国家自然科学基金(30300013)
- 作品数：2 被引量：16H指数：2
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- 铜绿假单胞菌噬菌体PaP2生物学特性的研究被引量：14
- 2004年
- 目的 确定铜绿假单胞菌噬菌体PaP2的形态与大小、裂菌特性、最佳感染复数、一步生长特性等基本的生物学特性。方法 电镜观察纯化噬菌体颗粒 ;制备PaP2噬斑 ,观察其特点 ;提取噬菌体感染的细菌基因组 ,用SmaⅠ酶切 ,通过脉冲场电泳观察酶切产物的带型特点 ;测定不同感染复数 ,培养 3 5h后细菌 噬菌体液中的噬菌体滴度 ;加入宿主菌及噬菌体使MOI =10 ,进行一步生长实验 ,在 0时刻和每隔 15min测定噬菌体滴度。结果 噬菌体PaP2头部直径约为 5 2nm ,无囊膜 ,有一短尾 ;噬斑雾状半透明 ,直径约 1～ 2mm ;被噬菌体感染的宿主菌基因组的SmaⅠ酶切产物带型 ,比未感染宿主菌的多出了 1条大于噬菌体基因组的片段 ;当MOI =10时宿主菌产生的子代噬菌体滴度最高 ;绘制出了一步生长曲线。结论 PaP2属短尾噬菌体科 ,是溶原性噬菌体 ;最佳感染复数是 10 ;感染宿主菌的潜伏期是 75min ,裂解期是 90min ,平均裂解量是 3
- 黄建军胡晓梅饶贤才张克斌金晓琳周莹冰李明申晓冬朱军民胡福泉
- 铜绿假单胞菌噬菌体PaP3基因组电转化宿主菌的条件初探被引量：2
- 2007年
- 目的：研究将铜绿假单胞菌噬菌体PaP3基因组DNA电转入其宿主菌并获得噬斑的基本条件。方法：以铜绿假单胞菌PA3作受体菌，将噬菌体PaP3基因组DNA通过电转化导入受体菌中，研究细胞生长状态、感受态细胞的制备方式、电场强度、DNA浓度和细胞密度等条件对转化效率的影响。结果：在含50μg／ml红霉素的LB培养液中培养宿主菌14—16h，以100mmol／L蔗糖溶液为介质，在25℃条件下制备感受态并使其浓度达到10μ／ml，电转参数为12kV／cm，300Ω，25μF，在此组条件下能获得较高的转化效率，最高可达2．1×10^3pfu／μg的DNA。结论：确定了一组电转条件，成功地将铜绿假单胞菌噬菌体完整基因组导入PA3中，并形成噬斑，为铜绿假单胞菌噬菌体的深入研究奠定了基础。
- 周莹冰申晓冬丛延广李明黄建军胡晓梅胡福泉
- 关键词：铜绿假单胞菌噬菌体基因组电转化
