云南省教育厅科学研究基金(2010Y295)
- 作品数：3 被引量：14H指数：3
- 相关作者：丁勇龚秀会刘小烛严宇庭李瑞阳更多>>
- 相关机构：西南林业大学更多>>
- 发文基金：云南省教育厅科学研究基金西南地区生物多样性保育国家林业局重点实验室开放基金更多>>
- 相关领域：农业科学更多>>
- 3种杜仲枝叶总RNA提取方法的比较被引量：3
- 2011年
- 采用改良过的CTAB-LiCl法、RNApure Plant Kit法和RNAiso Plus法分别提取杜仲枝叶总RNA,以期筛选出适于杜仲枝叶高质量总RNA提取方法;用琼脂糖甲醛变性凝胶电泳检测总RNA的完整性,以紫外分光光度计检测总RNA的纯度和得率。结果表明,改良过的CTAB-LiCl法和RNApure Plant Kit法提取的RNA完整性好,纯度高,RT-PCR可获得目的基因cDNA片段;RNAiso Plus法得到的RNA降解严重,纯度低。改良过的CTAB-LiCl法和RNApure Plant Kit法提取杜仲枝叶总RNA完全能满足后续的RT-PCR和RACE等分子生物学研究。
- 丁勇李涛龚秀会刘小烛
- 关键词：RNA提取
- 杜仲树皮总RNA提取方法的比较被引量：4
- 2011年
- [目的]从杜仲树皮中获得高质量的总RNA。为开展杜仲后续mRNA分离、杜仲抗真菌蛋白基因克隆、及杜仲树皮cDNA文库构建等研究奠定基础。[方法]以杜仲树皮为材料,分别采用改良CTAB-LiCl法、RNApure Plant Kit法和RNAiso Plus法进行总RNA提取,用琼脂糖甲醛变性凝胶电泳检测总RNA的完整性,用紫外分光光度计检测总RNA的纯度和得率。[结果]改良CTAB-LiCl法和RNA-pure PlantKit法提取的杜仲树皮总RNA纯度和完整性较高,A260/A280值均在1.800~2.000,28和18 SrRNA条带清晰,RNA得率较高;而RNAiso Plus法提取的杜仲树皮总RNA的纯度和完整性较低,A260/A280值为1.652,28S和18S rRNA条带存在降解和弥散现象,RNA得率低。[结论]改良CTAB-LiCl法和RNApure Plant Kit法抽提获得的杜仲树皮总RNA质量较高,能满足后续RT-PCR和RACE等试验的要求,这为成功克隆杜仲相关基因奠定了基础。关键词杜仲树皮;RNA提取;方法;
- 丁勇黎燕红王汉斌龚秀会刘小烛
- 关键词：RNA提取
- 麻疯树种子总RNA提取方法研究被引量：8
- 2012年
- 采用RNAiso Plus法、RNApure Plant Kit法和改良CTAB法分别提取麻疯树种子总RNA,以期筛选适合于麻疯树种子高质量总RNA提取方法。用琼脂糖甲醛变性凝胶电泳检测总RNA的完整性,以紫外分光光度计检测总RNA的纯度和得率。结果表明:RNAiso Plus法提取麻疯树种子总RNA的A260/A280比值为2.030,28S和18S rRNA条带清晰,且前者的亮度约为后者的2倍,无可见的弥散现象,利用该方法提取的总RNA进行RT-PCR,成功克隆获得了麻疯树oleosin基因长603 bp的cDNA序列。证明RNAiso Plus法提取麻疯树种子总RNA可满足后续RT-PCR、RACE-PCR和基因全长克隆等分子生物学研究。
- 丁勇范红波张高磊严宇庭李瑞阳
- 关键词：麻疯树种子RNA提取反转录聚合酶链式反应
