国家教育部博士点基金(20070159023) 作品数:12 被引量:19 H指数:3 相关作者: 林蓓 张淑兰 郝莹莹 朱连成 刘娟娟 更多>> 相关机构: 中国医科大学 中国医科大学附属第一医院 沈阳市妇女儿童保健中心 更多>> 发文基金: 国家教育部博士点基金 国家自然科学基金 辽宁省教育厅高校重点实验室项目 更多>> 相关领域: 医药卫生 更多>>
Lewisy抗原及IGF-1R在卵巢黏液性肿瘤中的表达及意义 2012年 目的:探讨Lewis y抗原及胰岛素样生长因子受体-1(IGF-1R)在卵巢黏液性肿瘤中表达规律及其相关性。方法:用免疫组化法检测62例卵巢黏液性肿瘤和20例正常卵巢组织中Lewis y抗原与IGF-1R的表达,并分析其表达与卵巢癌病理分级、临床分期及淋巴结转移的关系。结果:Lewis y在恶性、交界性、良性和正常组的阳性表达率分别是90.0%、70.6%、53.3%和0%,呈下降趋势,其中恶性与交界性,良性和正常组比较差异有统计学意义(P<0.05);IGF-1R在恶性、交界性、良性和正常组的阳性表达率分别是93.3%、70.6%、46.7%和40.0%,呈下降趋势,其中恶性与交界性,良性和正常组比较差异有统计学意义(P<0.05);Lewis y抗原或IGF-1R的阳性表达率与卵巢黏液癌临床病理参数无关(P均>0.05);Lewis y抗原和IGF-1R的表达水平随临床分期的增加,但无统计学意义(P>0.05)、随分化程度的降低而增加(P<0.05),与有无淋巴结转移无关(P>0.05);Lewis y抗原和IGF-1R在卵巢黏液性囊腺癌中的表达呈显著正相关(r=0.711,P<0.005)。结论:随着卵巢黏液性肿瘤的恶性进展Lewis y抗原及IGF-1R的表达上调,且两者的表达呈显著性正相关。提示Lewis y抗原及IGF-1R对卵巢黏液性囊腺癌的转移、分化起促进作用。 刘大我 刘娟娟 林蓓 胡珍华 高健 侯锐 刘川 郝莹莹 张淑兰关键词:卵巢黏液性肿瘤 IGF-1R 免疫组织化学 免疫印迹法 卵巢浆液性癌中Lewis y抗原表达与耐药相关性研究 被引量:1 2011年 目的探讨Lewis y抗原表达与卵巢浆液性癌耐药的关系。方法 2005-2009年于中国医科大学附属盛京医院应用免疫组化法检测卵巢浆液性乳头状腺癌54例(其中耐药组24例,敏感组30例)中Lewis y抗原的表达情况,并分析其与卵巢癌耐药的关系。结果卵巢浆液性乳头状腺癌耐药组Lewisy抗原的阳性表达率为(91.67%)明显高于敏感组(60.00%),P<0.01;耐药组Lewis y抗原表达强度(0.2426±0.0629)也明显高于敏感组(0.2113±0.0390),P=0.028。Lewis y为耐药相关的独立危险因素(P<0.05)。结论 Lewis y抗原与卵巢浆液性乳头状腺癌化疗耐药相关。 胡珍华 刘川 高嵩 高健 刘水策 刘大我 李贝贝 白碧玲 张淑兰 林蓓关键词:卵巢浆液性囊腺癌 耐药 LEWIS Lewis y抗原促进卵巢癌细胞RMG-I血管内皮生长因子受体的表达 被引量:4 2009年 目的:探讨α1,2-岩藻糖转移酶(α1,2-fucosyltransferase,α1,2-FT)基因转染对卵巢癌细胞系RMG-I血管内皮生长因子受体(VEGFR)的影响。方法:利用已经建立的α1,2-岩藻糖转移酶及Lewisy稳定高表达的RMG-I-H细胞系、裸鼠移植瘤模型,采用逆转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)测定基因转染前后细胞中VEGFRmRNA的变化,采用免疫组织化学法测定基因转染前后细胞及裸鼠移植瘤组织中VEGFR蛋白的变化。结果:基因转染后细胞中KDRmRNA表达明显增高(P<0.01),细胞、裸鼠移植瘤组织中KDR蛋白表达也明显增高,差异有统计学意义(P<0.01)。结论:Lewisy抗原可能通过VEGF的自分泌和旁分泌途径引起KDR受体数目增多,从而促进肿瘤血管生成,介导卵巢癌的生长、侵袭、转移和耐药等生物学行为。 王朋丽 林蓓 刘晴 李妍 李飞飞 郝莹莹 张淑兰关键词:LEWIS 血管内皮生长因子受体 卵巢癌 Lewisy抗原对人卵巢癌细胞RMG-I-H部分耐药相关蛋白基因表达的影响 被引量:5 2009年 目的探讨细胞表面Lewisy抗原对人卵巢癌细胞系RMG-I-H细胞的部分耐药相关蛋白基因表达的影响。方法RT-PCR法检测转染α1,2-岩藻糖转移酶基因和未转染α1,2-岩藻糖转移酶基因的人卵巢癌细胞系RMG-I-H和RMG-I细胞中,以及10μg/ml抗Lewisy单克隆抗体处理及未处理的RMG-I-H细胞中部分耐药相关蛋白mRNA的表达量。免疫细胞化学方法检测RMG-I和RMG-I-H细胞中P-糖蛋白(P-gp)的表达;分别建立RMG-I和RMG-I-H细胞的裸鼠皮下移植瘤模型,采取免疫组织化学方法检测移植瘤组织P-gp的表达。结果与RMG-I细胞比较,RMG-I-H细胞中蛋白激酶C-α(PKC-α)、拓扑异构酶Ⅰ(TopoⅠ)、多药耐药相关蛋白-1(MRP-1)及MRP-2基因mRNA的相对表达量均显著增高(0.46±0.02vs.0.27±0.05、0.82±0.08vs.0.52±0.04、0.66±0.07vs.0.34±0.12和0.44±0.08vs.0.23±0.05,均P<0.05),而多药耐药基因-1(MDR-1)mRNA的相对表达量显著降低(0.26±0.05vs.0.45±0.08,P<0.05)。免疫化学染色分析显示,不论体内还是体外,P-gp在RMG-I-H细胞中的表达量均显著高于RMG-I细胞中的表达量(均P<0.05)。经Lewisy单克隆抗体处理后,RMG-I-H细胞中MDR-1、MRP-1、MRP-2、PKC-α及TopoⅠ的mRNA相对表达量均呈时间依赖性下降(均P<0.05),而对照组以上基因mRNA的表达量不随时间的变化而变化(均P>0.05)。经Lewis y抗体处理6h的RMG-I-H细胞中MDR-1、MRP-1、MRP-2、PKC-α及TopoⅠ的mRNA相对表达量均显著低于对照组(均P<0.05),Lewis y单克隆抗体对上述基因表达的抑制率分别为48.55%、77.50%、70.18%、45.86%和46.13%。结论人卵巢癌细胞表面Lewisy抗原与部分耐药相关蛋白基因表达的调节密切相关。 刘晴 林蓓 王朋丽 严丽梅 郝莹莹 李飞飞 朱连成 张淑兰关键词:LEWIS 卵巢癌 耐药相关蛋白 核转录因子E2F2在卵巢浆液性肿瘤组织中的表达及其临床意义 被引量:1 2010年 目的:探讨核转录因子E2F2在卵巢浆液性肿瘤组织中的表达及其临床意义。方法:采用免疫组化SP法检测33例卵巢浆液性囊腺癌、11例卵巢交界性浆液性囊腺瘤、13例卵巢浆液性囊腺瘤以及12例正常卵巢组织中E2F2蛋白的表达。结果:E2F2蛋白在卵巢浆液性囊腺癌、交界性浆液性囊腺瘤、浆液性囊腺瘤以及正常卵巢组织中的阳性表达率分别为72.73%(24/33)、54.55%(6/11)、15.38(2/13)%和8.3%(1/11),E2F2蛋白在卵巢浆液性囊腺癌组织、交界性浆液性囊腺瘤组织中的阳性表达率明显高于在浆液性囊腺瘤、正常卵巢组织中的阳性表达率(P均<0.05),卵巢浆液性囊腺癌组的阳性表达率值虽然高于交界性浆液性囊腺瘤组,但是两组之间差异无统计学意义(P>0.05),浆液性囊腺瘤的阳性表达率接近正常卵巢组的2倍,但是两组之间的阳性表达率差异也无统计学意义(P>0.05);在卵巢浆液性囊腺癌组织中,E2F2蛋白的阳性表达率随手术病理分期的增加而增加(P<0.05),但与病理分级以及有无淋巴结转移无关(P均>0.05);在卵巢浆液性囊腺癌组织中,E2F2蛋白的表达水平随手术病理分期的增加、病理分级降低而增加(P均<0.05),与有无淋巴结转移无关(P>0.05)。结论:在卵巢浆液性囊腺癌组织、交界性浆液性囊腺瘤组织中核转录因子E2F2呈现明显的高表达,且其表达水平与手术分期、病理分级相关,提示E2F2在卵巢癌的发生发展中起到促进作用。 伊喜苓 林蓓 朱连成 王欢 从建萍 郝莹莹 梁秀云 张淑兰关键词:卵巢浆液性肿瘤 细胞周期 Lewis y抗原及α1,2-岩藻糖转移酶基因在卵巢癌细胞系中的表达 2011年 目的探讨卵巢癌细胞系中Lewisy抗原及α1,2-岩藻糖转移酶(α1,2-FT)基因FUT1表达变化对卵巢癌细胞增殖、耐药和转移的影响。方法采用免疫细胞化学法、免疫细胞荧光法测定α1,2-FT基因FUT1转染前后的人卵巢癌细胞系RMG-I和RMG-I-H、人卵巢癌高转移细胞系HO8910PM及亲本细胞系HO8910、人卵巢癌耐药细胞系COC1/DDP及亲本细胞系COC1中Lewisy抗原的表达。利用RT-PCR法及real-time PCR法检测上述6种细胞中FUT1基因表达的变化。结果经免疫化学方法和免疫细胞荧光法分析,在RMG-I-H、HO8910PM及COC1/DDP细胞系中Lewisy表达强度分别为(53.90±4.33),(37.31±0.19)和(28.52±1.45),与相应的亲本细胞系RMG-I(32.18±0.64)、HO8910(14.96±0.61)及COC1(19.26±0.83)比较均明显升高(P均<0.05)。与RMG-I相比,RMG-I-H中的FUT1基因表达上调3.07倍,与HO8910相比,HO8910PM中的FUT1基因表达上调2.13倍,与COC1相比,COC1/DDP中的α1,2-FT基因表达上调2.42倍(P均<0.05)。结论人卵巢癌细胞表面Lewisy抗原与卵巢癌细胞的增殖、耐药及转移等生物学行为密切相关。 梁秀云 林蓓 刘娟娟 高利利 王燕燕 刘大我 严丽梅 张淑兰关键词:LEWIS 卵巢肿瘤 α1,2-岩藻糖转移酶基因转染对卵巢癌细胞RHG-I裸鼠移植瘤血管内皮生长因子的影响 被引量:4 2008年 目的探讨α1,2-岩藻糖转移酶基因转染对卵巢癌细胞株RMG-I裸鼠移植瘤血管内皮生长因子(VEGF)的影响。方法利用已经建立的Lewis(y)抗原稳定高表达的卵巢癌细胞株RMG-I-H建立裸鼠移植瘤模型,利用免疫组织化学法测定基因转染前后裸鼠移植瘤组织Lewis(y)抗原及VEGF的表达。结果基因转染后的裸鼠移置瘤组织细胞表面Lewis(y)抗原及VEGF的表达明显增加。转染组与非转染组之间有统计学意义(P均<0.05)。结论α1,2-岩藻糖转移酶基因转染使卵巢癌细胞株RMG-I裸鼠移植瘤血管内皮生长因子VEGF的表达明显增加。 李妍 林蓓 郝莹莹 刘娟娟 严丽梅 张帆 朱连成 张淑兰关键词:卵巢癌 α1,2-岩藻糖转移酶基因转导对人卵巢癌细胞RMG-I p38MAPK信号通路介导的凋亡的影响 被引量:3 2010年 以α1,2-岩藻糖转移酶基因转染前后卵巢癌细胞RMG-I、RMG-I-H为细胞模型,用细胞免疫荧光方法检测转染前后细胞p38MAPK和p-p38MAPK的细胞内定位,RT-PCR和Western blot方法从mRNA和蛋白质两个水平检测转染前后细胞p38MAPK表达的变化;以兔抗人IgG抗体处理组为对照,分别利用RT-PCR和Western blot方法检测Lewisy单克隆抗体处理前后RMG-I-H细胞p38MAPK mRNA和蛋白质表达水平的变化;以0.1%DMSO为对照,用流式细胞仪(FCM)检测p38MAPK特异性抑制剂SB203580处理后RMG-I-H凋亡比率的变化,并利用RT-PCR和Western blot方法检测caspase-3的mRNA和蛋白质水平的变化;用RT-PCR方法检测卡铂和SB203580处理后p38MAPK及caspase-3表达的变化.结果表明,RMG-I与RMG-I-H的p38MAPK蛋白主要定位在细胞质,p-p38MAPK蛋白定位在细胞核,转染后p38MAPK的mRNA水平明显高于转染前(P<0.05);Lewisy单克隆抗体处理后RMG-I-H细胞p38MAPK mRNA水平降低(P<0.05),不同浓度SB203580(0.1mmol/L,1mmol/L,10mmol/L)作用下RMG-I-H细胞的凋亡率分别为(15.927±0.861)%、(18.187±0.481)%及(33.565±0.912)%,明显高于空白组和对照组(P<0.05),SB203580处理后caspase-3的mRNA和蛋白质水平均明显高于空白组和对照组(P<0.05),卡铂处理后p38MAPK及caspase-3 mRNA水平均增加,SB203580处理后,caspase-3mRNA水平增加.说明Lewisy抗原介导的卵巢癌细胞凋亡与p38MAPK信号通路有关,可能通过p38MAPK信号通路抑制卵巢癌细胞凋亡,引起耐药性. 丛建萍 林蓓 刘娟娟 刘晴 李飞飞 刘水策 高嵩 张淑兰关键词:P38MAPK 凋亡 α1,2-岩藻糖转移酶基因转染对卵巢癌细胞RMG-I裸鼠体内致瘤性及血管生成因子表达的影响 被引量:1 2010年 目的比较α1,2岩藻糖转移酶(α1,2-FT)基因转染前后卵巢癌细胞株RMG-I的裸鼠体内致瘤性及移植瘤组织中血管内皮生长因子(VEGF)、转化生长因子-β(1TGF-β1)及碱性成纤维生长因子(b-FGF)表达的变化。方法我们在前期工作中利用基因转染技术将α1,2-FT基因转入人卵巢癌细胞株RMG-I,建立了α1,2-FT及Lewisy高表达细胞株RMG-I-H。本实验将转染前后细胞种植裸鼠皮下建立人卵巢癌裸鼠移植瘤模型,观察两组肿瘤生长情况。5周后处死动物,测量移植瘤质量,免疫组织化学方法检测肿瘤组织VEGF、TGF-β1及b-FGF的表达。结果两组裸鼠均有皮下荷瘤形成,但转染组的成瘤时间(5.2±0.8d)早于未转染组(8.8±1.3d),且转染组的瘤质量和体积与未转染组相比亦明显增加(P<0.05)。转染组裸鼠移植瘤组织VEGF、TGF-β1及b-FGF的表达均明显高于未转染组(P均<0.05)。结论α1,2-FT基因转染能增强卵巢癌细胞RMG-I的体内致瘤性,上调裸鼠移植瘤组织VEGF、TGF-β1及b-FGF的表达。提示α1,2-FT及Lewisy抗原参与血管生成,其高表达在促进血管生成中可能发挥重要作用。 李妍 李飞飞 林蓓 郝莹莹 刘娟娟 刘晴 朱连成 张淑兰关键词:血管生成 裸鼠 B-FGF α-L-岩藻糖苷酶对Lewis y抗原高表达卵巢癌细胞系的体外抑制作用 被引量:2 2010年 目的探讨α-L-岩藻糖苷酶对Lewis y抗原高表达卵巢癌细胞系的体外增殖、黏附以及细胞膜通透性的影响。方法以α-L-岩藻糖苷酶处理α1,2-岩藻糖转移酶基因转染前、后卵巢癌细胞系作为实验组(RMG-I-H-A、RMG-I-A),以未经α-L-岩藻糖苷酶处理的细胞作为对照组(RMG-I-H-C、RMG-I-C)。利用免疫细胞化学染色法检测4组细胞中Lewis y抗原的表达,利用细胞计数法、荧光分光光度计测定细胞的生物学特性。结果α-L-岩藻糖苷酶处理后的实验组RMG-I-H-A和RMG-I-A细胞黏附性差,生长速度减慢,细胞边缘整齐,呈椭圆型,无延伸生长,处于细胞分裂期的细胞个数少。实验组RMG-I-H-A和RMG-I-A细胞的膜通透性比对照组RMG-I-H细胞增加了4.4倍,比RMG-I细胞增加了2.3倍。结论 Lewis y抗原具有促进卵巢癌细胞系增殖,提高其生存能力的作用。 刘娟娟 林蓓 齐跃 李飞飞 郝莹莹 刘大我 赵越 张帆 朱连成 张淑兰关键词:Α-L-岩藻糖苷酶 LEWIS 卵巢癌