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冠心病患者外周血单个核细胞Toll样受体4表达的测定及临床意义被引量：4: 2005年; 目的:观察Toll样受体4(Toll-like receptor 4,TLR4)在冠心病患者外周血单个核细胞(PBMCs)的表达水平,并探讨其与冠状动脉粥样硬化发生发展的关系。方法:流式细胞术检测50例冠状动脉粥样硬化性心脏病(CAD)患者及40例健康对照者PBMCs TLR4的表达;生化常规测定所有入选者血脂水平;应用TaqMan荧光探针技术建立实时荧光定量RT-PCR方法,在GeneAmp 5700型检测仪上测定了入选对象PBMCs中TLR4 mRNA的含量。结果:PBMCs的阳性率为(29.5±7.9)%,显著高于健康对照组的阳性率[(23.4±7.7)%,P<0.01];冠心病组TLR4 mRNA的平均拷贝数显著高于健康对照组[(5.3±3.8)×106vs(1.8±1.4)×106,P<0.01];而冠心病血脂正常组和血脂异常组的TLR4阳性率和mRNA平均拷贝数均无明显差异。结论:TLR4主要表达于外周血单个核细胞,在CAD患者中其阳性率升高;CAD患者TLR4 mRNA的含量显著高于健康对照组;TLR4的阳性率和mRNA含量高低与血脂无关;TLR4及其介导的天然免疫应答与动脉粥样硬化的发生发展存在一定的相关性。; 耿红莲陆慧琦张玲珍张慧周琳仲人前; 关键词：冠状动脉粥样硬化 TOLL样受体4 流式细胞术逆转录聚合酶链反应

AMA-M2抗体阳性原发性胆汁性肝硬化患者的实验室指标特征分析被引量：7: 2010年; 目的分析中国人原发性胆汁性肝硬化(PBC)的实验室指标特征,为PBC实验室诊断提供参考。方法对10余年来保存的361例特异性AMA-M2抗体阳性PBC患者的血清标本,检测分析自身抗体、血清酶谱、免疫球蛋白等指标,并用免疫印迹法分析M2靶抗原分布情况。结果 361例血清标本中最常见的生化指标异常为ALP和GGT,异常率分别为84.5%和78.9%,有71.7%的标本IgM异常增高。14.7%(53/361)ALT、ALP和GGT等生化指标全部正常。AMA和ANA阳性率分别为84.5%和76.7%,在ANA阳性标本中,核膜型与着丝点型为最常见的荧光图形。M2型抗体的三个主要靶抗原PDC-E2、BCOADC-E2和OGDC-E2在本研究患者中的阳性率分别为85.3%、69.5%和24.4%。结论 AMA-M2抗体阳性的中国人PBC,仍以血清IgM、ALP、GGT水平升高和AMA阳性常见,但14.7%PBC患者初诊时ALT、ALP和GGT等生化指标正常。三个主要M2型靶抗原分布不同于白种人报道。; 姜小华傅青春孙建文单阁李君方晓云代龙仲人前; 关键词：自身抗体抗线粒体抗体

细胞外基质蛋白1在乳腺癌组织和细胞株中的表达及其意义被引量：4: 2008年; 目的:探讨细胞外基质蛋白1(extracellular matrix protein1,ECM1)在乳腺癌组织和细胞株中的表达及其意义。方法:应用免疫组织化学和免疫细胞化学EnVision法检测乳腺癌手术切除标本中乳腺组织(正常组织和癌组织)和恶性程度不同的乳腺癌细胞株(MCF-7、Sk-Br-3和MDA-435)中ECM1的表达,并比较正常乳腺组织和乳腺癌组织、淋巴结转移和未转移乳腺癌之间的ECM1表达差异。Western blotting检测确定ECM1亚型蛋白。结果:ECM1的表达在正常乳腺组织中阳性率为8.7%(2/23),在乳腺癌组织中阳性率为60.4%(29/48);其中乳腺癌淋巴结未转移者为38.5%(10/26),淋巴结转移者为86.4%(19/22)。统计分析表明,ECM1的表达在乳腺癌组织中高于正常组织(P<0.01),在转移性乳腺癌中高于非转移性乳腺癌(P<0.01)。恶性程度低的乳腺癌细胞株MCF-7、Sk-Br-3中不表达ECM1,而恶性程度较高的MDA-435细胞株中高表达ECM1。乳腺癌细胞中高表达的ECM1蛋白主要是相对分子质量为68000的ECM1a亚型。结论:ECM1(主要为ECM1a亚型)在乳腺癌组织和恶性程度高的乳腺癌细胞中过表达,并且与乳腺癌的淋巴结转移相关。; 侯彦强仲人前耿红莲倪健孔宪涛; 关键词：细胞外基质蛋白1 乳腺癌淋巴结转移

Development of an enzyme immune assay for detecting M2 autoantibodies specific for primary biliary cirrhosis被引量：2: 2003年; OBJECTIVE: To develope a new enzyme immune assay (ELISA) for detection of M2 antibody specific for primary biliary cirrhosis (PBC) by using a triple hybrid clone as antigen, which coexpresses the three immunodominant lipoyl domains of PDC-E2, BCOADC-E2 and OGDC-E2 from human sources. METHODS: After expressing autoantigens of PBC in prokaryote by constructing recombinant expressive plasmid successfully, the fusion protein was purified by affinity chromatography. The sera of 17 PBC patients were examined. As controls, the sera of 167 non-PBC patients and the sera of 1225 normal controls aged under 28 were examined. RESULTS: None of the sera from the non-PBC patients or the normal controls was positive for anti-M2 shown by the new ELISA. However, the positivity rate for anti-M2 in the PBC patients was 100% (17/17), as shown by the new ELISA. CONCLUSION: The detection system with a good sensitivity and specificity may be used as a powerful method for the diagnosis of PBC.; Xiao-Hua Jiang; 关键词：BILIARY AUTOANTIBODIES IMMUNOASSAY

动脉粥样硬化相关自身抗体的检测及临床意义被引量：5: 2004年; 目的　探讨血清中抗氧化型低密度脂蛋白 (ox LDL)抗体、抗 β2 糖蛋白I(β2 GPI)抗体及抗内皮细胞抗体 (AECA) 3种自身抗体与动脉粥样硬化的关系。方法　分别用酶联免疫吸附法(ELISA)和间接免疫荧光法 (IIF)检测 118例冠状动脉硬化性心脏病患者及 4 4名健康对照者血清中 3种自身抗体水平。结果　冠心病组血清抗ox LDL抗体阳性率为 32 2 0 % ,明显高于健康对照组阳性率 6 82 % (P =0 0 0 1) ;抗 β2 GPI抗体阳性率为 31 36 % ,其健康对照组阳性率为 11 36 % (P =0 0 0 9) ;血清抗内皮细胞抗体阳性率冠心病组为 38 14 % ,健康对照组为 13 6 4 % (P =0 0 0 2 )。在血脂正常的冠心病组中抗ox LDL和抗β2 GPI抗体阳性率也高于健康对照组。结论　血清中上述 3种自身抗体阳性率与动脉粥样硬化密切相关 ,抗ox LDL和抗 β2 GPI抗体阳性率与血脂无明显相关性 ,自身免疫反应是动脉粥样硬化的一种可能的发病机制。; 耿红莲屠小卿朱烨陈军顾鹏飞范列英仲人前; 关键词：动脉粥样硬化自身抗体

冠心病患者血清中相关自身抗体的检测及临床意义被引量：1: 2004年; 目的:探讨血清中抗氧化型低密度脂蛋白(ox-LDL)抗体和抗内皮细胞抗体(AECA)这2种自身抗体与冠状动脉粥样硬化的关系。方法:分别用酶联免疫吸附法(ELISA)和间接免疫荧光法(IIF)检测118例冠状动脉硬化性心脏病患者及44名健康对照者血清ox-LDL和AECA水平,同时用生化方法检测其血脂水平。结果:冠心病组血清抗ox-LDL抗体阳性率为32.20%,明显高于正常对照组阳性率6.82%(P=0.001);血清抗内皮细胞抗体阳性率冠心病组为38.14%,健康对照组为13.64%(P=0.002)。在血脂正常的冠心病组中抗ox-LDL抗体阳性率25.00%也高于正常对照组(P=0.045)。结论:血清中上述2种自身抗体阳性率与冠状动脉粥样硬化密切相关,而且抗ox-LDL抗体阳性率与血脂无明显相关性,自身免疫反应是动脉粥样硬化的一种可能的发病机制。; 耿红莲屠小卿朱烨陈军顾鹏飞范列英仲人前; 关键词：血清 OX-LDL 自身抗体抗体阳性率冠心病抗内皮细胞抗体

肺炎衣原体感染与原发性胆汁性肝硬化的相关性研究被引量：7: 2004年; 目的通过检测原发性胆汁性肝硬化(PBC)患者血清中抗肺炎衣原体(CP)IgG、IgM水平,探讨CP感染与PBC之间的相关性。方法采用CP酶联免疫固相吸附试验检测41例PBC患者(PBC组)、70例肝炎后肝硬化(疾病对照组,PHC组)和57名健康查体者(正常对照组)血清抗CP IgG、IgM抗体水平。结果 PBC组和PHC组的抗CP IgG平均水平(RU/ml)较正常对照组高(46.8±43.4、49.5±45.2与28.3±32.7,P=0.042与P<0.001),但PBC组与PHC组之间差异无显著性(P=O.059);PBC组、PHC组抗CP IgG阳性率亦高于正常对照组(68.3％、71.4％与42.1％,x2值分别为5.389、11.110,P值均小于0.05),PBC组与PHC组差别无显著性(x2=0.378,P>0.05);PBC组患者的血清抗CP IgM阳性率最高(22.0％),明显高于其它两组。与正常对照组比较,PBC组抗CP IgG、IgM阳性的比率比(OR)分别为2.7(95％ CI:0.9～6.1)、5.1(95％ CI:1.4～18.5);血清抗CP IgG水平与总IgG浓度无相关性(r=-0.857,P=0.344),而抗CP IgM阳性与总IgM异常升高有关。结论血清学研究结果尚不能支持肺炎衣原体是PBC的一个始动因素这一观点,但CP感染可能是造成PBC中IgM升高的原因之一。; 刘海英范列英屠小卿周晔陈燕邓安梅仲人前; 关键词：CP PBC 抗C PHC

抗去唾液酸糖蛋白受体酶联免疫检测法的建立及临床初评被引量：2: 2004年; 目的　建立肝脏特异性自身抗体的ELISA检测方法 ,辅助自身免疫性肝炎的诊断。方法　利用亲和层析法从人肝脏组织中直接纯化去唾液酸糖蛋白受体 (ASGPR) ,经免疫学鉴定后以此纯化抗原包被微孔板 ,酶联免疫固相吸附试验检测去ASGPR的自身抗体 (抗 ASGPR)。结果　本研究从10g肝组织纯化ASGPR ,总量为 1.6mg。经SDS PAGE和Dot ELISA验证 ,纯化ASGPR纯度高、具有抗原活性。ASGPR预吸附可阻断血清抗体与ASGPR间的免疫反应 ,类风湿因子、梅毒阳性血清不干扰本ELISA法的抗原抗体反应。 33例自身免疫性肝炎 (AIH )患者中检出抗 ASGPR 2 4例 ,阳性率为72 .7%。在临床上高度怀疑AIH的 10例患者中 ,抗 ASGPR阳性者有 7例。原发性胆汁性肝硬化、病毒性肝炎、肝炎后肝硬化、肝癌、胆囊炎患者中阳性检出率分别为 2 1.4 % (9/42 )、16 .8% (16 /95 )、16 .1%(10 /6 2 )、10 .7% (3/2 8)、14 .3% (1/7)。药物性肝炎、酒精性肝炎、系统性红斑狼疮和类风湿性关节炎患者中未检测到抗 ASGPR。 2 0 0名健康体检者阳性率为 4 .6 %。抗 ASGPR检测对AIH诊断的特异性为89 .6 %。结论　本研究所建立的抗 ASGPRELISA检测方法可靠、特异性好。抗 ASGPR检测有助于AIH的诊断 ,尤其是对那些抗核抗体、平滑肌抗体、肝肾微粒体; 刘海英范列英沈芳邓安梅屠小卿周晔陈燕仲人前; 关键词：去唾液酸糖蛋白受体自身抗体自身免疫性肝炎酶联免疫吸附试验血清学诊断

自身免疫性肝病148例临床特点分析被引量：10: 2006年; 目的分析自身免疫性肝病(autoimmune liver diseases,ALDS)的临床、生化及自身抗体特点。方法分析我院1996年-2005年148例ALDS患者其中自身免疫性肝炎(autoimmune hepatitis,AIH)患者52例,原发性胆汁性肝硬化(primary biliary cirrhosi,PBC)患者96例的临床表现,并分析有关实验室检查资料。结果两组患者临床症状均不典型,肝功能各项指标普遍异常,AIH组以ALT升高更为明显,而PBC组患者ALP和GGT升高更为显著(P<0.01)。在自身抗体检测情况两组有极大的差异。AIH患者主要以高效价的抗核抗体(antinuclear antibodies,ANA)(44/52)和/或抗平滑肌抗体(antismooth muscle antibodies)(35/52)为主,此外,尚有9.6%(5/52)和3.8%(2/52)的AHI患者出现抗可溶性肝抗原抗体(auti-soluble liver antigen autoantibdies,抗SLA)和抗肝/肾微粒体(liver/kidney microsomal,LKM)抗体阳性。PBC组以抗线粒体抗体(mitahondrial anto-antibodies,AMA)阳性(99.0%)为主,93.8%的患者AMAM2阳性。结论AIH及PBC的诊断可结合临床、生化、自身抗体检查的结果,其中自身抗体的检测尤为重要。; 屠小卿朱烨周琳吴萍耿红莲竺蓓顾鹏飞仲人前; 关键词：自身免疫性肝炎原发性胆汁性肝硬化自身抗体

人B细胞激活因子受体-TACI基因表达水平的定量测定被引量：3: 2006年; 目的:建立实时荧光定量PCR(RFQPCR)检测人B细胞激活因子受体TACImRNA含量的方法,初步探讨健康献血员外周血单个核细胞(PBMC)中TACImRNA表达水平。方法:在TACI基因高保守区设计特异性的引物和荧光探针,PCR扩增目的片段并实时检测产物的荧光强度,根据标准品建立的标准曲线,由软件自动计算出待测样本中TACImRNA准确含量,并以TACImRNA和β2MmRNA含量的比值作为评价TACI表达水平的指标。结果:本法检测TACImRNA含量的线性范围为109～101pg/ml,批内和批间重复性测定的CV分别为2.97%～9.32%和5.86%～10.29%。40例健康献血员样本的PBMC中35例(87.5%)检出有TACImRNA表达,范围为0.02～2.11。结论:成功建立RFQPCR检测TACImRNA含量的方法,具有较好的检测灵敏度和重复性,为进一步探讨TACImRNA表达水平与自身免疫性疾病发病机制之间的关系奠定了基础。; 张冬雷鞠少卿施健王惠民王跃国倪红兵孔宪涛仲人前; 关键词：外周血单个核细胞实时荧光定量

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