广东省科技攻关计划(C20209) 作品数:9 被引量:48 H指数:3 相关作者: 李华平 肖火根 范怀忠 阮小蕾 徐春香 更多>> 相关机构: 华南农业大学 广东省农业科学院 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 广东省科技攻关计划 广东省自然科学基金 更多>> 相关领域: 农业科学 生物学 更多>>
香蕉束顶病毒NSP株系DNA组分5的克隆和序列分析 被引量:3 2005年 本文利用PCR技术扩增得到香蕉束顶病毒(BBTV)NSP株系DNA组分5的全基因,该基因全长为1 013 nt,具有一个开放阅读框,编码161个氨基酸.NSP株系与南太平洋组澳大利亚、夏威夷、埃及分离物DNA组分5核苷酸和编码的氨基酸序列相比较,核苷酸序列同源率介于88%~89%之间,氨基酸序列同源率介于76%~79%之间,借助进化树分析和生物信息学研究方法,发现NSP株系组分5同样含有保守的与植物体内Rb蛋白结合的、能够调节寄主体内DNA复制相关蛋白积累的功能基序--LYCDE;并预测了蛋白质二级结构和性质. 郑耘 李华平 肖火根 范怀忠关键词:香蕉 束顶病毒 香蕉束顶病毒复制酶和黄瓜花叶病毒衣壳蛋白融合基因植物表达载体的构建 被引量:1 2005年 利用重组PCR技术将香蕉束顶病毒的复制酶基因和黄瓜花叶病毒的衣壳蛋白基因融合重组,并与植物表达载体pBI121连接,构建了抗香蕉束顶病和香蕉花叶病的双价植物表达载体,通过冻融法转化载体入根癌农杆菌LBA4404,获得了工程农杆菌pBI121.FBC,从而为培育抗病转基因香蕉品种奠定了基础. 郑耘 李华平 肖火根 范怀忠关键词:香蕉束顶病毒 黄瓜花叶病毒 融合基因 望江南中核糖体失活蛋白新基因CassinⅠ的克隆及特征分析 被引量:5 2008年 【目的】克隆在植物抗病虫过程中具有重要作用的核糖体失活蛋白新基因,为该类蛋白基因功能研究和有效利用创造条件。【方法】通过分析多种不同来源的植物核糖体失活蛋白的氨基酸序列,据其保守区域设计1对植物通用简并引物P1和P2,对药用植物望江南基因组进行PCR扩增,获得一种新的RIP基因片段。通过RACE法,获得了其全长cDNA序列-CassinⅠ。【结果】CassinⅠ基因全长为882bp,其推导的氨基酸序列与葫芦科两个代表核糖体失活蛋白β-luffin和Trichosanthin(TCS)的相似性分别为58.2%和34.7%,与GenBank中其它核糖体失活蛋白的序列无显著相似性。多重序列比对发现:CassinⅠ有9个氨基酸残基与TCS的N-糖苷酶活性位点的残基完全相同,另外两个残基发生了变化。所有的活性位点都在P1/P2扩增区段内。【结论】首次在望江南中克隆和报道一种新的核糖体失活蛋白基因,为进一步研究该基因的功能、并应用于作物转基因抗病虫害育种研究奠定了基础。 阮小蕾 刘丽芳 何云蔚 刘福秀 李华平关键词:望江南 核糖体失活蛋白 基因克隆 香蕉束顶病毒NS株DNA组分5的克隆和序列分析 被引量:1 2005年 本文利用PCR技术扩增得到香蕉束顶病毒(BBTV)NS株DNA组分5的全基因,该基因全长为1014nt,具有一个开放阅读框,编码146个氨基酸,蛋白质二级结构包括6个α螺旋,7个β折叠。NS株系与南太平洋组澳大利亚、夏威夷、埃及分离物DNA组分5核苷酸和编码的氨基酸序列相比较,核苷酸序列同源率介于88%~89%之间,氨基酸序列同源率介于80%~88%之间。NS株系与其它分离物在编码成视网膜细胞瘤蛋白(Retinoblastomaprotein,Rb)的基元序列“LXCDE”附近的二级结构上表现明显的差异,推测这种差异可能影响与植物中Rb蛋白的结合效率。 郑耘 阮小蕾 李华平 肖火根 范怀忠关键词:香蕉束顶病毒 香蕉胚性愈伤组织的诱导及胚性细胞悬浮系的建立 被引量:31 2004年 分别以3个香蕉品种的多芽体茎尖和5个香蕉品种的未成熟雄花为外植体,诱导产生胚性愈伤组织.结果分别从2个基因组类型为AAA的品种的多芽体茎尖和未成熟雄花获得了胚性愈伤组织,而未能从基因组类型为AAB或ABB的香蕉品种中获得胚性愈伤组织.胚性愈伤组织的诱导率受基因组类型、品种和培养条件等因素的影响.以上述4个品种的胚性愈伤组织为起始材料成功建立了胚性细胞悬浮系,不同香蕉品种,从其胚性愈伤组织建立胚性细胞悬浮系的难易程度有所不同. 徐春香 B.PANIS H.STROSSE R.SWENNEN 李华平 肖火根 范怀忠关键词:香蕉 胚性愈伤组织 基因诱导 胚性细胞 几种植物核糖体失活蛋白新基因的克隆和序列分析 <正>植物来源的核糖体失活蛋白(Ribosome Inactivating Protein,RIP)是一种能抑制真核细胞核糖体功能的毒蛋白。它有N-糖苷酶活性,专一的水解28S rRNA第4324位的腺嘌呤碱基,使核糖体... 阮小蕾 李华平文献传递 经修饰的烟草几丁质酶基因的克隆及多基因香蕉转化载体构建 被引量:3 2008年 从烟草中克隆得到1个经修饰的几丁质酶基因chi,将它与1个已经克隆的核糖体失活蛋白基因Cassin以及1个抗病毒的融合基因FBC(CMV香蕉株系的CP基因和BBTV的Rep基因)共同构建在1个表达载体上,得到多基因植物表达载体pYLTAC747NH-c-C-FBC. 阮小蕾 李华平关键词:几丁质酶基因 植物表达载体 香蕉束顶病毒运动蛋白基因的初步转化 本文发展了一套通过基因枪法和农杆菌介导法将外源基因导入香蕉茎尖的初步方案。将短截的香蕉柬顶病毒运动蛋白基因导入香蕉吸芽茎尖后获得一些转化材料,用PCR法能在其中成功检测到MP基因,这表明基因转化可能已成功,进一步的工作正... 徐春香 李华平 肖火根 范怀忠关键词:基因枪法 根癌农杆菌介导法 香蕉 运动蛋白基因 文献传递 体胚发生途径‘大矮蕉’植株的再生 被引量:3 2004年 '大矮蕉'MusaAAAcv.GrandeNaine的胚性细胞悬浮系(ECS)在M2液体培养基中预培养1周和2周后,分别将其接种在RD1或M3培养基上,于光照或黑暗条件下进行体胚的再生.再生体胚在接种后3周左右开始出现,经8周的培养后,在不同预培养时间、再生培养基种类及培养条件下,胚性细胞(团)质量增长了约5~18倍,从沉积细胞体积(SCV)为1mL的ECS获得的再生体胚数为0 71×105~3 07×105.植株的再生率及从SCV为1mL的ECS获得的再生植株数也因上述体胚再生条件的不同而异. 徐春香 B.PANIS H.STROSSE R.SWENNEN 李华平 肖火根 范怀忠关键词:体胚发生 植株再生 胚性细胞悬浮系 香蕉 影响体胚发生途径香蕉(Musa spp.,AAB Group)植株再生的因素 被引量:7 2004年 香蕉品种‘Agbagaba’和‘Orishele’的胚性细胞悬浮系(ECS)在液体培养基中分别预培养1和2周后,将其接种在RD1和M3培养基上,于光照或黑暗条件下进行体胚的再生。从沉积细胞体积(SCV) 为1 mL(1 mL SCV)的ECS获得的再生体胚数量因预培养时间、再生培养基的种类及培养条件的不同而异。植株的再生率及从1 mL SCV的ECS获得的再生植株数量也受上述体胚再生条件的间接影响。 徐春香 Bart PANIS Hannelore STROSSE Rony SWENNEN 李华平 肖火根 范怀忠关键词:香蕉 体胚发生 植株再生 培养基