国家教育部博士点基金(20115503120007)
- 作品数：5 被引量：14H指数：3
- 相关作者：宋方洲刘革力武向梅李海玉卜友泉更多>>
- 相关机构：重庆医科大学更多>>
- 发文基金：国家教育部博士点基金重庆市自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 过表达Bmi-1基因对乳腺癌细胞株BT474侵袭转移能力的影响被引量：1
- 2014年
- 目的建立过表达Bmi-1的乳腺癌稳定细胞株,检测过表达Bmi-1对该肿瘤细胞株侵袭转移能力的影响,探讨Bmi-1与乳腺癌转移的相关性。方法根据GenBank中人源Bmi-1的mRNA序列,设计引物,构建Bmi-1真核表达载体GV144-Bmi-1,将其转染乳腺癌细胞株BT474,G418筛选建立过表达Bmi-1的稳定细胞株。实时荧光定量PCR和Western blot检测Bmi-1的mRNA和蛋白表达水平,Matrigel和Transwell侵袭小室模型检测转染和未转染BT474细胞体外侵袭和转移能力的变化,荧光定量PCR和Western blot检测细胞中MMP-2、MMP-9蛋白的变化。结果成功构建人源Bmi-1真核表达载体GV144-Bmi-1,转染BT474细胞后,获得稳定转染细胞株。实时荧光定量PCR和Western blot结果显示,与空载体组相比,实验组Bmi-1的mRNA和蛋白表达水平明显增高(P<0.05)。Bmi-1过表达后,迁移能力明显增强、穿膜细胞数明显增多,MMP-2、MM-9 mRNA和蛋白表达水平显著增强(P<0.05)。结论过表达Bmi-1稳定细胞株构建成功,Bmi-1表达上调可显著提高乳腺癌细胞的体外侵袭转移能力。
- 李海玉宋方洲卜友泉易发平朱慧芳汪长东刘革力武向梅
- 关键词：乳腺癌BMI-1过表达
- 支架式教学模式在生理学教学中的应用被引量：3
- 2013年
- 生理学具有系统性、联系性强,推理内容多的特点,是一门比较难学的医学基础课程。为帮助学生学好这门重要的课程,在教学过程中应积极探索有效的教学模式。回顾了支架式教学模式的起源和基本理念,具体分析了在生理学教学过程中支架式教学模式的应用,探讨其对生理学教学实践的指导,以期对生理学教学改革有所启发。
- 武向梅宋方洲
- 关键词：生理学支架式教学教学模式
- siRNA介导的Bmi-1基因沉默对乳腺癌细胞株MDA-MB-231侵袭迁移的影响被引量：4
- 2014年
- 目的:利用小干扰RNA技术沉默Bmi-1基因的表达,探讨其对人乳腺癌细胞株MDA-MB-231侵袭转移能力的影响。方法:设计并化学合成了针对Bmi-1的小干扰RNA,转染具有高转移性的MDA-MB-231细胞,利用qRT-PCR和Western blot分别检测Bmi-1基因mRNA和蛋白的表达水平。体外通过Transwell小室、Matrigel胶模型﹑流式细胞术,观察Bmi-1被沉默后对乳腺癌细胞株MDA-MB-231生物学行为的影响。结果:qRT-PCR和Western结果显示,Bmi-1-siRNA转染组Bmi-1基因表达水平被有效抑制。与对照组相比,Bmi-1-siRNA转染组的细胞侵袭转移能力明显下降,细胞周期发生明显变化,细胞的增殖受到明显抑制。结论:抑制Bmi-1基因的表达可明显抑制MDA-MB-231细胞的侵袭迁移能力。
- 李海玉武向梅陈兴凤李韵樊建军刘革力宋方洲
- 关键词：BMI-1RNA干扰迁移
- 抑制Bmi-1基因表达对鼻咽癌细胞生物学行为的影响被引量：6
- 2014年
- 目的利用小干扰RNA技术沉默Bmi-1基因的表达,探讨其对人鼻咽癌CNE-1生物学行为的影响。方法设计并化学合成了针对Bmi-1的小干扰RNA,转染具有高转移性的CNE-1细胞,利用qRT-PCR和Western blot分别检测Bmi-1基因mRNA和蛋白的表达水平。体外通过Transwell小室、Matrigel胶模型﹑流式细胞术,观察Bmi-1被沉默后对鼻咽癌细胞株CNE-1生物学行为的影响。结果 qRT-PCR和Western结果显示,Bmi-1-siRNA转染组Bmi-1基因的表达水平被有效抑制。与对照组相比,Bmi-1-siRNA转染组的细胞侵袭迁移力明显下降,细胞被阻滞在S期。结论抑制Bmi-1基因的表达可有效降低CNE-1细胞侵袭迁移的能力。
- 李海玉陈兴凤余思颖刘革力宋方洲
- 关键词：BMI-1RNA干扰增殖凋亡
- 干扰Bmi-1表达对宫颈癌Hela细胞TGF-β/Smads通路基因表达的影响
- 2013年
- [目的]干扰Bmi-1对siRNA转染宫颈癌细胞系Hela中TGF-β、Hey1、Hes1、Bmp7、Smad3、Casp3和Casp6基因的表达影响,为寻找宫颈癌中Bmi-1的靶基因奠定基础。[方法]将Bmi-1 siRNA转染Hela细胞,实时荧光定量RT-PCR方法检测转染前后Hela细胞中TGF-β、Hey1、Hes1、Bmp7、Smad3、Casp3和Casp6基因的表达变化,对有明显变化的基因用WesternBlot在蛋白水平进一步验证。[结果]Hela细胞中Bmi-1基因RNA干扰后,TGF-β表达上调,Smad3、Casp3和Casp6基因表达下调。[结论]沉默Bmi-1的表达可使宫颈癌细胞系Hela中TGF-β、Smad3、Casp3和Casp6的表达量均有不同程度的改变,Bmi-1基因在宫颈癌发生发展中可能与TGF-β/Smads信号通路有关。
- 邓小园武向梅刘革力翁华莉易发平卜友泉宋方洲
- 关键词：BMI-1基因宫颈癌RNA干扰
