国家自然科学基金(30972764) 作品数:8 被引量:20 H指数:3 相关作者: 冯云 张平 董小倩 刘西茜 张永红 更多>> 相关机构: 四川大学 四川大学华西口腔医院 华西口腔医院 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 美国中华医学基金会项目 更多>> 相关领域: 医药卫生 更多>>
炎症细胞因子诱导Tca8113细胞表达PD-L1的作用研究 被引量:3 2013年 目的通过研究炎症细胞因子对人舌鳞状细胞癌细胞Tca8113中程序性死亡因子配体-1(programmed death 1ligand-1,PD-L1)的表达的影响,探讨肿瘤炎性微环境在肿瘤细胞免疫逃逸中的作用和机制。方法用流式细胞分析术(FCM)检测Tca8113在各种炎症细胞因子〔白介素(IL)-1β、IL-2、IL-6、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、干扰素-γ(IFN-γ)以及其他诱导条件〔牙龈卟啉单胞菌代谢产物(Pg-sup)及活化外周血单个核细胞的代谢产物(PHA-sup)〕处理下PD-L1的表达变化。结果 PHA-sup、Pg-sup液,IL-1β、IL-6、TNF-α、IFN-γ等炎症相关细胞因子均能诱导Tca8113中PD-L1的表达,与未做处理的Tca8113(对照组)比较差异有统计学意义(P<0.05),但IL-2诱导后PD-L1的表达与对照组的差异无统计学意义(P>0.05)。与单个炎症细胞因子诱导比较,炎症细胞因子组合诱导的PD-L1表达均有增高(P<0.05),炎症细胞因子在诱导PD-L1表达中相互之间存在协同效应,其中,IL-1β+IFN-γ、TNF-α+IFN-γ以及L-1β+IL-6+IFN-γ+TNF-α这3组的表达量高于其他各组(P<0.05)。结论肿瘤微环境炎症细胞因子促进肿瘤细胞表达PD-L1,在肿瘤免疫逃逸中发挥重要作用。 卢礼兵 陈娇 冯云 周陈晨 张平关键词:炎症细胞因子 TCA8113 人淋巴结中HMGN2蛋白的分离纯化及其亚细胞分布研究 被引量:3 2010年 从人淋巴结中分离与纯化HMGN2蛋白,探讨HMGN2分子抗菌作用及其在淋巴结中的亚细胞分布。我们采用高效液相色谱分离纯化,琼脂糖弥散法筛选纯化组分的抗菌活性,对活性组分进行质谱分析测定精确分子量,进行Western-blot检测同源性。结果成功从人淋巴结中分离纯化出的活性蛋白,对致病性大肠杆菌54080有抗菌活性,质谱精确分子质量测定、Western-blot分析证明此活性蛋白即为HMGN2分子,免疫组化实验结果显示在淋巴结组织细胞细胞浆和细胞核均有HMGN2蛋白分布。从人淋巴结组织成功分离纯化出纯度较高、具有生物活性的HMGN2蛋白,可能参与了体内的天然免疫防御作用。 李薇 张平 孔祥丽 李燕 陈思秀 冯云 吴琦 王伯瑶关键词:人淋巴结 HMGN2 分离纯化 亚细胞定位 重组人HMGN2在大肠杆菌中表达及其体外抗乙型肝炎病毒活性研究 2011年 目的制备重组人高迁移率非组蛋白N2蛋白(HMGN2),研究重组HMGN2的抗乙型肝炎病毒(HBV)活性。方法通过RT-PCR分离纯化人HMGN2基因,并将其构建到原核表达质粒pGEX-4T-1中,经IPTG诱导表达。产物经GST蛋白纯化系统进行纯化,用SDS-PAGE及Western blot分析鉴定。采用MTT法检测重组HMGN2蛋白对稳定转染复制型HBV重组质粒的肝癌细胞株HepG2.2.15细胞的细胞毒性;不同浓度HMGN2蛋白作用于HepG2.2.15细胞,分别在第3 d和6 d收集细胞培养上清液,ELISA检测上清中HBV表面抗原(HBsAg)及e抗原(HBeAg),采用实时荧光定量PCR法检测上清液HBV DNA的含量。结果成功构建了HMGN2蛋白原核表达载体pGEX-HMGN2,并分离提纯了原核表达的HMGN2蛋白。Western blot结果显示,该蛋白能被抗HMGN2抗体识别。在检测的1~100μg/mL范围内,HMGN2蛋白对HepG2.2.15细胞的无细胞毒性;HMGN2蛋白在1~5μg/mL水平即可抑制HBeAg和HBsAg的表达,可降低HBV DNA拷贝数。结论成功构建HMGN2原核表达载体,并分离提纯了纯度较高的HMGN2蛋白;重组的HMGN2蛋白在体外具有较强的抗HBV活性。 何兴俐 张永红 金淑慧 冯云关键词:抗HBV活性 光动力疗法对慢性牙周炎治疗效果的Meta分析 被引量:2 2012年 目的:比较并评价在慢性牙周炎治疗中,光动力疗法辅助龈下刮治和根面平整术(scaling and root planing,SRP)的临床效果是否优于单纯龈下刮治和根面平整术。方法:主要检索OVID、springerlink、ScienceDirect、Pubmed数据库等,收集自建库到2011年11月公开发表的关于光动力疗法辅助龈下刮治和根面平整术治疗慢性牙周炎随机对照试验的英文文献,随访时间不得少于一个月,测量结果包括术后牙周探诊深度(probing depth,PD)的减少、临床附着水平(clinical attach-ment level,CAL)的增加等。采用Jadad法对文章质量进行评价,并使用Revman5.2对实验数据进行Meta分析。结果:共有5篇文献符合纳入条件,Meta分析结果显示光动力学疗法辅助SRP和单纯SRP相比,三个月及六个月后两组之间牙周探诊深度差异无统计学意义,附着丧失也无统计学意义。结论:在慢性牙周炎的治疗过程中,光动力疗法辅助SRP并不能明显降低牙周探针深度和附着丧失。 刘西茜 冯云关键词:光动力疗法 慢性牙周炎 META分析 高迁移率族蛋白N2抑制口腔鳞状细胞癌增殖作用的体外研究 被引量:3 2013年 目的以人口腔鳞状细胞癌细胞株Tca8113为实验模型,初步探讨高迁移率族蛋白N2(HMGN2)抗口腔鳞状细胞癌的作用。方法大量培养重组人HMGN2表达载体大肠杆菌BL21,用异丙基-1-硫代-β-呋喃半乳糖苷(IPTG)诱导HMGN2的表达,产物用B-PER GST Fusion Protein Purification Kit进行纯化。在细胞培养基中加入不同质量浓度的HMGN2,通过MTT、Hoechst 33342荧光染色、流式细胞术和Western-blot法检测其凋亡效果及抗凋亡的分子机制。结果经MTT检测证明HMGN2能显著抑制Tca8113细胞的生长,通过Hoechst 33342荧光染色、流式细胞术和Western-blot检测证明HMGN2能使Tca8113的细胞形态发生改变,并且能使Tca8113细胞阻滞于细胞周期的S期,促进Tca8113细胞凋亡。结论 HMGN2可以促进人口腔鳞状细胞癌细胞的凋亡。 董小倩 刘西茜 张永红 张平 卢礼兵 李小玉 黄萍 冯云种植体周骨破坏的预防 被引量:4 2011年 牙种植术后常发生种植体周围炎,可使支持骨丧失、骨性结合失败,甚至导致已经形成骨结合并行使功能的种植体脱落。其常见原因包括微生物因素、吸烟、过度负荷、种植体设计及表面处理、个人口腔卫生等。预防主要从患者个人和临床两方面着手。一方面,患者要有很好的依从性;另一方面,医生要严格把握手术适应症,合理选择种植体,并做好术后维护。 董小倩 冯云 黄萍关键词:种植体周围炎 骨破坏 高迁移率族蛋白N家族抗肿瘤活性的研究进展 被引量:2 2013年 高迁移率族(HMG)蛋白是一种广泛存在于真核生物染色质内的非组蛋白,因其相对分子质量小,在聚丙稀酰胺凝胶电泳时迁移速度快而得名。高迁移率族蛋白N家族(HMGN)是新发现的因子,它在DNA损伤的染色质改变中起着重要作用,DNA损伤是肿瘤形成和发展的主要因素,而DNA损伤主要源自紫外线和电离辐射。本文将对HMGN在抗肿瘤方面的作用作一综述。 董小倩 冯云关键词:抗肿瘤 高迁移率族蛋白N2对人舌癌裸鼠移植瘤的抑瘤作用研究 被引量:4 2014年 目的研究高迁移率族蛋白N2(HMGN2)对人舌癌裸鼠移植瘤生长的抑瘤作用。方法裸鼠腋下注射接种舌鳞癌细胞Tca8113以建立裸鼠移植瘤模型,接种7 d成瘤后,设立阴性对照组、HMGN2蛋白组和阳性对照组,在瘤体周边分别注射含washingbufferⅡ、HMGN2蛋白和顺铂的细胞培养基。观察各组裸鼠肿瘤的生长情况,经过4次给药后处死裸鼠,取出瘤块,称其质量计算抑瘤率,并行苏木精-伊红(HE)染色观察形态学变化。结果成功建立舌癌裸鼠移植瘤模型。HMGN2蛋白组和阳性对照组肿瘤体积明显小于阴性对照组。裸鼠体重在整个实验过程中并没有明显的变化。阴性对照组、HMGN2蛋白组、阳性对照组的肿瘤质量平均值分别为(0.38±0.19)、(0.21±0.15)、(0.23±0.16)g,3组间的差异无统计学意义。HMGN2蛋白组和阳性对照组的抑瘤率分别为45.71%和39.44%。肿瘤经肉眼观察可见阴性对照组瘤块较大,HE染色可见HMGN2蛋白组和阳性对照组细胞坏死明显。结论 HMGN2蛋白可以明显抑制人舌癌裸鼠移植瘤的生长。 刘西茜 董小倩 张永红 张平 李小玉 陈思秀 冯云关键词:移植瘤 TCA8113细胞