甘肃省自然科学基金(3ZS-A25-106)
- 作品数:3 被引量:15H指数:2
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- 相关机构:甘肃省人民医院兰州大学更多>>
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- 相关领域:医药卫生生物学更多>>
- 反义抑制Survivin表达对槲皮素诱导肝癌SSMC-7721细胞凋亡的影响被引量:2
- 2008年
- 目的:采用Survivin反义寡核苷酸(ASODN)复合物抑制survivin的表达,研究其对槲皮素诱导肝癌SSMC-7721细胞凋亡的影响.方法:体外培养人肝癌SSMC-7721细胞,取对数生长期细胞进行实验.实验分Ⅰ,Ⅱ两部分:Ⅰ分为空白对照组(设平行组)、等量脂质体LipofectamineTM2000对照组、400μmol/L SODN复合物组、400μmol/L ASODN复合物组(设平行组),转染48h;Ⅱ弃掉Ⅰ部分各组培养液,换新指定培养液,分为空白对照组、40μmol/L槲皮素组、脂质体Lipo-fectamineTM2000组、SODN复合物组、ASODN复合物组、ASODN复合物+40μmol/L槲皮素组(联合组),孵育细胞24h后检测.Ⅰ结束时采用RT-PCR、细胞免疫组化染色检测各组SSMC-7721细胞survivin表达变化;Ⅱ结束时用吖啶橙染色法观察细胞凋亡时形态变化,MTT法检测SSMC-7721细胞生长抑制率,Annexi-V/PI双染流式细胞仪检测SSMC-7721细胞凋亡率.结果:ASODN复合物作用肝癌SSMC-7721细胞48h后能下调survivin mRNA及Survivin蛋白的表达(P<0.01);与其他组比较,联合组AO染色图片可观察到凋亡小体等典型的细胞凋亡形态特征变化且凋亡细胞数量明显增多,并用MTT法、Annexin-V/PI双染流式细胞仪检测显示联合组细胞的生长抑制率增高(P<0.01)、细胞凋亡率提高(P<0.01).结论:ASODN复合物可有效抑制肝癌SSMC-7721细胞sur-vivin基因的表达;ASODN复合物能增强槲皮素对SSMC-7721细胞增殖抑制及诱导凋亡的作用即二者具有协同作用,该作用可能与抑制survivin基因的表达有关.
- 李安强郭天康李荣范顾远晖蔡辉
- 关键词:反义寡核苷酸槲皮素细胞凋亡
- 槲皮素联合survivin反义核苷酸对肝癌细胞凋亡协同作用的研究被引量:3
- 2010年
- 目的 探讨槲皮素联合survivin反义核苷酸(ASODN)对肝癌SSMC-7721细胞株增殖、凋亡和细胞周期的影响.方法 常规培养SSMC-7721细胞,用四甲基偶氮唑盐法(MTT法)评价survivin ASODN联合槲皮素对肝癌细胞增殖的影响;流式细胞仪(FCM)检测细胞凋亡率和细胞周期;荧光染色观察细胞形态学变化;并通过RT-PCR和免疫组化方法检测survivin基因表达变化.结果 survivin反义寡核苷酸转染SSMC-7721细胞后,可以显著抑制细胞增殖,其抑制作用具有剂量依赖性,且能诱导肝癌细胞凋亡;联合槲皮索和survivin反义寡核苷酸抑制作用更为显著(t=4.317,P〈0.01);RT-PCR及免疫组化显示ASODN和槲皮素均使survivin mRNA和蛋白表达下降.结论 survivin基因反义寡核苷酸联合槲皮素能明显抑制肝癌SSMC-7721细胞增殖、诱导细胞凋亡和下调survivin基因表达;两者具有协同作用.
- 蔡辉乔成钢郭天康李荣范达明绪李安强郝相勇
- 关键词:细胞凋亡槲皮素SURVIVIN
- 槲皮素对人肝癌SMMC-7721细胞生长的抑制及细胞凋亡的诱导作用被引量:11
- 2010年
- 目的探讨槲皮素体外对人肝癌SMMC-7721细胞的生长抑制作用及诱导细胞凋亡的作用机制。方法以10、30、60、100μmol/L槲皮素作用于体外培养的SMMC-7721细胞,MTT法检测细胞生长抑制率,Annexi-V/PI双染流式细胞仪检测细胞凋亡情况,免疫组化染色法检测bcl-2、bax蛋白表达的变化。结果 30、60、100μmol/L槲皮素可显著地抑制SMMC-7721细胞的生长(P<0.01),诱导细胞发生凋亡(P<0.01),并呈现量-效和时-效关系;槲皮素作用48 h后,免疫组化染色法检测显示bcl-2蛋白表达降低和bax蛋白表达上调。结论槲皮素体外通过引起人肝癌SMMC-7721细胞bcl-2蛋白表达下调和bax蛋白表达上调诱导细胞发生凋亡,抑制细胞生长,槲皮素可能成为一种潜在的抗肝癌药物。
- 顾远晖李一平李安强李渊詹渭鹏乔成钢
- 关键词:槲皮素肝癌细胞凋亡BCL-2BAX