江苏省普通高校研究生科研创新计划项目(CXLX110606)
- 作品数：2 被引量：3H指数：1
- 相关作者：穆原周红李耀武李文艳张晓蕾更多>>
- 相关机构：江苏大学淮安市第二人民医院更多>>
- 发文基金：江苏省普通高校研究生科研创新计划项目国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：生物学医药卫生更多>>
- 基于通用质粒标准品的实时荧光定量PCR检测组织因子剪接异构体F3tv1及F3tv2被引量：1
- 2012年
- 目的建立基于通用质粒标准品的实时荧光定量PCR(qPCR)法检测人组织因子(TF)两种剪接异构体(F3tv1和F3tv2)。方法设计基因特异性上游引物与通用下游引物,通过引物末端延伸法将2种扩增产物进行序列简并,用于构建通用质粒标准品。用qPCR法检测人白血病细胞株THP-1、Jurkat及外周血单核细胞中F3tv1与F3tv2的表达,分析该法的线性范围与特异性。结果所建qPCR方法对F3tv1与F3tv2扩增特异,线性范围均为108～101copies/μL。THP-1与外周血单核细胞中F3tv1相对表达量分别为(5.70×10-4)±(2.62×10-5)与(1.79×10-4)±(4.37×10-5);F3tv2分别为(4.94×10-5)±(2.19×10-6)与(2.98±2.18)×10-6,Jurkat细胞株F3tv1与F3tv2均未检出。结论建立的qPCR方法可对TF两种剪接异构体同时进行精确、定量地检测,为深入研究TF的选择性剪接调控机制提供实验依据。
- 穆原周红胥亚张晓蕾王婷
- 关键词：选择性剪接实时荧光定量PCR
- miR-206-3p在小鼠皮肤中的表达及其作用被引量：2
- 2013年
- 目的对小鼠皮肤中miR-206-3p及其靶基因脑源性神经营养因子(Bdnf)进行表达与定位检测,以探讨其在皮肤发育过程中的可能作用。方法手术剪取13.5 dpc(交配后天数)、15.5 dpc、17.5 dpc胎鼠,1 dpp(出生后天数)、4 dpp乳鼠及16周龄雄鼠的背部全层皮肤,用实时荧光定量RT-PCR检测miR-206-3p与Bdnf mRNA的表达水平,western blot检测BDNF蛋白质表达水平,原位杂交与免疫组化分别检测miR-206-3p与BDNF的组织定位。结果皮肤中miR-206-3p在胚胎期持续升高,到17.5 dpc后逐渐降低,于成年鼠时回复至13.5 dpc时水平;BDNF表达趋势与miR-206-3p相反,而Bdnf mRNA在17.5 dpc至成年鼠并无显著改变。miR-206-3p的分布在皮肤发育过程中逐渐区域化,在出生后主要分布于上基部和毛囊外周,与同期BDNF表达区域毗邻但不重叠。结论 miR-206-3p可能通过转录后调控Bdnf参与了小鼠皮肤神经发育过程。
- 穆原周红李文艳李耀武
- 关键词：微小RNA脑源性神经营养因子
