贾珊珊平原李海英
- 关键词：大豆根瘤菌工程菌株
- 快生型大豆根瘤菌(Rhizobium fredii)15067与褐球固氮菌(Azotobacter chroococcum)10006的16S rDNA分析被引量：1
- 2008年
- 分别对快生型大豆根瘤菌(Rhizobium fredii)15067和褐球固氮菌(Azotobacter chroococ-cum)10006两个菌株进行了16S rDNA的全序列测定,将此全序列与已知相关的16S rDNA进行了比较及聚类分析,得到系统发育树状图。在系统发育树中,根瘤菌15067隶属于中华根瘤菌属,与Sinorhizobium xinjiangenseIAM 14142,SinoRhizobium frediiSjzZ 4构成一个分支,其中与S.frediiSjzZ4的相似性最高,达99.72%;固氮菌10006处于固氮菌属分支中,其中和Azotobacter chroococcumAM12A,Azotobacter chroococcum的相似性均高达99.93%。为确定两株菌株的分类地位、进一步发掘和利用菌株的优良性状提供了参考依据。
- 李海英刘金玲张喜波康妮于海鹏李鹏
- 关键词：快生型大豆根瘤菌系统发育分析
- 大豆血红蛋白基因lba转化根瘤菌工程菌株的构建被引量：2
- 2012年
- 以土著大豆根瘤菌接种大豆幼苗45 d后获得的根瘤为材料,提取其总RNA并反转录成cDNA,采用同源序列克隆法扩增大豆血红蛋白基因lba编码区序列。利用DNA重组技术,将lba基因连到lac启动子的下游,利用带有发光酶标记基因luxAB的质粒载体pTR102构建表达载体pTR-Plac-lba。采用三亲本杂交的方式,将表达载体pTR-Plac-lba及作为对照的空载体pTR102分别转化土著大豆根瘤菌,获得根瘤菌工程菌株SFH(pTR-Plac-lba)和SFH(pTR102)。盆栽试验发现,接种SFH(pTR-Plac-lba)的大豆植株各生理指标明显高于接种SFH(pTR102)、土著根瘤菌以及未接菌的大豆植株各生理指标。试验证明,导入大豆血红蛋白基因lba的根瘤菌工程菌株SFH(pTR-Plac-lba)对于提高大豆根瘤的固氮酶活性,增加大豆产量起到显著效果。
- 于海鹏潘钰蒙明明李海英
- 关键词：DNA重组技术工程菌株
- 大豆血红蛋白串联基因簇转化根瘤菌工程菌株的构建被引量：2
- 2011年
- 研究提取大豆根瘤总RNA并将其反转录成cDNA,以其为模板采用同源序列克隆法,利用PCR技术获得大豆血红蛋白基因lbc3、lbc2、lbc1、lba的编码区序列;利用DNA重组技术,将4个血红蛋白基因顺序连接,构建成串联基因簇lbc3-lbc2-lbc1-lba(命名为lbX),并构建了lbX的原核表达载体pTR-Plac-lbX;采用三亲本杂交的方法,将原核表达载体pTR-Plac-lbX转化土著大豆根瘤菌,构建转基因根瘤菌工程菌株SFH(pTR-Plac-lbX),为研究转基因工程菌株对大豆根瘤固氮能力的影响奠定基础。
- 于海鹏潘钰李海英
- 关键词：大豆根瘤菌DNA重组技术
