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甘肃省新药临床前研究重点实验室开放基金(GSKFKT0707)
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2009
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促红细胞生成素预防内皮细胞凋亡时对天冬氨酸特异性半胱氨酸蛋白酶3亚家族的影响
2009年
目的探讨重组人促红细胞生成素(rhEPO)在预防氧化低密度脂蛋白(ox—LDL)诱导人脐静脉内皮细胞(HUVEcs)凋亡过程中对天冬氨酸特异性半胱氨酸蛋白酶3(caspases一3)亚家族的影响。方法体外培养HUVECs,将细胞随机分组,分别加入caspase一3抑制剂DEVD—CHO、caspase一8抑制剂z—IETD—fmk、caspase-9抑制剂z-LEHD—Imk各25μmol/L预孵育24h后,再加入100mg/LOX—LDL处理48h。平行实验中,加入6.25、25.00、100.00kU/L的rhEPO预处理HUVECs24h,再加入100mg/LOX—LDL处理48h。用比色法检测caspase一3、caspase一8、caspase一9活性;用四甲基偶氮唑盐(MTT)比色法检测HUVECs活性;用流式细胞术检测caspase一3阳性表达率和HuVECs凋亡率。结果caspase一3抑制剂、caspase~8抑制剂分别降低各自对应的caspase活性,caspase一9抑制剂可同时降低caspase一3、caspase一9活性(P均〈O.05)。加入rhEPO预处理后,OX—LDL诱导内皮细胞caspase一3、caspase一9活性及caspase一3阳性表达率降低,且呈剂量依赖性(P均〈0.05),而caspase一8活性无明显变化,HUVECs的细胞凋亡率也呈剂量依赖性降低(P均〈0.05)。结论rhEPO可呈剂量依赖性抑制OX—LDL诱导HUVECs凋亡时caspase一3、caspase一9活性,提示OX—LDL诱导HUVECs凋亡信号通路涉及caspase一3、caspase一9,而与caspase一8无关。
王志禄
熊建文
杨小芳
李俨
许哲通
崔丽君
王锋
谈丽丽
张丽
关键词:
促红细胞生成素
人脐静脉
内皮细胞
氧化低密度脂蛋白
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