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登革病毒悬液芯片分型检测方法的建立被引量：3: 2016年; 目的建立一种基于悬液芯片的登革病毒（dengue virus，DV）检测方法，可对四种血清型登革病毒进行快速检测和鉴定。方法依据GenBank上4种病毒的基因序列信息，设计并合成相关引物及探针序列。抽提病毒RNA，经反转录后对目的基因进行PCR扩增，产物与核酸探针微球组杂交后于Bio-Plex^TM 200系统检测荧光信号值。结果DV1的悬液芯片检测敏感性约9DNA拷贝，DV2、DV3、DV4的悬液芯片检测敏感性约90DNA拷贝。进而将本方法用于检测15份临床标本，其检测结果与分型荧光RT-PCR一致。结论建立了可同时检测四种血清型登革病毒的悬液芯片检测方法，为快速筛查和鉴定登革病毒提供了新的手段。; 史玲莉闫冀焕李云罗明沈军韩伟; 关键词：登革病毒多重PCR

多种蚊媒传染病病原体悬液芯片检测及分型方法的建立被引量：4: 2015年; 目的建立同时检测登革病毒(DENV1~4型)、日本脑炎病毒(JEV)、西尼罗病毒(WNV)、黄热病毒(YFV)、基孔肯雅病毒(CHIKV)、间日疟原虫(Pv)、恶性疟原虫(Pf)、三日疟原虫(Pm)和卵形疟原虫(Po)等6种12型病原体的悬液芯片检测方法。方法依据国家生物技术信息中心(NCBI)公开数据库中上述病原体的基因序列信息,设计并合成相关引物及探针,建立多重聚合酶链反应体系(多重PCR),产物与核酸探针微球组杂交后于Bio Plex200检测荧光信号值。结果建立的悬液芯片筛查方法具有较高的特异性和敏感性,能对6种12型病原体进行特异的检测。敏感性试验结果表明,Pm、CHIKV、Pv、WNV、DENV-1检测敏感性约为9DNA拷贝(3×10-7ng);Po、Pf、JEV、DENV-2、DENV-3、DENV-4和YFV检测敏感性约为90DNA拷贝(3×10-6 ng)。结论本研究建立的多重PCR技术结合悬液芯片筛查方法能快速、敏感、特异地同时检测6种共12型蚊媒传染病病原体,为疾病诊断及媒介生物携带病原体快速筛查和鉴定提供了新的手段。; 史玲莉闫冀焕李云罗明沈军韩伟; 关键词：蚊虫病原体

分型悬液芯片检测疟原虫的方法建立及应用被引量：1: 2015年; 目的建立一种基于悬液芯片技术的疟原虫检测和分型方法,对4种疟原虫进行快速检测和鉴定。方法依据国家生物技术信息中心(NCBI)公开数据库上4种疟原虫的特异管家基因序列信息,设计并合成相关引物探针序列。抽提核酸DNA,经PCR扩增,产物与核酸探针微球组杂交后于Bio Plex200检测荧光信号值。结果优化了PCR方法,间日疟原虫(Pv)、三日疟原虫(Pm)的悬液芯片检测敏感性约9DNA拷贝,恶性疟原虫(Pf)、卵形疟原虫(Po)的悬液芯片检测敏感性约90DNA拷贝。进而将本方法用于检测30份临床样本,其检测结果与分型特异荧光PCR方法完全一致,而且在混合感染样本的快速检测中具有显著的优势。结论建立的可同时检测4种疟原虫的悬液芯片方法特异性高,省时,无交叉反应。为快速筛查和鉴定疟原虫提供了新的手段。; 史玲莉闫冀焕李云罗明沈军韩伟; 关键词：疟原虫 PCR

鼠疫耶尔森氏菌三色荧光定量PCR检测方法的建立: 2014年; 目的建立一种三色荧光定量PCR检测鼠疫耶尔森氏菌的方法。方法根据鼠疫耶尔森氏菌pPCP1质粒上的pla基因、编码F1抗原在pMT1质粒上的ca f1基因以及菌体染色体上的3a基因序列,设计特异性的引物和不同荧光标记的Taqman荧光探针,优化反应体系和扩增条件,考察该方法检测的敏感度、特异性、重复性和稳定性,最终建立三色荧光定量PCR检测方法。结果本研究所建立的方法对鼠疫耶尔森氏菌DNA的扩增效率高,最低检出限为1×102copies/ml,特异性高,重复性的变异系数在合理范围内,稳定性好。结论建立了一种同时检测鼠疫耶尔森氏菌pla、ca f1和3a基因的三色荧光定量PCR方法,该方法敏感度和特异性高,能够实现快速检测的目的。; 潘光合谭勇吴文旺甘洁梁亮覃杨光王鸣柳万道正蓝翊文梁中平; 关键词：鼠疫耶尔森氏菌

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国家质检总局科技计划项目(2012IK225)