福建省教育厅科技项目(JA04200)
- 作品数：12 被引量：94H指数：5
- 相关作者：陈春美杨卫忠石松生王春华蔡冬生更多>>
- 相关机构：福建医科大学更多>>
- 发文基金：福建省教育厅科技项目更多>>
- 相关领域：医药卫生文化科学更多>>
- 神经节苷酯对大鼠脑缺血神经细胞凋亡的影响被引量：14
- 2009年
- 目的研究神经节苷脂(GM)对大鼠脑缺血神经细胞凋亡的抑制作用及可能机制。方法线栓法制作大鼠大脑中动脉栓塞模型,♂SD大鼠,随机分成假手术组、模型对照组、GM低、中、高剂量治疗组,缺血48 h后各组大鼠神经功能缺陷评分,测定脑组织一氧化氮(NO)的含量,检测脑细胞凋亡率,分析脑缺血区诱生型一氧化氮合酶(iNOS)和Caspase-3 mRNA的表达。结果与假手术组比较,模型对照组、GM低、中、高剂量治疗组神经功能缺陷评分、NO含量、凋亡率、iNOS和Caspase-3表达量均增加,差异有统计学意义(P<0.05);与模型对照组和GM低剂量治疗组比较,GM中、高剂量治疗组均明显下降,差异有统计学意义(P<0.05);模型对照组和GM低剂量治疗组之间差异无统计学意义(P>0.05),GM中剂量治疗组和高剂量治疗组之间差异也无统计学意义(P>0.05)。结论神经节苷酯减少iN-OS生成,抑制细胞凋亡,对缺血神经细胞产生保护作用。
- 陈新峰陈春美
- 关键词：脑缺血神经节苷脂诱生型一氧化氮合成酶凋亡
- NOS反义RNA重组腺相关病毒载体体内提高脑细胞耐缺血能力的实验研究被引量：2
- 2008年
- 目的探讨二种分别携带神经元型一氧化氮合酶（nNOS）、诱导型一氧化氮合酶（iNOS）反义RNA重组腺相关病毒载体（rAAV—AsnNOS和rAAV-AsiNOS）提高脑细胞耐受缺血能力的作用机制。方法应用立体定位技术将预处理好的病毒载体转染至将要梗死侧的基底节区，转染病毒滴度为2×10^9mL～，并将SD大鼠分为4组：即rAAV-AsnNOS组，rAAV-AsiNOS组，rAAV—LacZ组和对照组；处理后运用MACO建立缺血模型，每组分为缺血早期和缺血晚期，流式细胞术（FCM）检测NT阳性细胞百分比和细胞凋亡率，逆转录反应系统（RT-PCR）分析nNOS、iNOS，p38MAPK，Caspase-3 mRNA的表达。结果一定剂量的重组病毒载体转染到大鼠海马区域，无神经损伤症状；转染rAAV-AsnNOS病毒载体的脑神经细胞在缺血早期（缺血1～6h），NT阳性细胞百分比、细胞凋亡率以及nNOS、p38MAPK和Caspase-3 mRNA表达量均较对照组、rAAV-LacZ组和rAAV—AsiNOS组降低；转染rAAV—AsiNOS病毒载体的脑神经细胞在缺血晚期（缺血24—72h），NT阳性细胞百分比、细胞凋亡率以及nNOS、p38MAPK和Caspase-3 mRNA表达量均较对照组、rAAV-LacZ组和rAAV-AsnNOS组降低，差异有统计学意义。结论转染重组病毒载体后动物模型脑神经细胞能够耐受缺血损伤，转染rAAV-AsnNOS病毒载体的脑神经细胞能够在缺血早期抑制nNOS、p38MAPK和Caspase-3的表达，转染rAAV—AsiNOS病毒载体的脑神经细胞能够在缺血晚期抑制iNOS、038MAPK和Caspase-3的表达，从而在缺血后抑制神经细胞凋亡的发生。
- 杨卫忠陈春美王春华石松生陈建屏黄勇蔡冬生
- 关键词：一氧化氮合酶重组腺相关病毒载体
- 一氧化氮合酶反义RNA重组腺相关病毒载体体外提高PC12细胞耐缺氧的能力被引量：1
- 2007年
- 目的探讨2种分别携带神经元型一氧化氮合酶(nNOS)、诱导型一氧化氮合酶(iN- OS)反义RNA重组腺相关病毒载体(rAAV-/mnNOS和rAAV-AsiNOS)提高PC12细胞耐氧能力和抑制PC12细胞凋亡的作用机制。方法将PC12细胞培养基换成分别含有rAAV-AsnNOS、rAAV-Asi- NOS和rAAV-LacZ(携带β-半乳糖苷酶的结构基因重组腺相关病毒载体)的10%胎牛血清DMEM,设立对照组,测定不同rAAV转染后PC12细胞在不同缺氧时间下细胞生长趋势和乳酸脱氢酶(LDH)活性改变,流式细胞仪(FCM)测定细胞凋亡率,FCM和半定量RT-PCR分别分析nNOS、iN- OS、p38MAPK和Caspase-3阳性细胞百分比和mRNA的表达。结果一定感染复数的rAAV对PC12细胞生长趋势无明显影响;转染rAAV-AsnNOS的PC12细胞在缺氧1～6 h时LDH活性、细胞凋亡率以及nNOS、p38MAPK和Caspase-3阳性细胞百分比和mRNA表达量均较对照组、rAAV-LacZ组和rAAV-AsiNOS组均降低;转染rAAV-AsiNOS的PC12细胞在缺氧6～24h时LDH活性、细胞凋亡率以及iNOS、p38MAPK和Caspase-3阳性细胞百分比和mRNA表达量也均较对照组、rAAV-LacZ组和rAAV-AsnNOS组降低。结论在体外神经细胞缺氧模型中,转染后PC12细胞能够耐受缺氧损伤;转染rAAV-AsnNOS病毒载体的PC12细胞能够在缺氧早期抑制nNOS、p38MAPK和Caspase-3的表达,转染rAAV-AsiNOS病毒载体的PC12细胞能够在缺氧晚期抑制iNOS、p38MAPK和Caspase- 3的表达。
- 杨卫忠陈春美王春华石松生黄勇宋施委王锐
- 关键词：一氧化氮合酶脱噬作用重组腺相关病毒载体
- 大面积脑梗死患者血清NO和NOS活性在去骨瓣减压术前、术后变化分析
- 2010年
- 目的:探讨血清NO和NOS活性在急性大面积脑梗死(ACI)患者手术前后的变化规律。方法:急性大面积脑梗死患者18例,均采用全麻开颅去骨瓣减压手术,分别于术前1h,术后1、12、72h采集静脉血5ml各2份。分别检测NO含量和NOS活性。结果:本组患者18例术后3d内无死亡病例,术后患者意识不同程度改善;NO含量和NOS活性术前和术后1h差异均无统计学意义(P>0.05),术后24h和72h均出现进行性下降,与术前比较,差异均有统计学意义(P<0.05),术后72h明显低于术后24h,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论:去骨瓣减压是治疗急性大面积脑梗死的有效治疗手段,能够减低患者的死亡率;NO和NOS参与并影响了ACI后复杂的病理生理过程,去骨瓣减压后局部脑血供得到有效改善,NOS活性减低,合成NO减少,神经毒性减低,临床症状好转。
- 陈春美杨卫忠王锐石松生王春华
- 关键词：一氧化氮一氧化氮合酶
- 一氧化氮合酶、p38MAPK、Caspase-3介导缺氧神经细胞凋亡机制的研究被引量：21
- 2007年
- 目的探讨缺氧引起PC12细胞凋亡和NOS、p38MAPK和Caspase-3在缺氧后神经细胞凋亡中的共同作用机制。方法应用噻唑蓝（MTT）法测定缺氧对PC12细胞的生长抑制率，荧光显微镜观察缺氧对PC12细胞损伤，比色法测定PC12细胞在缺氧环境下乳酸脱氢酶（LDH）活性，流式细胞术（FCM）检测缺氧PC12细胞NT阳性细胞百分比，以及细胞周期改变和细胞凋亡率，RT-PCR半定量分析nNOS、iNOS、p38MAPK和Caspase-3 mRNA的表达。结果MTT法测定缺氧抑制PC12细胞生长趋势；AO荧光染色缺氧24h时PC12细胞可见凋亡小体；缺氧时间延长，LDH渗出量增多，NT阳性细胞百分比增大，S期细胞增多，细胞凋亡率升高，缺氧24h调亡率达到45．67％；PCR结果分析显示nNOS mRNA在缺氧早期表达，iNOS、p38MAPK和Caspase-3 mRNA主要在缺氧晚期表达。结论缺氧能够引起PC12细胞凋亡现象，nNOS、iNOS分别在缺氧早期和晚期发挥神经毒性作用，NOS，p38MAPK和Caspase-3三种基因共同介导缺氧后PC12细胞凋亡。
- 陈春美杨卫忠王春华石松生蓝佛琳涂献坤
- 关键词：缺氧脱噬作用P38MAPKCASPASE-3
- NOS、p38MAPK、Caspase-3介导大鼠脑缺血神经细胞凋亡可能通路的实验研究被引量：18
- 2008年
- 目的探讨脑缺血后细胞凋亡发生的可能机制以及神经元型一氧化氮合酶（neuronal nitric oxide synthase，nNOS）、诱导型一氧化氮合酶（inducible nitric oxide synthase，iNOS），p38丝裂原活化蛋白激酶（mitogen activated proteinkinase p38．p38MAPK）和半光氨酸蛋白酶-3（caspase-3）在脑缺血后神经细胞凋亡中的共同作用机制。方法采用线栓法闭塞大鼠大脑中动脉（middle cerebral artery occlusion，MACO）建立脑缺血SD大鼠模型，应用透射电镜观察脑缺血对脑组织超微结构的影响，流式细胞仪方法（FCM）分别定量检测细胞凋亡率，半定量RT—PCR检测nNOS、iNOS，p38MAPK和Caspase-3 mRNA表达水平。结果透视电镜下脑缺血6h出现核固缩，缺血12h出现细胞核分裂，缺血24h出现凋亡小体；FCM检测细胞凋亡百分率随着缺血时间延长而增加，缺血72h达到高峰，约70．37％；RT—PCR产物的琼脂糖凝胶电泳显示nNOS、iNOS、p38MAPK和Caspase-3 mRNA的特异性片段大小分别为501、342、250和342bp，但mRNA。表达量不一致，nNOSmRNA主要在缺血早期表达，iNOS，p38MAPK和Caspase-3 mRNA在缺血中晚期表达，并在缺血3～5d，后三种基因的表达量达到高峰。结论脑缺血区域发生典型的神经细胞凋亡现象，nNOS来源的NOS在缺血早期发挥神经毒性作用，INOS来源的NOS在缺血晚期发挥神经毒性作用；NOS，p38MAPK和Caspase-3三种基因的相互关系可能构成介导缺血神经细胞凋亡的通路之一。
- 陈春美杨卫忠王春华石松生易海波陈晓斌蔡冬生杨意堃
- 关键词：脑缺血凋亡NOSP38MAPKCASPASE-3
- 一氧化氮及一氧化氮合酶在脑缺血再灌注损伤中的作用被引量：2
- 2005年
- 陈春美杨卫忠
- 关键词：脑损伤一氧化氮一氧化氮合酶缺血再灌注基因转移
- 一氧化氮和一氧化氮合酶在急性大面积脑梗死患者中的表达被引量：2
- 2011年
- 目的观察一氧化氮（NO）和一氧化氮合酶（NOS）在急性大面积脑梗死患者去骨瓣术后的表达。方法急性大面积脑梗死患者16例（脑梗死组），均采用全麻开颅去骨瓣减压手术，手术中切除部分梗死额叶组织；以6例重型颅脑外伤行正常额叶组织内减压为对照组。2组均采用透视电镜观察额叶细胞超微结构，检测NO含量和NOS活性，Western blot法分析内皮型NOS（eNOS）、神经元型NOS（nNOS）和诱导型NOS（iNOS）蛋白表达特点。结果本组病例16例脑梗死患者术后神志不同程度改善，无死亡病例；NO含量在脑梗死组和对照组分别为85．4U／m1和36．2U／甜，NOS活性在脑梗死组和对照组分别为63．2μmol／L和37．2μmol／L，差异均有统计学意义（P〈0．05）；与对照组比较，eNOS、nNOS和iNOS在脑梗死组中表达均明显升高，尤其是iNOS表达相对值为0．76，远远超过对照组未见表达，差异均有统计学意义（P〈0．05）。结论去骨瓣减压是治疗急性大面积脑梗死的有效治疗手段，能够降低患者死亡率；NO和NOS参与并影响了大面积脑梗死后复杂的病理生理过程，去骨瓣减压后局部脑血供得到有效改善，NOS活性减低，尤其iNOS活性明显减少，合成NO减少，神经毒性减低，临床症状好转。
- 陈春美杨卫忠王锐石松生王春华
- 关键词：脑梗死一氧化氮合酶去骨瓣减压
- 一氧化氮和一氧化氮合酶在大鼠局灶性脑缺血中的表达特点被引量：46
- 2007年
- 目的建立脑缺血SD大鼠模型,探讨一氧化氮(NO)和一氧化氮合酶(NOS)在脑缺血模型中的表达特点。方法应用线栓法制作大脑中动脉阻塞(MCAO)局灶性脑缺血模型,根据缺血不同时间分为8组,设立假手术组和正常对照组,每组各有6只大鼠。应用硝酸还原酶法测定脑组织NO的含量,流式细胞术(FCM)定量检测硝基酪氨酸(NT)表达,化学比色法测定脑组织NOS的活性,免疫组织化学方法定位检测eNOS、nNOS和iNOS表达位置,逆转录反应系统(RT-PCR)半定量分析eNOS、nNOS和iNOS的 mRNA在脑缺血区域的表达。结果神经功能缺失评分发现缺血时间越长,神经功能缺失越明显;脑组织中NO含量与缺血时间正相关;缺血1h后NT阳性细胞百分比开始明显升高(9.50%);缺血0.5h时NOS的活性开始升高,缺血3d达到高峰[0.94nmol/(g.min)];免疫组织化学提示eNOS在神经细胞和血管内皮细胞胞浆均有表达,nNOS和iNOS抗体主要在神经细胞胞浆中表达;RT-PCR半定量分析在缺血早期(0.5h^6h),随着缺血时间延长,eNOS和nNOS表达增加,iNOS未见表达或低表达;缺血中晚期(6h^5d),iNOS高表达,并与缺血时间呈正相关,eNOS和nNOS表达明显减少。结论脑缺血时间延长,NOS的活性升高,NO在体内特异性代谢产物NT量增加,神经功能缺失越明显;NOS在缺血早期以eNOS和nNOS为主,在缺血晚期以iNOS为主。
- 杨卫忠陈春美王春华石松生雷军荣张永亮
- 关键词：脑缺血一氧化氮内皮型一氧化氮合酶神经元型一氧化氮合酶诱导型一氧化氮合酶
- 有氧训练对大鼠局灶性脑缺血后神经功能修复的实验研究被引量：3
- 2008年
- 目的:研究有氧运动对大鼠局灶性脑缺血后神经功能修复和促进eNOS表达的机制。方法:建立局灶性脑缺血SD大鼠模型后,运动组采用适度游泳训练,对照组制动。分析大鼠神经功能缺失评分和缺血神经细胞超微结构;检测缺血区域一氧化氮(NO)的含量、一氧化氮合酶(NOS)的活性和内皮细胞型NOS(eNOS)基因表达量。结果:电镜观察对照组缺血神经细胞溶解,空泡变性,运动组细胞形态结构和细胞器完整;比较缺血10d的对照组和运动组,神经功能缺失评分、NO含量、NOS的活性和eNOS mRNA表达量之间的盖异无统计学意义(P>0.05);而在缺血30 d和60 d的对照组和运动组之间,神经功能缺失评分、NO含量、NOS的活性和eNOS mRNA表达量之间的差异有统计学意义(P<0.05)。结论:有氧训练能够增强局部脑缺血区域神经细胞eNOS基因的表达,提高NO的合成量,改善局部缺血区域血运,促进损失神经细胞的恢复。
- 吴伟奋陈春美董华孙镭杨卫忠
- 关键词：有氧运动脑缺血神经功能
