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广州地区小川型霍乱弧菌的脉冲场凝胶电泳分析: 2010年; 目的分析小川型霍乱弧菌的致病相关基因型,探讨广州地区小川型霍乱流行趋势和规律。方法采用多重PCR方法检测小川型菌株的4种致病相关基因,应用脉冲场凝胶电泳技术(PFGE)对菌株进行分子分型,对PFGE图谱采用分子分型软件BioNumerics Version 4.0进行聚类分析。结果广州地区小川型菌株中存在3种致病相关基因型,即A型、B型和C型,20%感染者分离株为致病相关基因A型,80%环境分离株为致病相关基因C型。25株霍乱弧菌分为14个不同的PFGE型,归为3个聚类群(Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ群)。每一次小川型暴发中分离的菌株PFGE克隆型相同或相近,而散发病例分离株与暴发株的PFGE型有些相同,有的差异较大。环境小川型菌株中存在PFGE克隆型的多样性,部分环境株与感染者分离株具有相近的PFGE型。结论应建立广州地区霍乱菌株的PFGE分子分型数据库,加强霍乱的预防、控制和预警。; 李孝权邓小玲邓志爱张欣强吴新伟陈守义王鸣; 关键词：霍乱弧菌多重PCR 致病相关基因脉冲场凝胶电泳分析分子分型

表型和分子分型技术在霍乱弧菌研究中的应用: 2012年; 目的分析1999～2005年广州地区O1群和O139群霍乱弧菌代表菌株的致病基因型和PFGE型别,确定霍乱菌株的分子流行病学特征和同源性,研究本地霍乱弧菌的分子特性。方法采用多重PCR方法检测霍乱弧菌的4种致病相关基因,采用限制性内切酶Not I,以脉冲场凝胶电泳技术(PFGE)对菌株进行分子分型,采用分型处理软件BioNumerics Version对PFGE图谱做聚类分析。结果本地霍乱弧菌代表株中存在3种致病基因型(A、B、C型),病例分离的霍乱弧菌多为A型基因,而环境分离的霍乱弧菌则多为C型和B型。总共96株霍乱弧菌分为60个不同的PFGE型,带型范围:8 kb-650 kb。相同或相近的PFGE型(相差1～3条带)存在于多次霍乱暴发疫情分离株中、环境分离霍乱与临床株之间、输入病例与本地病例分离霍乱弧菌间,不同的PFGE克隆型(4～6带及以上)的流行病学联系也较远。结论将致病基因分型、PFGE型与流行病学资料结合,揭示了本地霍乱菌株从受污染的珠江水及水产品传递给人并引起霍乱暴发、散发的特征,提示开展霍乱菌株PFGE分子分型监测及加强地区间合作的必要性和急迫性。; 黄冰李孝权邓志爱张欣强; 关键词：霍乱弧菌多重PCR 致病相关基因脉冲场凝胶电泳分子分型

广州地区七年细菌性食物中毒的病原特征研究被引量：23: 2011年; 目的:探讨广州市细菌性食物中毒发生的特征及分布规律,为防控食物中毒提供科学依据。方法:对2000年-2006年本实验室疑似细菌性食物中毒的样本进行细菌分离鉴定,资料采用SPSS 11.0等软件进行统计分析。利用PFGE对部分菌株进行分子分型分析。结果:七年共检测疑似细菌性食物中毒124宗,致病菌阳性70宗(检出率56.45%)。细菌性食物中毒全年均有发生,9月～10月发生频数最高。共检出12种病原菌,最常见的是金黄色葡萄球菌(34.25%)、副溶血性弧菌(28.57%)、沙门菌(18.57%)和溶藻弧菌(15.71%)。各菌对各类物品的污染情况是:金黄色葡萄球菌和溶藻弧菌以污染肉类为主;副溶血性弧菌和沙门菌以公用具为主。发生细菌性食物中毒场所则以餐饮业最多(28.23%)、其次为幼儿园(19.35%)。食物中毒菌株的PFGE型别密切,环境株型别多样性明显。结论:应加强卫生教育和监管工作,以减少细菌性食物中毒事故的发生。; 李孝权李钏华邓志爱张欣强庞杏林刘俊华陈守义杨智聪; 关键词：细菌性食物中毒病原特征

应用PFGE分析广州稻叶型霍乱弧菌的同源性: 2011年; 目的分析广州40株稻叶型霍乱弧菌的毒力基因和PFGE特征,探讨菌株的同源性和广州稻叶型霍乱弧菌流行的特点。方法应用PCR方法检测稻叶型菌株的4种毒力基因,采用限制性内切酶NotI对菌株进行PFGE分型,使用BioNumerics Version4.0软件(复选Dice相关系数和UPGMA方法)对菌株进行聚类和同源分析。结果绝大多数水型稻叶霍乱疫情相关菌株为genotypeA型菌,而绝大多数环境分离稻叶型霍乱弧菌为genotypeB型和C型菌。40株霍乱菌株分布于18种pulsotype,水型霍乱疫情相关菌株的pulsotype极为相近(相似性系数98%以上),而环境分离的稻叶型霍乱弧菌呈现明显的pulsotype多样性。结论是否携带ctxA基因是稻叶型霍乱弧菌人源分离株与环境分离株的主要区别之一,绝大多数环境分离的稻叶型霍乱弧菌与人源分离株的同源性较低,但仍需加强对不同来源菌株的同源性分析和溯源追踪。; 李孝权庞杏林张欣强邓志爱李美霞陈守义邓小玲王鸣; 关键词：霍乱弧菌毒力基因分子分型同源性

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广东省医学科学技术研究基金(A2010493)