湖南省卫生厅科研基金(B2003-051)
- 作品数:3 被引量:12H指数:2
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- 相关机构:中南大学湘雅二医院更多>>
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- 相关领域:医药卫生更多>>
- 高效转染体外转录合成的CTGF-siRNA至硬皮病皮肤成纤维细胞被引量:3
- 2005年
- 目的研究CTGF-siRNA的体外转录合成及使用专门转染试剂盒将其转染至硬皮病皮肤成纤维细胞的转染效率,为将RNA干扰技术深入应用到硬皮病治疗做铺垫。方法体外培养硬皮病皮肤成纤维细胞;设计CTGF的siRNA;通过体外转录获得siRNA;将siRNA以SilencerTMsiRNALabelingKit标记;用siPORTTMAmine转染至成纤维细胞;荧光显微镜观察转染情况。结果转染率可高达85.32%。结论该方法操作简便,且可达到理想的转染率。
- 肖嵘罗婧莹刘伏友杨心洁邱湘宁赵会平苏玉文文海泉
- 关键词:SIRNA硬皮病成纤维细胞转染
- 硬皮病皮损中TGF-β1,Smad_3和Smad_7的检测及意义被引量:7
- 2007年
- 目的探讨TGF-β1,Smad3和Smad7在硬皮病发病机制中的作用。方法采用免疫组化SABC法检测30例硬皮病患者皮损中TGF-β1,Smad3和Smad7的表达,并以10例正常人皮肤组织作为对照。结果TGF-β1,Smad3和Smad7在硬皮病皮损中的表达强度均高于正常对照组(P<0.05)。直线相关分析显示,TGF-β1和Smad3呈正相关。结论TGF-β1,Smad3和Smad7在硬皮病皮损中均表达上调,提示它们在硬皮病病理过程中起一定作用;TGF-β1和Smad3在硬皮病的发病机制中可能起着协同作用;Smad7作为细胞内Smad信号的抑制剂在硬皮病皮损中表达上调,可能为机体的一种负反馈调节作用。
- 赵会平肖嵘罗勇奇袁娟梁云生苏玉文陆前进文海泉
- 关键词:转化生长因子Β1SMAD3SMAD7硬皮病
- RNA干扰对系统性硬化病皮肤成纤维细胞结缔组织生长因子表达的影响被引量:2
- 2006年
- 目的研究RNA干扰对系统性硬化病(SS)皮肤成纤维细胞结缔组织生长因子(CTGF)mRNA和蛋白表达水平的影响。方法设计4个针对CTGF的特异性小干扰RNA(siRNA)及一个非特异性siRNA。体外转录获得siRNA,将siRNA用6-羧基荧光素(FAM)标记后瞬时转染至原代培养的SS患者皮肤成纤维细胞;转染48h后,以RT-PCR及蛋白印迹法分别检测CTGFmRNA及蛋白量的变化。结果转染了4个特异性siRNA的成纤维细胞中CTGFmRNA水平均有不同程度下调(P<0.001),抑制效果由强至弱为,siRNA742>siRNA828>siRNA578>siRNA948。蛋白印迹则显示有3个siRNA能使CTGF蛋白表达水平不同程度下调(P<0.001),其中siRNA742的抑制效应最强。结论RNA干扰能显著抑制SS成纤维细胞CTGF的表达。
- 肖嵘罗婧莹刘伏友周英李亚萍周怡新苏玉文文海泉杨心洁
- 关键词:小分子干扰成纤维细胞结缔组织生长因子