博士科研启动基金(yj2009-26)
- 作品数：1 被引量：0H指数：0
- 相关作者：许发芝余为一更多>>
- 相关机构：安徽农业大学安徽安丰堂动物药业有限公司更多>>
- 发文基金：博士科研启动基金国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：农业科学更多>>
- 鸡IL-2/NDV-F蛋白抗原表位融合基因的表达及免疫性初探
- 2011年
- 研究鸡白细胞介素-2(chicken interleukin-2,ChIL-2)的免疫佐剂功能,构建ChIL-2与新城疫病毒F蛋白多抗原表位(NDV-F)的嵌合基因,以对鸡新城疫疫病进行防治。采用重叠延伸PCR方法通过基因柔性接头将ChIL-2基因和NDV-F多抗原表位基因构建成ChIL-2-linker-NDV-F嵌合基因并克隆入PET-32a载体,经测序鉴定后,转化BL21大肠杆菌,IPTG诱导表达6×His融合蛋白,Ni2^+亲和柱纯化,表达产物经SDS-PAGE、Western blot和间接ELISA检测和鉴定。结果表明,实验成功构建并克隆了ChIL-2-linker-NDV-F嵌合基因,嵌合基因在大肠杆菌中表达的ChIL-2-linker-NDV-F融合蛋白分子量约为48kD,表达量约占菌体蛋白总量的45%,纯化后的ChIL-2-linker-NDV-F融合蛋白能与感染NDV的鸡血清发生反应。上述结果证明ChIL-2-linker-NDV-F嵌合基因在原核细胞中能有效表达,且融合蛋白具有较强的特异性和免疫原性。
- 许发芝吴胜国余为一
- 关键词：融合蛋白
