国家自然科学基金(81172509)
- 作品数：37 被引量：89H指数：6
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- 组蛋白去乙酰化酶抑制剂调控p21^(WAF1/CIP1)启动子乙酰化水平影响乳腺癌MCF-7细胞周期被引量：12
- 2017年
- 目的研究组蛋白去乙酰化酶抑制剂(histone deacetylase inhibitor,HDACI)调控p21^(WAF1/CIP1)启动子乙酰化水平,调节乳腺癌MCF-7细胞周期的分子机制。方法采用实时定量PCR、Western blot和DNA-Ch IP方法测定SAHA对乳腺癌MCF-7细胞周期调控系统的影响;应用染色质免疫沉淀(chromatin immunoprecipitation,Ch IP)技术探究SAHA调控p21^(WAF1/CIP1)启动子乙酰化水平的情况。结果 SAHA明显影响乳腺癌细胞周期相关调控因子的表达;在针对p21^(WAF1/CIP1)基因功能的筛查中发现,SAHA可明显诱导p21^(WAF1/CIP1)mRNA和蛋白的表达,并且可调节p21^(WAF1/CIP1)启动子乙酰化水平。结论 SAHA通过影响p21^(WAF1/CIP1)启动子乙酰化程度调节乳腺癌MCF-7细胞周期的进程。
- 周慧周伟强
- 关键词：乳腺癌MCF-7SAHA乙酰化
- Nestin与乳腺癌发生发展关系
- 2021年
- 乳腺癌是目前女性最常见的恶性肿瘤,由于其高患病率以及高死亡率,严重威胁女性的健康和生活。有研究表明Nestin在多种癌症中与新血管生成密切相关,在乳腺癌患者中,也能检测到Nestin的表达增高,并且其与乳腺癌转移、进展和预后等相关。本文将对Nestin以及其对癌症尤其是乳腺癌发生发展的关系作一简要综述。
- 郭亚瑞周伟强
- 关键词：NESTIN乳腺癌肿瘤标记物血管生成
- 组织蛋白酶B在SAHA诱导乳腺癌MCF-7细胞凋亡过程中的调控作用被引量：6
- 2016年
- 目的阐明组织蛋白酶B(cathepsin B,Cat B)在SAHA诱导的乳腺癌雌激素受体阳性细胞系MCF-7细胞凋亡中的调控作用。方法采用MTT法检测SAHA对乳腺癌MCF-7细胞生长状况的影响;应用ELISA方法测定SAHA作用于MCF-7细胞后相关蛋白表达变化的情况;通过Bio Station^(IM)活细胞工作站实时收集各种处理因素对乳腺癌MCF-7细胞增殖干预的形态学影响;并通过自动细胞分析仪Muse Cell Analyzer分析SAHA对MCF-7细胞活力和细胞凋亡的影响。结果 SAHA能明显抑制乳腺癌MCF-7细胞的增殖,其最佳作用浓度为10μmol·L^(- 1),最佳作用时间为24 h。ELISA结果表明,SAHA能诱导乳腺癌MCF-7细胞中Cat B的表达。实时活细胞工作站成像实验从形态学上证明,Cat B抑制剂Cystatin C和SAHA联合应用可有效阻止SAHA对MCF-7细胞生长的抑制作用。细胞学实验结果表明,SAHA能使MCF-7细胞活力下降,细胞凋亡发生率明显增高;然而经过Cystatin C处理后的MCF-7细胞活力增加,细胞凋亡发生率下降。结论 Cat B在SAHA诱导乳腺癌雌激素受体阳性细胞MCF-7凋亡过程中具有重要的调控作用。
- 李静周伟强
- 关键词：乳腺癌MCF-7组织蛋白酶BSAHA细胞凋亡
- 组织蛋白酶V对乳腺癌MCF-7细胞增殖抑制作用的研究被引量：1
- 2018年
- 目的探讨组织蛋白酶V(CTSV)对乳腺癌MCF-7细胞增殖的抑制作用。方法以人乳腺癌MCF-7细胞为研究对象,分为正常对照组和SAHA(0.5、1、2、5、10、20和50μmol/L)组。MUSE自动细胞分析仪检测辛二酰苯胺异羟肟酸(SAHA)对MCF-7细胞活力的影响,实时荧光定量PCR技术检测MCF-7细胞中微管相关蛋白1轻链3 A(LC3A)和CTSV mRNA表达变化的情况,Western blot检测CTSV蛋白的表达水平。结果 MUSE自动细胞分析仪结果显示,与正常对照组比较,经过SAHA处理后MCF-7细胞活力明显下降(P<0.01)。实时荧光定量PCR结果表明,LC3A和CTSV mRNA水平在SAHA的作用下增加(P<0.01)。Western blot结果发现,SAHA可以促进CTSV蛋白表达增加(P<0.05)。结论 CTSV在SAHA诱导的乳腺癌细胞增殖抑制过程中起到重要的调控作用。
- 周慧韩翰侯昕彤刘春阳孙玮璐周伟强
- 关键词：乳腺癌SAHA
- 敲低TRAIL-DR5抑制辛二酰苯胺异羟肟酸(SAHA)诱导的MCF-7乳腺癌细胞自噬被引量：3
- 2017年
- 目的探讨肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体-死亡受体5(TRAIL-DR5)在辛二酰苯胺异羟肟酸(SAHA)诱导乳腺癌MCF-7细胞自噬过程中的调控作用。方法对数生长期MCF-7细胞分为空白对照组、SAHA处理组、TRAIL-DR5 siRNA处理组及SAHA联合TRAIL-DR5 siRNA处理组。Western blot法验证TRAIL-DR5的沉默效果,定量PCR阵列检测细胞自噬相关基因9B(ATG9B)、微管相关蛋白1轻链3A(LC3A)及LC3B的mRNA水平;Western blot法检测MCF-7细胞自噬相关蛋白beclin-1、ATG3、ATG5、ATG7、ATG12、ATG16、ATG4 A、ATG4 B、ATG9 B及LC3Ⅱ和组织蛋白酶B(CTSB)的蛋白水平;ELISA分析乳腺癌细胞培养上清液CTSB水平;免疫荧光细胞化学染色检测乳腺癌细胞LC3Ⅱ表达和分布。结果 TRAIL-DR5 siRNA转染后明显敲低MCF-7细胞的TRAIL-DR5水平。敲低TRAIL-DR5受体可抑制上述自噬相关基因及蛋白的表达水平,抑制乳腺癌细胞中CTSB蛋白的表达;SAHA处理MCF-7细胞后,LC3Ⅱ含量增加,当敲低TRAIL-DR5受体后,LC3Ⅱ水平明显弱于单独SAHA处理的细胞。结论敲低TRAIL-DR5受体抑制SAHA诱导的MCF-7乳腺癌细胞自噬作用。
- 韩翰周慧孙玮璐刘春阳候昕彤周伟强
- 关键词：细胞自噬
- 瘦素调控乳腺癌MDA-MB-231细胞周期进程的研究被引量：2
- 2016年
- 目的:研究瘦素诱导乳腺癌MDA-MB-231细胞周期进程。方法:采用MTT、细胞活力、凋亡及细胞周期测定瘦素刺激乳腺癌MDA-MB-231细胞生长、增殖的生物学能力。并采用实时定量PCR及Western blot法测定瘦素对乳腺癌细胞周期调控的分子机制。结果:瘦素作用浓度为1.25 nmol/L、作用时间为24 h的条件下对乳腺癌MDA-MB-231细胞有诱导生长的效果。经瘦素处理后的MDA-MB-231细胞表现为细胞活力显著增强,细胞死亡率和早晚期细胞凋亡发生率明显下降。细胞周期检测结果也证实经瘦素作用后MDA-MB-231细胞进入S期的细胞增多。通过筛查瘦素对细胞周期相关调控因子m RNA和蛋白水平表达影响中发现,瘦素对MDA-MB-231细胞周期调控因子相关的影响主要集中在G1→S期限制点调控上。结论:瘦素可显著刺激乳腺癌MDA-MB-231细胞生长,增强乳腺癌细胞恶变性的生物学能力。
- 周伟强
- 关键词：乳腺癌MDA-MB-231细胞周期
- 组织蛋白酶B对肿瘤血管生成的诱导作用被引量：1
- 2014年
- 肿瘤的发展与其侵袭程度密切相关。人体内参与肿瘤侵袭的蛋白酶主要有：基质金属蛋白酶、丝氨酸蛋白酶及组织蛋白酶（Cat）。组织蛋白酶是人体内的一类蛋白质水解酶，根据其催化中心的不同分又为半胱氨酸组织蛋白酶、天门冬氨酸组织蛋白酶、丝氨酸蛋白酶。其中半胱氨酸组织蛋白酶包括有木瓜蛋白酶家族和钙离子激活蛋白酶家族。木瓜蛋白酶家族主要存在于溶酶体内，故又称为溶酶体组织蛋白，包括CatB、D、H、S、L。
- 李康慧周伟强
- 关键词：组织蛋白酶B癌症血管生成
- 乳腺癌MCF-7细胞p21^(WAF1/CIP1)启动子区HDAC1高功能结合位点的研究被引量：6
- 2017年
- 目的研究乳腺癌MCF-7细胞中组蛋白去乙酰化酶1(histone deacetylases 1,HDAC1)募集于p21^(WAF1/CIP1)启动子区调控其转录活性的特异性结合位点。方法将处于对数生长期的乳腺癌MCF-7细胞在无血清培养基中饥饿24 h后,分别用20μmol·L^(-1)0.88μL SAHA(S组)、0.625 nmol·L^(-1)10μL Leptin(L组)处理24 h,对照组(B组)细胞培养在完全型RPMI 1640培养基中。各组细胞裂解液与HDAC1抗体孵育,收集纯化结合HDAC1抗体的DNA片段,应用Realtime PCR法检测p21^(WAF1/CIP1)启动子区从TSS到其上游(+2^-4 000 bp)f1~f10片段的DNA相对表达量并用2-ΔΔCT法分析。结果 B组中,HDAC1抗体在p21^(WAF1/CIP1)启动子区f1、f8片段有高亲和力,f8片段达最高。S组中,HDAC1抗体与p21^(WAF1/CIP1)启动子区f1~f10片段结合量明显低于对照组,f8片段达最低,而在L组此片段与HDAC1抗体结合量达最大值。结论乳腺癌MCF-7细胞增殖过程中,HDAC1可被招募至p21^(WAF1/CIP1)启动子区,该启动子区上游-2 800 bp至-3 200 bp DNA片段是与HDAC1高度结合的靶功能区。
- 邹丹周伟强
- 关键词：乳腺癌组蛋白去乙酰化酶1
- SAHA和TRAIL联合应用对雌激素受体阳性乳腺癌细胞MCF-7生长抑制的分子机制被引量：2
- 2016年
- 目的探讨SAHA(suberoylanilide hydroxamic acid)和肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(TNF-related apoptosis inducing ligand,TRAIL)联合作用抑制雌激素受体阳性乳腺癌细胞MCF-7生长的分子机制。方法以乳腺癌细胞株MCF-7为研究对象,应用自动细胞分析仪测定SAHA和TRAIL联合作用对乳腺癌细胞活力和细胞凋亡的影响并对细胞周期进行分析;应用实时定量PCR及固相凋亡抗体芯片检测MCF-7细胞凋亡蛋白表达。结果 SAHA和TRAIL联合作用可显著降低MCF-7细胞活力,抑制细胞增殖,并诱导细胞凋亡的产生。SAHA和TRAIL对MCF-7细胞周期的影响主要集中在G_0/G_1期。结论 SAHA和TRAIL联合作用对乳腺癌细胞生长有抑制作用。
- 冯秀艳晏林周伟强
- 关键词：SAHA肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体
- SAHA-CTSV轴通过诱导过度自噬抑制乳腺癌MCF-7细胞的生长被引量：1
- 2021年
- 目的研究SAHA-CTSV轴通过诱导过度自噬抑制乳腺癌MCF-7细胞生长的作用和机制。方法以人乳腺癌MCF-7细胞为研究目标,Muse细胞分析仪检测SAHA对细胞活力的作用;Real-time PCR和Western blot检测SAHA对CTSV的mRNA及蛋白表达的影响,同时检测利用siRNA干扰技术敲除CTSV后的细胞CTSV表达水平;细胞免疫荧光法检测SAHA对LC3II分子的作用;Real-time PCR和Western blot检测SAHA诱导自噬过程中相关ATG分子和LC3的mRNA和蛋白的变化;Bafilomycin A1抑制自噬,随后利用Western blot和Muse细胞分析仪分别检测p62蛋白水平和SAHA作用后的细胞活力。结果SAHA可以抑制MCF-7细胞的增殖,并促进CTSV的表达。CTSV-siRNA转染细胞后,CTSV的mRNA和蛋白水平均显著性降低。SAHA增加了LC3免疫荧光点的分布,与CTSV-siRNA共同作用可恢复由CTSV-siRNA敲减引起的细胞自噬减弱。SAHA在增强ATG4C和Beclin1表达的同时,LC3B也随之升高而mTOR则下降。抑制CTSV表达后也同时逆转了SAHA的效应。Bafilomycin A1阻断自噬后,被SAHA抑制的p62蛋白的表达和细胞活力显著增强。结论SAHA-CTSV轴通过诱导过度自噬抑制乳腺癌MCF-7细胞的生长。
- 周慧韩翰周伟强
- 关键词：乳腺癌SAHAMCF-7细胞LC3
