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GJB6在hela细胞的互作蛋白的研究: 2008年; 目的为探讨GJB6的组装、运输、膜定位及间隙连接通道形成的可能机制，在hela细胞筛选GJB6的C-端功能域的互作蛋白。方法以正常人DNA为模板，PCR扩增GJB6（CX30）的211～261氨基酸编码区，即C-端功能域，构建pGEX-4T-2-GJB6（211～261）-GST原核融合表达载体，纯化融合蛋白和GST蛋白，以纯化的融合蛋白和GST蛋白分别与hela细胞的裂解蛋白进行孵育以沉降（pull down）互作蛋白，SDS-PAGE分离互作蛋白。结果构建了pGEX-4T-2-GJB6（211～261）-GST原核融合表达载体，纯化了融合蛋白及GST蛋白，但在对沉降所得蛋白进行SDS-PAGE分离、检测及比较，未发现明显差异蛋白条带。结论本实验虽未能在hela细胞筛选到GJB6的C-端功能域的互作蛋白，但构建了融合表达载体，纯化了融合蛋白及GST，为进一步GJB6的互作蛋白筛选打下了基础。; 贺定华冯永夏昆贺楚峰梅凌云; 关键词：DOWN HELA细胞

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湖南省卫生厅科研基金(B2006-028)