辽宁省教育厅科技攻关项目(05L564)
- 作品数：3 被引量：1H指数：1
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- 相关机构：中国医科大学附属第四医院沈阳医学院沈阳市第四人民医院更多>>
- 发文基金：辽宁省教育厅科技攻关项目更多>>
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- 阿司匹林对人晶状体上皮细胞增殖及环氧合酶-2表达的影响
- 2010年
- 目的检测环氧合酶-2(cyclooxygenase-2,COX-2)在碱性成纤维细胞生长因子(basic fibroblast growth factor,bFGF)诱导的人晶状体上皮细胞(human lens epithelial cells,HLEC)增殖过程中的表达,以及阿司匹林对COX-2表达及细胞增殖的抑制作用。方法HLEC系SRA01/04传代培养,MTT比色和[3H]-TdR掺入实验检测阿司匹林对bFGF诱导的HLEC增殖和DNA合成的影响;采用逆转录聚合酶链反应和Westernblot法检测阿司匹林对COX-2mRNA和蛋白表达的影响。结果显微镜下可见,随着阿司匹林浓度增加,细胞形态学的改变逐渐明显。5mmol.L-1、10mmol.L-1、20mmol.L-1阿司匹林可明显抑制bFGF诱导的HLEC增殖,吸光度值分别是0.3662±0.0644、0.2378±0.0295、0.1898±0.0198,对照组为0.5200±0.0184,3组与对照组比较,差异均有统计学意义(均为P<0.001),抑制作用呈浓度依赖性。[3H]-TdR掺入实验结果显示,阿司匹林对晶状体上皮细胞DNA合成具有抑制作用,药物浓度与[3H]-TdR掺入量呈负相关。逆转录聚合酶链反应及Westernblot结果提示10μg.L-1bFGF组电泳COX-2mRNA及蛋白呈阳性表达,10mmol.L-1阿司匹林与10μg.L-1bFGF共同作用组电泳未见有相应条带出现。结论阿司匹林能有效抑制bFGF诱导的HLEC的生长,这种作用可能是通过抑制COX-2的表达而实现的。
- 孔珺孔玮汪亚伦张雪岩张劲松
- 关键词：晶状体上皮细胞阿司匹林环氧合酶-2
- bFGF诱导人晶状体上皮细胞增殖过程中细胞外信号调节激酶的作用被引量：1
- 2009年
- 目的:检测细胞外信号调节激酶(extracellular regulated kinase,ERK)在碱性成纤维细胞生长因子(basic fibroblast growth factor,bFGF)诱导的人晶状体上皮细胞增殖过程中的表达与活化;检测ERK1/2特异性阻断剂PD98059对人晶状体上皮细胞增殖的影响。方法:人晶状体上皮细胞系SRA01/04体外培养,采用MTT比色法和[3H]-TdR掺入法检测ERK阻断剂PD98059对人晶状体上皮细胞活力和DNA合成的影响;Westernblot法测定bFGF对培养的人晶状体上皮细胞ERK,c-Jun氨基末端激酶(JNK),P38蛋白表达及PD98059对环氧合酶-2(COX-2)表达的影响。结果:10μg/LbFGF能显著刺激人晶状体上皮细胞增生,1μmol/LPD98059即能显著抑制bFGF启动的HLEC增殖,其效应呈浓度依赖性(P<0.01)。10μg/LbFGF可激活ERK信号通路,诱导COX-2蛋白表达,其效应在30min内达到高峰,6h后逐渐减弱,此作用可被10μmol/LPD98059阻断;10μg/LbFGF对非磷酸化ERK,磷酸化和非磷酸化JNK及P38表达无明显影响。结论:有丝分裂原活性蛋白激酶信号传导通路中ERK磷酸化对bFGF启动的人晶状体上皮细胞增殖具有重要的调节作用。
- 孔珺孔玮汪亚伦张雪岩张劲松
- 关键词：晶状体上皮细胞PD98059
- 阿司匹林对体外培养的人晶状体上皮细胞凋亡调节基因表达的影响
- 2009年
- 目的:研究阿司匹林(Asp)对培养的人晶状体上皮细胞(humanlens epithelial cells,hLEC)Bax,Bcl-2,caspase-3表达的影响。方法:人晶状体上皮细胞系SRA01/04传代培养,MTT比色法检测Asp对bFGF诱导的hLEC增殖的影响;Western-blot方法检测Asp作用1,3,6,12,24h后凋亡相关因子Bcl-2,Bax,caspses-3蛋白的表达。结果:Asp5mmol/L可明显抑制bFGF诱导的hLEC增殖(P<0.01),且抑制作用呈浓度依赖性。Western-blot结果显示,10mmol/LAsp作用1h后Bax蛋白表达增强,随着时间的延长,表达逐渐增加,6h达到高峰,24h后恢复至基础水平;而Bcl-2的表达与其相反,Asp作用1h后Bcl-2蛋白表达明显下降,6h降到最低点,然后有上升趋势。caspase-3的表达与Bax相似,Asp作用1h后caspase-3表达增加,6h达到高峰,持续24h仍有较高的表达。结论:凋亡因子Bcl-2,Bax,caspase-3参与了Asp诱导的人晶状体上皮细胞凋亡途径。Asp通过调节凋亡基因蛋白产物的表达,诱导hLEC的凋亡。
- 孔珺孔玮汪亚伦张雪岩张劲松
- 关键词：晶状体上皮细胞阿司匹林BAX细胞凋亡
