湖南省研究生科研创新项目(CX2010B380)
- 作品数：11 被引量：22H指数：3
- 相关作者：张志伟赵强刘重元杨科谢妮更多>>
- 相关机构：南华大学邵阳医学高等专科学校湖南文理学院更多>>
- 发文基金：湖南省研究生科研创新项目湖南省高校创新平台开放基金湖南省大学生研究性学习与创新性实验计划项目更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- LMP1-CTAR3对鼻咽癌干细胞SP18生长的影响被引量：3
- 2011年
- 背景:课题组前期构建了CTAR3缺失突变型LMP1(LMP1△232-351)表达载体,初步了解该活性区在LMP1发挥作用中扮演十分重要的角色。目的:观察LMP1-CTAR3对鼻咽癌干细胞SP18生长的影响。方法:采用逆病毒感染方式,建立稳定表达LMP1及CTAR3缺失突变型LMP1(LMP1△232-351)的鼻咽癌干细胞SP18细胞系,通过细胞生长曲线、软琼脂集落形成实验和平皿克隆形成实验观察LMP1△232-351对鼻咽癌干细胞SP18生长的影响,然后选用流式细胞术检测细胞周期,计算细胞增殖指数。另外,利用Western-blot检测细胞中JAK3蛋白的磷酸化水平。结果与结论:①与SP18-LMP1细胞比较,SP18-LMP1△232-351细胞生长速度减慢,增殖指数降低(P<0.01)。②在SP18-LMP1△232-351细胞中JAK3的磷酸化水平低于SP18-LMP1细胞。结果说明LMP1-CTAR3可能通过影响SP18细胞中JAK3的磷酸化,下调细胞的增殖指数,降低促细胞增殖的能力。
- 全胜庄英帜张志伟刘重元姜浩赵强朱建思董琳
- 关键词：LMP1生长增殖
- NF-кB介导LMP1在鼻咽癌干细胞SP18增殖中的作用
- 2012年
- 目的探讨LMP1-CTAR2影响鼻咽癌干细胞SP18增殖的作用机制。方法采用逆病毒感染方式,建立稳定表达LMP1及CTAR2的TRADD活性区突变型LMP1(LMP1TRADD)的鼻咽癌干细胞SP18细胞系(空载体pLNSX为阴性对照),通过细胞生长曲线、软琼脂集落形成实验、平皿克隆形成实验和流式细胞术观察LMP1TRADD对鼻咽癌干细胞SP18增殖的影响。同时利用Western-blot检测细胞中NF-кB P65蛋白的表达。结果 (1)SP18-LMP1细胞生长较SP-pLNSX细胞加速,增殖指数增加(n=3,P<0.01)。(2)SP18-LMP1TRADD细胞的生长速度较SP18-LMP1细胞减慢,增殖指数降低(n=3,P<0.01)。(3)SP18-LMP1TRADD细胞中NF-кB P65蛋白的表达水平较SP18-LMP1细胞降低,与SP-pLNSX细胞相似。结论 NF-кB通过介导LMP1-CTAR2胞内信号,降低SP18细胞的增殖指数,影响细胞的增殖。
- 沈华张志伟刘重元赵强朱建思董琳罗招阳
- 关键词：鼻咽肿瘤LMP1干细胞流式细胞术
- LMP1调节鼻咽上皮与鼻咽癌组织中p27与RPLP0蛋白的表达被引量：4
- 2012年
- 目的:观察p27和核糖体磷酸化蛋白大亚基P0(RPLP0)蛋白在潜伏膜蛋白1(LMP1)阳性鼻咽癌细胞中的表达,揭示蛋白质之间的相互作用规律及临床病理学意义。方法:采用Western blotting分析p27和RPLP0蛋白表达与LMP1表达之间的关系,S-P免疫组织化学染色检测LMP1、p27和RPLP0蛋白在30例鼻咽上皮组织和60例鼻咽低分化鳞状细胞癌中表达,并分析其临床病理学意义。结果:(1)LMP1在鼻咽上皮和鼻咽低分化鳞状细胞癌中的阳性表达率分别为73.3%和90.0%;(2)与LMP1(-)组织比较,p27蛋白在LMP1(+)的鼻咽上皮和鼻咽低分化鳞状细胞癌中表达降低,而RPLP0蛋白表达与之相反;(3)p27蛋白和RPLP0蛋白表达与鼻咽癌患者年龄、LMP1蛋白的表达、淋巴结转移及TNM分期有关(P<0.05),患者年龄小、LMP1(-)、无淋巴结转移、TNM I期和II期时,p27蛋白表达阳性率较高,而RPLP0蛋白表达则反之(P<0.05)。结论:LMP1在鼻咽上皮和鼻咽低分化鳞状细胞癌中下调p27和上调RPLP0蛋白的表达;鼻咽癌患者年龄小、LMP1(-)、无淋巴结转移、TNM I期和II期时,p27蛋白表达阳性率较高,而RPLP0蛋白表达则与之相反。
- 赵强张志伟刘重元杨科谢妮张婕
- 关键词：鼻咽上皮潜伏膜蛋白1P27蛋白
- Vimentin介导LMP1在鼻咽上皮与鼻咽癌中的表达意义被引量：1
- 2012年
- 目的:观察Vimentin与LMP1蛋白在鼻咽上皮和鼻咽癌中的表达,揭示蛋白质之间的相互作用规律。方法:采用S-P免疫组织化学染色检测LMP1与Vimentin在30例鼻咽上皮组织和60例鼻咽低分化鳞状细胞癌中的表达。结果:(1)LMP1在鼻咽上皮组织与鼻咽低分化鳞状细胞癌中的阳性表达率分别为73.3%和90%;(2)与LMP1(-)组织比较,Vimentin蛋白在LMP1(+)的鼻咽上皮组织与鼻咽低分化鳞状细胞癌中升高(P<0.05)。结论:LMP1在鼻咽上皮组织与鼻咽低分化鳞状细胞癌中上调Vimentin蛋白的表达。
- 彭云吉张志伟赵强刘重元张婕陈家明贺修胜
- 关键词：LMP1鼻咽上皮鼻咽癌
- 组织芯片检测p16蛋白在不同胃组织中的表达意义被引量：5
- 2012年
- [目的]分析胃癌相关差异表达蛋白p16在不同胃组织中的表达意义,为临床早期发现胃癌及评估胃癌患者预后提供有价值的资料。[方法]采用免疫组织化学染色,检测胃组织芯片(包括正常胃黏膜、癌旁、非典型增生、胃癌及淋巴结转移癌组织)中p16蛋白的表达,分析其在胃癌组织中表达与临床病理特征的关系。[结果]p16蛋白在正常胃黏膜、癌旁、非典型增生和胃癌组织中的表达率分别为76.47%(26/34)、79.59%(39/49)、34.62%(9/26)和8.64%(7/81);p16蛋白在胃癌组织中阳性表达率较正常胃黏膜、癌旁组织和非典型增生组织降低(P<0.01),而非典型增生组织中阳性表达率较正常胃黏膜和癌旁组织降低(P<0.05);p16蛋白表达与胃癌患者年龄、肿块大小和淋巴结转移有关(P<0.05)。[结论]p16蛋白表达与胃癌的发生发展、患者年龄、肿块大小及淋巴结转移有关。
- 郭玉凤张志伟贺修胜汤国辉谢妮杨科
- 关键词：胃肿瘤P16蛋白临床病理学免疫组织化学
- EGCG经Wnt1-β-catenin通路抑制NP69-LMP1细胞的增殖
- 2012年
- 目的:探讨表没食子儿茶素没食子酸酯(Epigallocatechin-3-gallate,EGCG)体外抑制潜伏性膜蛋白1转化鼻咽上皮细胞NP69(NP69-LMP1)增殖的机制。方法:采用MTT法检测EGCG抑制NP69-LMP1细胞增殖的IC50值;选用细胞生长曲线、软琼脂集落形成实验和平皿克隆形成实验观察EGCG抑制NP69-LMP1细胞增殖的作用;采用Western-blot检测Wnt1、β-catenin的表达及磷酸化。结果:EGCG抑制NP69-LMP1细胞增殖的IC50值为47.7mg.L-1;EGCG对NP69-LMP1细胞增殖的抑制作用呈浓度和时间依赖性(n=3,P<0.05)。EGCG呈浓度依赖性抑制Wnt1和β-catenin蛋白的表达,促进β-catenin蛋白的磷酸化。结论:EGCG通过降低Wnt1和β-catenin蛋白表达,增加β-catenin蛋白磷酸化水平,发挥对NP69-LMP1细胞增殖的抑制作用。
- 陈波张志伟刘重元赵强蒋凯苓杨科罗招阳
- 关键词：EGCGΒ-CATENIN蛋白细胞增殖
- LMP1-CTAR3调节CK19和vimentin蛋白在鼻咽上皮与鼻咽癌中的表达被引量：2
- 2012年
- 目的观察LMP1-CTAR3调节的CK19和vimentin蛋白在鼻咽上皮和鼻咽癌中的表达,揭示蛋白质之间的相互作用规律。方法采用SP免疫组化染色检测LMP1、CTAR3、CK19和vimentin在30例鼻咽上皮组织和60例鼻咽低分化鳞状细胞癌中的表达。结果①LMP1在鼻咽上皮组织与鼻咽低分化鳞状细胞癌中的阳性表达率分别为73.3%和90%;②与LMP1(-)组织比较,CK19蛋白在LMP1(+)的鼻咽上皮组织与鼻咽低分化鳞状细胞癌中的表达降低(P<0.05);③与LMP1(-)组织比较,vimentin蛋白在LMP1(+)的鼻咽上皮组织与鼻咽低分化鳞状细胞癌的表达升高(P<0.05)。结论 LMP1-CTAR3在鼻咽上皮组织与鼻咽低分化鳞状细胞癌中下调CK19蛋白和上调vimentin蛋白的表达。
- 张志伟赵强刘重元张婕陈家明王莉莉贺修胜
- 关键词：鼻咽上皮鼻咽癌
- CK-8蛋白在胃癌组织中的表达及意义被引量：2
- 2012年
- 目的观察蛋白CK-8在胃癌组织中的表达,并分析其临床病理学意义,为胃癌的早期诊断、预后评估提供临床参考。方法选用包括正常胃黏膜、癌旁、非典型增生、胃癌及淋巴结转移癌组织的组织芯片,通过免疫组织化学染色观察CK-8蛋白的表达情况,分析其在不同组织中的表达与临床病理的关系。结果在胃癌和淋巴结转移癌组织中,CK-8蛋白表达阳性率较正常胃黏膜、癌旁和非典型增生组织增加(P<0.01);在胃高分化腺癌、中分化腺癌和低分化腺癌中,随着分化程度的降低CK-8蛋白阳性表达逐渐升高(P<0.01)。结论 CK-8蛋白与胃癌的发生发展、分化程度及淋巴结转移有关。
- 李增波张志伟汤国辉谢妮杨科罗招阳
- 关键词：胃癌分化程度淋巴结转移
- LMP1羧基端活化区3对鼻咽癌干细胞SP18迁移与侵袭的影响被引量：3
- 2015年
- 为了观察潜伏性膜蛋白1(LMP1)羧基端活性区3(CTAR3)对鼻咽癌干细胞SP18迁移与侵袭的影响,本研究通过建立稳定表达LMP1及CTAR3突变型LMP1(LMP1△252-351)的SP18细胞系(即SP18-LMP1和SP18-LMP1△252-351),观察LMP1-CTAR3缺失突变后对SP18细胞增殖、迁移与侵袭的影响.采用基因芯片分析SP18-LMP1和SP18-LMP1△252-351间的差异表达基因,并验证基因的表达,用生物信息学分析差异表达基因间的相互关系.结果显示:a.SP-LMP1△252-351细胞生长速度较SP-LMP1细胞明显变缓,克隆形成和迁移与侵袭能力降低(n=3,P<0.05);b.鉴定出LMP1羧基端CTAR3影响SP18细胞迁移与侵袭的18个基因(其中表达上调基因13个,下调基因5个),经荧光定量PCR验证与基因芯片检测结果基本一致.c.13个差异基因间相互联系,网络节点联系最多的基因是FN1、MMP14、THBS1、ITGA2、IL1B和IL6基因.结果提示,LMP1羧基端CTAR3可能通过调节FN1、MMP14、THBS1、ITGA2、IL1B和IL6基因的表达,发挥其促鼻咽癌干细胞SP18细胞迁移与侵袭的功能.
- 肖娟张志伟伍石华刘重元唐薇赵强雷明生杨代水
- 关键词：LMP1基因芯片
- EGCG通过降低Notch1和Jagged1表达抑制鼻咽癌干细胞SP18的增殖被引量：6
- 2013年
- 目的探讨表没食子儿茶素没食子酸酯(EGCG)抑制鼻咽癌干细胞SP18增殖的机制。方法采用MTT法检测EGCG抑制SP18细胞增殖的IC50;选用细胞生长曲线、平皿克隆形成实验和软琼脂集落形成实验观察EGCG对鼻咽癌干细胞SP18增殖的影响;采用Western blot检测Notch1和Jagged1蛋白表达。结果 EGCG抑制SP18细胞增殖的IC50值为149.02 mg/L;EGCG呈浓度和时间依赖性抑制SP18细胞的增殖(n=3,P<0.05);EGCG呈浓度依赖性抑制Notch1和Jagged1蛋白的表达。结论 EGCG能有效抑制鼻咽癌干细胞SP18的增殖,其可能通过降低Notch1和Jagged1蛋白的表达而发挥作用。
- 欧琼张志伟罗招阳刘重元杨科崔责文赵强陈波
- 关键词：EGCG细胞增殖NOTCH1蛋白
