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镍冶炼工人尿镍水平与p15、p16启动子甲基化的关系: 2012年; [目的]探讨镍冶炼工人尿镍水平与抑癌基因p15、p16启动子甲基化的关系。[方法]采用丁二酮肟分光光度法测定不锈钢冶炼厂165名镍作业工人(镍接触组)和67名水处理工人(对照组)尿镍浓度,并采用甲基化特异性聚合酶链反应(methylation specific polymerase chain reaction,MSP)检测抑癌基因p15、p16启动子的甲基化状态。[结果]炼钢工、钢渣处理工、轧钢工的尿镍浓度中位数分别为5.34、4.59、4.52μg/L,与水处理工人的尿镍浓度中位数(1.78μg/L)比较,差异均有统计学意义(P<0.01)。镍接触组的p15基因启动子甲基化检出率为25.45%,与对照组甲基化检出率(11.94%)相比,差异有统计学意义(P=0.023);而镍接触组p16基因启动子甲基化检出率(21.82%)与对照组(11.94%)相比,差异无统计学意义(P=0.082)。多元logistic回归分析显示,尿镍浓度高个体的p15甲基化发生可能性为尿镍浓度低个体的1.47倍。[结论]尿镍浓度与p15启动子甲基化的发生有密切关系。; 杨瑾王志武郭庆峰孙建娅; 关键词：镍抑癌基因甲基化

苯并(a)芘染毒致人支气管上皮细胞和上皮样成纤维细胞周期的变化: 目的观察苯并(a)芘(BaP)染毒对人支气管上皮细胞(16HBE)和上皮样肺成纤维细胞(W138)细胞周期影响的剂量效应和时间效应.方法 BaP 0,1,2,4,8,16和32μmol·L-1染毒16HBE和...; 陈文涛范燕峰张慧涛杨瑾; 关键词：苯并(A)芘人支气管上皮细胞细胞周期

焦炉工人DNA损伤与组蛋白H2A单泛素化水平的关系被引量：1: 2013年; [目的]探讨焦炉工人DNA损伤与组蛋白H2A单泛素化水平的关系。[方法]采用高效液相色谱法对焦化厂106名焦炉工人(接触组)和73名水处理厂工人(对照组)尿中1-羟基芘(1-hydroxypyrene,1-OHP)浓度进行测定,并采用彗星实验和蛋白质印迹法(Western blot)分别检测DNA损伤和组蛋白H2A单泛素化水平。[结果]接触组Olive尾矩(Olive tail moments,OTM)和尿1-OHP的均值分别为0.46和0.34μmol/molCr,均显著高于对照组(分别为0.37和0.21μmol/molCr,P<0.05);而接触组单泛素化组蛋白H2A相对表达水平的中位数为0.61,与对照组(0.91)相比为降低(P<0.05)。以OTM值为应变量,多元线性回归显示自变量尿1-OHP和单泛素化组蛋白H2A进入回归方程,决定系数R2为0.383。[结论]焦炉工人DNA损伤程度与尿1-OHP含量和单泛素化组蛋白H2A相对表达水平关系密切。; 杨瑾李新郭庆峰王志武; 关键词：DNA损伤组蛋白

泛素连接酶Ring2在苯并[a]芘致DNA损伤中的作用被引量：1: 2013年; 目的探讨泛素连接酶Ring2在苯并[a]芘（B[a]P）致细胞DNA损伤中的作用。方法采用RNA干扰方法降低人支气管上皮细胞（16HBE）Ring2表达。以0、1、2,4、8、16、32μmol／LB[a]P染毒16HBE和siRNA—Ring2细胞24h；以16μmol／LB[a]P染毒16HBE和siRNA—Ring2细胞0、1、2、4、8、12、24h。染毒结束后采用碱性单细胞凝胶电泳法检测DNA损伤水平。结果采用RNAi36h后，目的基因Ring2的表达量与正常细胞相比下降了72％，达到后续实验要求。经协方差分析，分组因素和染毒浓度都对Olive尾矩值有影响，P=0．032和P〈0．001。正常细胞和siRNA—Ring2细胞组的修正均数相比，siRNA—Ring2组OTM明显高于正常细胞组；分组因素（是否进行RNAi）和染毒时间都对Olive尾矩值有影响，P=0．031和P〈0．001。正常细胞和siRNA—Ring2细胞组的修正均数相比，siRNA-Ring2组Olive尾矩明显高于正常细胞组。结论Ring2低表达的细胞DNA对B[a]P的敏感性增加，可能与降低Ring2表达后致H2A单泛素化水平降低有一定关系。; 杨瑾王志武刘承芸殷金珠; 关键词：泛素连接酶 DNA损伤

苯并(a)芘染毒致人支气管上皮细胞和上皮样成纤维细胞周期的变化被引量：2: 2013年; 目的:观察苯并(a)芘[benzo(a)pyrene,BaP]染毒对人支气管上皮细胞(16HBE)和上皮样肺成纤维细胞(W138)细胞周期的影响,并探讨其剂量效应和时间效应。方法:以16HBE和W138细胞未处理组为阴性对照组,二甲基亚砜(DMSO)组为溶剂对照组。分别以不同浓度(1、2、4、8、16、32μmol/L)的BaP染毒16HBE和W138细胞,24 h后用流式细胞术检测细胞周期分布情况;分别以16μmol/L BaP染毒16HBE和W138细胞,作用不同时间后(1、2、4、8、12、24 h)检测细胞周期分布情况;分别以16μmol/L BaP染毒16HBE和W138细胞,作用4 h后,再经过不同时段(0、1、2、4、8、12、24 h)的恢复期后检测细胞周期分布情况。结果:与阴性对照组比较,随着染毒浓度和染毒时间的增加16HBE和W138细胞S期所占比例均增加(P<0.05);16μmol/L BaP染毒16HBE细胞4 h后,经2～12 h的恢复期(正常条件下培养),S期细胞所占比例与刚染毒后细胞(32.43%)相比明显增加(P<0.05),恢复24 h时S期细胞所占比例(24.52%)与阴性对照组(26.41%)相比差异无统计学意义(P>0.05);16μmol/L BaP染毒W138细胞4 h后恢复0～4 h时S期细胞所占比例与阴性对照组(32.42%)相比明显增加(P<0.05),恢复8 h开始减少,24 h时S期细胞所占比例(32.89%)与阴性对照组(32.42%)相比差异无统计学意义(P>0.05)。结论:BaP染毒16HBE和W138细胞引起细胞周期分布变化,主要为S期阻滞,G1期和G2期变化不明显。; 陈文涛范燕峰张慧涛杨瑾; 关键词：苯并(A)芘人支气管上皮细胞细胞周期

维生素E对氯化镍染毒大鼠肺组织p15基因甲基化过程的影响被引量：5: 2011年; [目的]探讨维生素E(VE)对氯化镍染毒大鼠肺组织p15基因甲基化过程的影响。[方法]以0.1、0.2、0.4和0.8mg/mL氯化镍灌胃染毒大鼠,并设立对照组(生理盐水)和拮抗组(0.8mg/mL氯化镍+5mg/mL VE),持续6周。染毒结束后处死大鼠,制备肺组织匀浆,采用分光光度法,测定谷胱甘肽(GSH)和丙二醛(MDA)水平的变化;以荧光定量PCR法检测肺组织中抑癌基因p15的表达水平;以甲基化PCR法检测p15启动子甲基化状态;以Western-blot检测DNA甲基转移酶1(DNMT1)和蛋氨酸腺苷转移酶2A(MAT2A)的表达水平。[结果]随着氯化镍染毒剂量的增加,MDA含量显著升高,GSH含量显著下降(P<0.01);与相同剂量染毒组相比,拮抗组大鼠肺组织中MDA含量降低,GSH含量升高(P<0.05);对照组大鼠肺组织p15启动子为非甲基化状态,染毒组大鼠肺组织p15启动子甲基化和非甲基化条带均有表达;各染毒组p15 mRNA表达量与对照组相比均显著性降低(P<0.01),使用抗氧化剂VE后p15mRNA表达量与相同剂量染毒组相比显著性增高(P<0.05);随着染镍剂量的增高,DNMT1和MAT2A表达量显著性升高,与对照组相比,最高剂量染镍组DNMT1和MAT2A的表达量分别增高了1.52倍和1.49倍。使用拮抗剂VE后,与相同剂量染镍组相比DNMT1和MAT2A的表达量分别降低了10%和29%;双变量相关分析显示大鼠肺组织中GSH含量与DNMT1和MAT2A蛋白表达水平呈负相关关系,相关系数分别为r=-0.889(P=0.018)和r=-0.821(P=0.044)。[结论]维生素E可能通过影响GSH在氯化镍染毒大鼠肺组织中的含量而影响p15基因的甲基化过程。; 杨瑾王志武刘承芸郭庆峰张玲; 关键词：氯化镍维生素E 甲基化

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山西省高等学校优秀青年学术带头人支持计划项目([2010]4)

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