江苏省重点实验室开放基金(K10008)
- 作品数：1 被引量：3H指数：1
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- 相关机构：扬州大学南通大学更多>>
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- 相关领域：农业科学更多>>
- 水稻叶片cDNA-AFLP技术体系的建立和优化被引量：3
- 2012年
- 以高温和常温处理的水稻幼苗叶片为材料,对影响cDNA-AFLP分析体系的关键因素进行了分析,建立了适宜水稻的cDNA-AFLP分析体系,并得到了清晰可辨的cDNA-AFLP指纹图谱。结果表明:离心柱式试剂盒提取的RNA较完整,纯度较高;双链逆转录试剂盒形成的cDNA经EcoRⅠ(37℃,2 h)和MseⅠ(65℃,2 h)完全酶切后,4℃连接过夜;20μL的体系中,连接产物稀释10倍液5.0μL作为预扩增的模板,并且预扩增反应的循环数为35,预扩增产物稀释20倍作为选择性扩增的模板,扩增结果较佳;6%PAGE分离快速银染法显示,64对选择性扩增引物中筛选出多态生条带丰富的AFLP引物50对。本研究为利用cDNA-AFLP分析水稻抗高温基因进行深入的研究奠定了基础。
- 许锦彪段彪邵园元任贺春杨海林张鑫赵华曹云英郎有忠
- 关键词：水稻CDNA-AFLP叶片
