国家自然科学基金(30300009)
- 作品数：5 被引量：45H指数：3
- 相关作者：陈坚李寅傅瑞燕付瑞燕更多>>
- 相关机构：江南大学中国科学院安徽农业大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：生物学轻工技术与工程化学工程更多>>
- 一株具有谷胱甘肽合成能力的乳酸乳球菌的分离与初步研究被引量：3
- 2007年
- 基于gshB基因同源性分析设计引物,从采集的菜园地土壤中分离到1株具有谷胱甘肽(GSH)合成能力的乳酸乳球菌菌株CCSYU10100。测定了该菌株的16S rDNA序列并根据16S rDNA序列构建了系统发育树,结果显示该菌株与乳酸乳球菌乳脂亚种在进化关系上的地位最近。电镜分析表明,菌株CCSYU10100与乳酸乳球菌的形态特征基本一致。因此认为菌株CCSYU10100属于乳酸乳球菌乳脂亚种,命名为乳酸乳球菌乳脂亚种CCSYU10100。HPLC法鉴定出该菌株胞内除GSH外,还存在半胱氨酸-甘氨酸。乳酸乳球菌CCSYU10100的部分gshB基因与假单胞菌属的gshB基因高度同源,这是gshB基因在乳酸乳球菌中、甚至是革兰氏阳性菌中的首次发现。
- 付瑞燕陈坚李寅
- 关键词：谷胱甘肽乳酸乳球菌
- 谷胱甘肽在乳酸乳球菌酸胁迫和冷冻胁迫中的保护作用
- 为研究还原型谷胱甘肽(GSH)在乳酸乳球菌酸胁迫和冷冻胁迫中的生理作用,以乳酸乳球菌乳脂亚种SK11、NZ9000为对象,比较了在酸胁迫和冷冻胁迫条件下外源性GSH对细胞存活率的影响。在pH为2．5的酸性条件下短时间胁迫...
- 张娟傅瑞燕李寅陈坚
- 文献传递
- 谷胱甘肽/谷胱甘肽过氧化物酶系统在微生物细胞抗氧胁迫系统中的作用被引量：25
- 2007年
- 谷胱甘肽(GSH)/谷胱甘肽过氧化物酶(GPx)系统在不同微生物细胞抵抗氧胁迫中的生理功能不尽相同。该系统在真核模式微生物酿酒酵母中是必需存在的,在维持胞内氧化还原平衡和抵抗氧胁迫中发挥主要作用。然而,在原核微生物中,该系统只是条件性的,即部分胞内存在谷胱甘肽还原酶和GPx的原核微生物,如流感嗜血杆菌和乳酸乳球菌,可通过从胞外吸收GSH,形成条件性的依赖于GSH的GPx系统,参与抵抗氧胁迫。
- 付瑞燕陈坚李寅
- 关键词：微生物细胞
- 在乳酸乳球菌中表达外源谷氨酰胺转胺酶显著改善宿主菌好氧生长性能被引量：3
- 2005年
- 为改善乳酸乳球菌的生长性能,以轮枝链霉菌染色体DNA为模板,扩增得到编码谷氨酰胺转胺酶成熟酶的基因mtg,将其克隆到质粒pNZ8148中,电转化乳酸乳球菌NZ9000,获得乳酸乳球菌NZ9000(pFL001)(重组菌)。在不控制pH条件下,重组菌的胞外pH显著高于对照菌NZ9000(pNZ8148);前者的最高生物量可达4.13gL,而后者只有0.34gL。在控制pH为6.5±0.1的条件下,重组菌最高生物量为4.73gL,对葡萄糖的菌体最高平均得率为71.1gmol,而相同条件下对照菌最高生物量为2.6gL,对葡萄糖的菌体最高平均得率为27.3gmol。由此表明,重组菌与对照菌相比,好氧生长性能得到显著改善。可能的原因是mtg的活性表达升高了重组菌的胞内pH,原先用于泵出胞内H+所需的部分能量可能因此得到节省,这样相应增加了用于细胞生长的能量。
- 傅瑞燕陈坚李寅
- 谷胱甘肽在乳酸乳球菌抵抗氧胁迫中的保护作用被引量：6
- 2006年
- 为研究谷胱甘肽(GSH)在乳酸乳球菌NZ9000抗氧胁迫中的生理作用,以能够生物合成GSH的重组菌NZ9000(pNZ3203)为实验菌株进行了研究。结果表明,在较高H2O2胁迫剂量(150mmol/L H2O2,15min)下,前培养3h、5h和7h(即乳酸链球菌素诱导1h、3h和5h)时的重组菌细胞的存活率分别是处于相应生长时期对照菌NZ9000(pNZ8148)的1.8±0.1倍、2.6±0.1倍和2.9±0.3倍。表明GSH可以提高宿主菌NZ9000对H2O2所引发氧胁迫的抗性。GSH还可以提高宿主菌NZ9000对其它化学物质(如超氧阴离子自由基生成剂———甲萘醌)所引发氧胁迫的抗性。这表现在经20mmol/L甲萘醌处理60min后,前培养5h(即乳酸链球菌素诱导3h)时重组菌细胞的存活率是对照菌的6.2±0.1倍。由此表明,通过代谢工程手段在菌株NZ9000中引入GSH合成能力,可以提高宿主菌对氧胁迫的抗性。
- 傅瑞燕陈坚李寅
- 关键词：GSH乳酸乳球菌氧胁迫
- 外源谷氨酰胺转胺酶显著提高乳酸乳球菌抗氧胁迫能力
- 乳酸菌是一类重要的工业微生物,在食品发酵中应用的历史非常悠久,属于能够在人体内存活, 对人体的生命健康有益的一种重要的益生菌。利用益生菌作为表达外源基因的宿主菌是目前基因工程研究的热点之一,其中乳酸菌最有代表性,也可能是...
- 傅瑞燕陈坚李寅
- 文献传递
- 构建重组乳酸乳球菌生产谷胱甘肽被引量：11
- 2004年
- 以大肠杆菌染色体DNA为模板 ,分别扩增得到编码γ 谷氨酰半胱氨酸合成酶和谷胱甘肽合成酶的基因gshA和gshB。将gshA和gshB基因克隆到质粒pNZ814 8中 ,电转化乳酸乳球菌NZ90 0 0 ,获得重组菌NZ90 0 0(pNZ32 0 3)。在添加 10mmol L谷氨酸、半胱氨酸和甘氨酸的M17培养基中培养该重组菌 ,当OD6 0 0 达到 0 4时用乳酸链球菌素诱导 4h ,胞内谷胱甘肽含量达到 35 8nmol mg蛋白 (胞内浓度相当于 14 0mmol L) ,这是在革兰氏阳性菌中生产谷胱甘肽的首例报道。
- 傅瑞燕陈坚李寅
- 关键词：乳酸乳球菌谷胱甘肽半胱氨酸Γ-谷氨酰半胱氨酸合成酶谷胱甘肽合成酶
