四川省教育厅重点项目(2003A051)
- 作品数：2 被引量：0H指数：0
- 相关作者：段春燕郑小莉何涛景莉皮爽更多>>
- 相关机构：泸州医学院附属医院泸州医学院南京大学更多>>
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- 急性淋巴细胞白血病白细胞磷酸化蛋白质分析方法的建立
- 2008年
- 目的:建立一种对急性淋巴细胞白血病白细胞磷酸化蛋白质分析方法。方法:分离人新鲜外周血白细胞,并随机分为刺激组和对照组。裂解细胞,用Bradford法测定细胞蛋白质含量,利用亲和层析富集白细胞磷酸化蛋白质,SDS-PAGE分离磷酸化蛋白质,采用ScionImage软件分析电泳结果。结果:①电泳图谱显示每条泳道中蛋白质条带清晰,其相对分子量主要介于26～36kDa以及47～65kDa之间。②EGF刺激后出现有磷酸化蛋白质条带的增减或某些磷酸化蛋白质条带灰度的增强或减弱。结论:采用本研究建立的分析磷酸化蛋白质的方法对急性淋巴细胞白血病白细胞ERK相关磷酸化蛋白质进行动态的分析,其方法较简便、结果可信,可为细胞信息传递磷酸化蛋白质组的研究奠定了基础。
- 段春燕皮爽何涛景莉郑小莉
- 关键词：急性淋巴细胞白血病SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳磷酸化蛋白质
- 急性淋巴细胞白血病白细胞磷酸化蛋白质分析方法的建立及初步分析
- 2007年
- 目的:在建立白细胞磷酸化蛋白质分离分析方法的基础上对急性淋巴细胞白血病白细胞细胞外信号调节激酶相关磷酸化蛋白质进行初步分析。方法:选择2005-01/2006-03于泸州医学院附属医院血液内科初诊住院的白血病患者10例,20～40岁,均经MICM分类法确诊为急性淋巴细胞性白血病,无合并严重感染,心、肺、肾、肝等重要脏器疾患。健康自愿者为泸州医学院学生10名,23～32岁。分离健康自愿者与急性淋巴细胞性白血病患者新鲜外周血白细胞,并均随机分为刺激组、抑制剂组、对照组。刺激组加入表皮生长因子(40μg/L);抑制剂组加入细胞外信号调节激酶特异性抑止剂UO126(10μg/L)和表皮生长因子(40μg/L);对照组加入等量的培养基,用Bradford法测定细胞蛋白质含量,BDTM Phophoprotein EnrichmentKit分离富集白细胞磷酸化蛋白质,SDS-PAGE分离磷酸化蛋白质,银染法染色,采用ScionImage软件分析电泳结果。结果:10例急性淋巴细胞白血病患者及10名正常健康志愿者均进入结果分析。①电泳图谱显示每条泳道中蛋白质条带清晰,其相对分子量主要介于26000～36000Da以及47000～65000Da之间。A、D蛋白质谱带在健康自愿者中的表达较急性淋巴细胞性白血病患者增强;B蛋白质谱带在急性淋巴细胞性白血病患者中表达较健康自愿者增强;D、E蛋白质谱带分别在健康自愿者、急性淋巴细胞性白血病患者刺激组的表达明显较抑制剂组增强。②在使用表皮生长因子刺激后,E蛋白质谱带的灰度值降低,其磷酸化水平明显增高;UO126抑制后,其磷酸化水平降低。结论:采用本实验建立的亲和层析富集磷酸化蛋白质、SDS-PAGE分离、专业软件分析等方法对急性淋巴细胞白血病白细胞细胞外信号调节激酶相关磷酸化蛋白质进行动态的分析,其方法较简便、结果可信,可为细胞信息传递磷酸化蛋白质组的研究奠定了基础。
- 段春燕何涛王松郑小莉景莉
- 关键词：急性淋巴细胞白血病细胞外信号调节激酶
