国家自然科学基金(308723933067246430701023)
- 作品数:1 被引量:2H指数:1
- 相关作者:金亮刘景晶杨洁李泰明鲁勇更多>>
- 相关机构:中国药科大学新乡医学院更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金更多>>
- 相关领域:生物学医药卫生更多>>
- 一种谷氨酸脱羧酶65相关肽融合蛋白的制备及其治疗1型糖尿病的药效研究被引量:2
- 2009年
- 使用基因工程方法构建了霍乱毒素B亚单位(Cholera toxin B subunit,CTB)与谷氨酸脱羧酶65(glutamic acid decarboxylase65,GAD65)串联三肽GADⅢ(包括p217—236,p524—538,p290—306)的融合基因CTB-GADⅢ。将融合基因克隆到大肠杆菌表达载体pET-28a中,获得的重组质粒转化大肠杆菌BL21(DE3)。重组菌株经乳糖诱导后,其表达产物经过15%SDS-PAGE分析表明该菌株可以以包涵体形式表达融合蛋白,Mr约为17.6k。含有CTB-GADⅢ重组蛋白的包涵体经过变性、复性、纯化后,可以得到五聚体结构的CTB-GADⅢ。神经节苷脂GM1(monosialoganglioside)结合实验表明重组CTB-GADⅢ蛋白可以与GM1特异性结合,表明该融合蛋白保持了CTB形成五聚体的生物活性。使用该重组蛋白在NOD小鼠8周龄、10周龄和12周龄时滴鼻免疫小鼠共3次,可以显著降低小鼠的发病率,达到治疗1型糖尿病的作用。
- 王华倩张会勇杨洁鲁勇李泰明金亮曹荣月刘景晶
- 关键词:谷氨酸脱羧酶65霍乱毒素B亚单位治疗1型糖尿病NOD小鼠