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酶切联合巢式PCR法检测外周血单个核细胞中的HBV DNA与HBVcccDNA被引量：1: 2008年; 目的:检测慢性HBV感染者外周血单个核细胞(PBMCs)中HBV的存在状态.方法:采用巢式PCR法检测慢性HBV感染者PBMCs中的HBV DNA;用Hirt法、绿豆核酸酶、设计跨越单链区和三链区巢式PCR引物,以尽可能去除rcDNA的影响,检测共价闭合环状DNA(cccDNA).结果:采用酶切联合巢式PCR法在慢性HBV感染者PBMCs中可扩增出cccDNA,同时未扩增出rcDNA;120例慢性HBV感染者PB-MCs中HBV DNA,cccDNA阳性检出率分别为62.5%,45.8%,HBV DNA阳性检出率明显高于cccDNA(P<0.01);其中HBeAg阳性组PBMCs中HBV DNA检出率(80.0%)和cccDNA阳性率(45.0%)均明显高于HBeAg阴性组(61.7%,30.0%,P<0.01).结论:酶切联合巢式PCR法检测cccDNA可有效避免rcDNA对cccDNA扩增的干扰;结果表明乙肝病毒不仅可感染PBMCs,并可在其中复制;HBeAg阳性者PB-MCs中HBV DNA及cccDNA检出率高.; 蔺淑梅张英陈瑞琳张曦陈天艳叶峰赵英仁张树林; 关键词：外周血单个核细胞共价闭合环状DNA

HBV侵犯外周血单个核细胞对干扰素-γ表达的影响: 2008年; 目的:探讨HBV侵犯外周血单个核细胞(PBMCs)对干扰素-γ(IFN-γ)表达和分泌水平的影响。方法:巢式PCR检测120例慢性HBV感染者PBMCs中HBVDNA;采用实时定量RT-PCR和ELISA法分别检测PBMCs中IFN-γmRNA的表达及血清IFN-γ的分泌水平。结果:120例慢性HBV感染者PBMCs中HBVDNA阳性率为62.5%,且HBeAg阳性组PBMCs中HBVDNA阳性率(80.0%)明显高于HBeAg阴性组(45.0%);慢性HBV感染者IFN-γmRNA的表达和分泌水平均低于健康对照组;慢性HBV感染者PBMCs中HBVDNA阳性组IFN-γmRNA的表达和分泌水平均明显低于HBVDNA阴性组;HBeAg阳性组IFN-γ表达和分泌水平均明显低于HBeAg阴性组。结论:慢性HBV感染者IFN-γ的表达和分泌水平与HBV侵犯PBMCs有关,亦与不同疾病状态相关。; 陈瑞琳蔺淑梅张树林叶峰张曦赵英仁

慢性HBV感染者外周血单个核细胞干扰素-γ的表达及其影响因素被引量：1: 2008年; 目的探讨慢性乙肝病毒(HBV)感染者干扰素-γ(IFN-γ)的表达水平及其影响因素。方法采用实时定量RT-PCR技术和ELISA法分别检测慢性HBV感染者外周血单个核细胞(PBMCs)中IFN-γmRNA的表达和血清IFN-γ的分泌水平;巢式PCR技术检测PBMCs中HBV DNA。结果慢性HBV感染者IFN-γ的表达和分泌水平均明显低于对照组(P<0.01,P<0.05);慢性HBV携带者IFN-γ的表达和分泌水平均显著低于HBeAg阳性组(P均<0.05)和HBeAg阴性组(P均<0.01);HBeAg阳性组IFN-γ的表达和分泌水平均明显低于HBeAg阴性组(P均<0.01);PBMCs中HBV DNA阳性组IFN-γ的表达和分泌水平均明显低于HBV DNA阴性组(P均<0.01);IFN-γ表达和分泌水平与血清HBV DNA水平均呈负相关(P均<0.01)。结论慢性HBV感染者IFN-γ低表达;高病毒载量可抑制IFN-γ的表达。; 陈瑞琳蔺淑梅张树林叶峰张曦赵英仁; 关键词：乙型病毒性肝炎外周血单个核细胞

改良PCR法检测外周血单个核细胞中的HBV DNA与HBVcccDNA被引量：1: 2008年; 目的检测慢性HBV感染者外周血单个核细胞(PBMCs)中HBV DNA的存在状况。方法采用改良PCR法检测慢性HBV感染者PBMCs中HBV DNA、共价闭合环状DNA(cccDNA)。结果120例慢性HBV感染者PBMCs中HBV DNA、cccDNA阳性检出率分别为62.50%、45.83%,HBV DNA阳性检出率高于cccDNA(P<0.01);其中HBeAg阳性组PBMCs中HBV DNA(80.00%)和cccDNA阳性检出率(45.00%)分别明显高于HBeAg阴性组(61.67%)(30.00%)(P均<0.01);PBMCs中HBVDNA检测阳性者血清HBVDNA水平明显高于HBVDNA检测阴性者(P<0.01)。结论改良PCR法检测表明HBV DNA不仅可感染PBMCs,且部分参与复制;PBMCs中HBVDNA存在和复制能力与HBeAg阳性相关;PBMCs中HBV DNA阳性检出率与血清HBV DNA水平有一致性。; 陈瑞琳蔺淑梅张树林叶峰张曦赵英仁; 关键词：乙型外周血单个核细胞共价闭合环状DNA

外周血单个核细胞HBV的复制状态与干扰素-γ表达和分泌的关系被引量：3: 2008年; 目的:研究HBV侵犯外周血单个核细胞(PBMC)及对IFN-γ表达和分泌的影响.方法:慢性HBV感染者60例,巢式PCR检测PBMC中HBV共价闭合环状DNA(cccD-NA);ELISA法检测血清IFN-γ水平;实时定量RT-PCR方法检测PBMC中IFN-γ mRNA的表达水平.结果:48.3%(29/60)的患者PBMC中检测到cccDNA;血清IFN-γ水平低于对照组(P<0.05);PBMC中IFN-γ mRNA表达水平低于对照组(P<0.01);PBMC中cccDNA阳性组IFN-γ表达和分泌水平低于cccDNA阴性组(P<0.01).结论:HBV慢性感染者PB-MC中IFN-γ表达和分泌水平降低.; 陈天艳陈瑞琳蔺淑梅叶峰张曦陈云茹赵英仁张树林; 关键词：外周血单个核细胞

慢性HBV感染者IFN-γ基因启动子甲基化状态的探讨: 2007年; 陈瑞琳蔺淑梅张树林张曦; 关键词：慢性HBV感染者甲基化状态基因启动子 IFN-Γ 公共卫生问题慢性感染

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陕西省自然科学基金(2003C244)