国家自然科学基金(30972843)
- 作品数：16 被引量：39H指数：3
- 相关作者：徐世元崔睿张庆国周树勤雷洪伊更多>>
- 相关机构：南方医科大学佛山市第一人民医院广东省人民医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金深圳市医学重点学科建设基金广东省医学科学技术研究基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 大鼠脊髓针刺损伤程度与脊髓功能变化的相关性研究被引量：3
- 2012年
- 目的通过观察大鼠脊髓穿刺致不同损伤程度后病理生理、运动及电生理改变,寻找对脊髓损伤程度最小的方法,为进一步研究局麻药脊髓毒性提供新的途径。方法健康SD大鼠144只随机分为对照组和实验组,实验组又分为A组(29G)、B组(25G)和C组(21G)。实验动物暴露L4-5节段间硬脊膜,直视下分别用21G、25G、29G刺伤L4-5节段脊髓,缝合切口。各组分别在术前进行双后肢运动功能评分,术后各时点记录运动功能评分(BBB评分)、电生理检测及脊髓病理观察。结果对照组麻醉恢复后能站立行走,脊髓结构正常。实验组29G组行为学评分最高,脊髓损伤区域无明显病理改变;21G组运动、脊髓电生理和组织病理的改变明显,2周时明显恢复。结论应用29G穿刺针对脊髓进行针刺对大鼠脊髓功能影响小,具有穿刺损伤小、重复性好的优点,可为研究局麻药脊髓毒性提供新途径。
- 谭永红徐世元范凤飞
- 关键词：脊髓损伤脊髓功能
- p38丝裂原活化蛋白激酶在罗哌卡因致SH—SY5Y细胞凋亡中的作用
- 2011年
- 目的评价p38丝裂原活化蛋白激酶（p38MAPK）在罗哌卡因致SH—SY5Y细胞凋亡中的作用，以探讨罗哌卡因诱发神经毒性的机制。方法采用随机数字表法，将SH—SY5Y细胞随机分为4组（n=18）：正常对照组（c组）、10μmol／Lp38MAPK特异性抑制剂SB203580组（sB组）、3mmol／L罗哌卡因组（R组）、10μmol／LSB203580＋3mmol／L罗哌卡因组（sB＋R组）。c组在细胞培养液中继续培养；SB组在含10μmol／LSB203580培养液中孵育；R组在含3mmol／L罗哌卡因的培养液中孵育；SB＋R组在含10μmol／LSB203580的培养液中孵育30min后，用含3mmol／L罗哌卡因的培养液继续孵育。各组细胞培养或罗哌卡因孵育4h后采用流式细胞仪检测细胞内活性氧（ROS）水平和细胞凋亡率，采用Western blot法检测p38MAPK和磷酸化p38MAPK（p-p38MAPK）的表达，采用MTT法检测细胞活力。结果与c组比较，R组和sB＋R组ROS水平升高，p-p38MAPK表达上调，细胞活力降低，细胞凋亡率升高（P〈0．01），sB组上述指标差异无统计学意义（P〉0．05）；与R组比较，sB组p-p38MAPK表达下调，细胞活力升高，细胞凋亡率降低（P〈0．01）。四组p38MAPK表达水平差异无统计学意义（P〉0．05）。结论罗哌卡因致SH—SY5Y细胞凋亡作用的机制部分与p38MAPK的激活有关。
- 周树勤张庆国赖露颖卢俊许睿徐世元
- 关键词：酰胺类P38丝裂原活化蛋白激酶类细胞凋亡
- 产科镇痛方式选择与并发症被引量：7
- 2010年
- 产科镇痛相关并发症可危及母亲及胎儿/新生儿的安危,国内目前由此所致的分娩镇痛率较低、易引起医患纠纷等相关临床问题仍困扰麻醉科与产科医师。本文就欧洲,美国、南非及部分南亚国家产科镇痛并发症的临床报道、多中心研究或流行病学调查进行分析,期望对其相关并发症的防范与处理有所裨益。
- 徐世元
- 关键词：相关并发症产科镇痛流行病学调查多中心研究分娩镇痛产科医师
- 黄芪多糖预先给药对大鼠鞘内注入布比卡因脊神经毒性的影响被引量：1
- 2010年
- 目的:探讨预先给予黄芪多糖是否可以减轻大鼠鞘内注入布比卡因所致脊神经毒性及其机制。方法:健康雌性SD大鼠,体重180～220g,取鞘内置管成功大鼠30只,随机分成5组(n=6)。对照组(N组):鞘内注射生理盐水30μL,腹腔注入生理盐水。2%与4%布比卡因组(2B组与4B组):鞘内分别注入2%与4%布比卡因30μL,腹腔注入生理盐水。2%与4%布比卡因黄芪多糖预处理组(2H组与4H组):鞘内分别注入2%与4%布比卡因30μL,腹腔注入黄芪多糖25mg/kg,生理盐水稀释成2mL,于鞘内给药前连续注药3d。鞘内注药后10min、20min、30min、1h、2h、4h、1d、2d、3d和4d测定甩尾反应潜伏期(TFL),用最大效应百分比MPE表示。4d后各组大鼠行断颈处死,分离背根神经节,Western blot分析caspase-9蛋白表达水平,并行病理学观察。结果:(1)各组MPE比较差异有统计学意义(P<0.05);(2)鞘内注药后10min,2B组、4B组、2H组和4H组MPE均达到峰值,2B组、2H组和4H组于鞘内注药后2h恢复至基线水平,而4B组于注药后4h方恢复至基线水平。与N组比较,2B组,4B组,2H组和4H组caspase-9蛋白表达均上调(P<0.05);与2B和4B组比较,2H组和4H组caspase-9蛋白表达降低(P<0.05);(3)病理学结果:N组大鼠背根神经节细胞形态和结构正常。2B组和4B组有部分神经细胞萎缩、空泡化。2H组和4H组神经细胞形态和结构基本正常。结论:预先给予黄芪多糖可减轻大鼠鞘内注入布比卡因的脊神经毒性,其机制可能与抑制caspase-9蛋白表达,抗神经细胞凋亡有关。
- 徐世元崔睿张旱愉王宝君张韵
- 关键词：黄芪多糖布比卡因药物毒性CASPASE-9
- 米贝地尔对罗哌卡因诱导SH-SY5Y细胞凋亡的抑制作用研究被引量：1
- 2012年
- 目的:观察T型钙通道拮抗剂米贝地尔对罗哌卡因致SH-SY5Y细胞凋亡的影响,探讨罗哌卡因诱发神经细胞毒性是否与T型钙通道相关。方法:将SH-SY5Y细胞随机分为4组:SH-SY5Y细胞正常培养组(A组);SH-SY5Y细胞5μmol/L米贝地尔培养组(B组);SH-SY5Y细胞3 mmol/L罗哌卡因培养组(C组);SH-SY5Y细胞5μmol/L米贝地尔+3 mmol/L罗哌卡因培养组(D组)。各组细胞分别在有或无3 mmol/L罗哌卡因处理开始时(T0)、处理后1 h(T1)、6 h(T2)、12 h(T3)、24 h(T4),MTT法检测细胞活力、流式细胞术和Hoechst33258染色法检测细胞凋亡率。结果:与A组相比,C组、D组在T1、T2、T3、T4时点细胞活力明显降低(P<0.05);但C组降低幅度更明显,C组与D组比较,两组在T1、T2、T3、T4时点差异有统计学意义(P<0.05)。C组随时间的递增其细胞凋亡率逐渐增加,在T4时凋亡率达到最高;D组在T1、T2、T3、T4时点的细胞凋亡率明显比C组降低,两组差异有统计学意义(P<0.05)。结论:罗哌卡因对SH-SY5Y细胞有毒性作用,米贝地尔可减轻罗哌卡因诱发的神经细胞损伤,提示罗哌卡因诱发神经毒性可能与T型钙通道有关。
- 周树勤文先杰李乐赖露颖张庆国徐世元
- 关键词：罗哌卡因SH-SY5Y凋亡T型钙通道
- 脊髓磷酸化胞外信号调节蛋白激酶在大鼠切口痛痛觉过敏中的作用被引量：3
- 2010年
- 目的 研究切口痛模型大鼠脊髓磷酸化胞外信号调节蛋白激酶（p-ERK）表达的变化及鞘内注射ERK上游激酶MEK的抑制剂U0126对其机械性痛觉阈值的影响.方法 雄性SD大鼠32只按随机数字表法分为假手术组、模型组、DMSO组、U0126组,每组8只,前2组大鼠鞘内注射生理盐水20μL;后2组大鼠分别鞘内注射DMSO、U0126 10μL后用生理盐水10μL冲管.注药10min后除假手术组外,后3组大鼠均制备右后足趾部切口痛模型.分别于制作模型前、模型后2、24、48 h应用YLS-3E电子压痛仪测定各组大鼠右足的机械性痛觉阈值.另取SD大鼠24只.分组方法 和处理同上,每组6只.每组分别在模型后2h、24h选择3只应用免疫组化染色检测大鼠脊髓背角p-ERK的表达.结果模型组、DMSO组大鼠模型后2、24、48 h及U0126组大鼠模型后2、24 h有足机械性痛觉阈值均低于模型前,差异有统计学意义（P〈0.05）;DMSO组和模型组之间比较大鼠机械性痛觉阈值差异无统计学意义（P〉0.05）;与同一时间点DMSO组和模型组比较,U0126组大鼠模型后2、24、48 h右足机械性痛觉阈值均增高,差异有统计学意义（P〈0.05）.免疫组化染色结果发现.与假手术组比较模型组和DMSO组模型后2、24 h患侧脊髓背角P-ERK免疫阳性细胞增多;与模型组和DMSO组同一时间比较,U0126组患侧脊髓背角p-ERK阳性细胞减少,差异均有统计学意义（P〈O.05）.结论 鞘内注射U0126可缓解大鼠切口痛痛觉过敏,减少切口痛大鼠脊髓背角P-ERK阳性细胞的表达,说明脊髓背角ERK通路参与大鼠切口痛痛觉过敏的形成.
- 雷洪伊蔡清香崔睿徐世元
- 关键词：痛觉过敏
- 人AMPKα2基因pEGFP-N1-AMPKα2表达载体的构建和鉴定被引量：1
- 2011年
- 目的构建表达人单磷酸腺苷激活的蛋白激酶催化亚单位α2(AMPKα2)基因的pEGFP-N1-AMPKα2载体,转染SH-SY5Y细胞系,观测其上调AMPKα2基因的效果。方法 PCR法扩增AMPKα2基因片段,克隆到pEGFP-N1质粒载体上。对重组质粒进行DNA序列测定和酶切分析。用质脂体将重组质粒pEGFP-N1-AMPKα2转染到SH-SY5Y细胞系,经G418筛选阳性克隆后,用RT-PCR和Western blot法检测AMPKα2的mRNA和蛋白表达。流式细胞仪检测转染重组质粒细胞内ROS变化。结果经DNA测序和酶切鉴定表明,pEGFP-N1-AMPKα2表达载体构建成功。重组质粒pEGFP-N1-AMPKα2转染SH-SY5Y细胞系后,细胞中AMPKα2蛋白表达量明显增高。SH-SY5Y细胞转染pEGFP-N1-AMPKα2后,ROS含量增多。结论成功构建了人AMPKα2基因的pEGFP-N1-AMPKα2表达载体。pEGFP-N1-AMPKα2能有效上调AMPKα2基因在SH-SY5Y细胞系中的表达,为将来应用其研究AMPK在局麻药致细胞损伤中的作用奠定了基础。
- 卢俊徐世元崔睿张庆国雷洪伊
- 关键词：局麻药活性氧
- 人单磷酸腺苷激活的蛋白激酶催化亚单位α2基因shRNA载体的鉴定和表达
- 2011年
- 目的构建针对人单磷酸腺苷激活的蛋白激酶催化亚单位α2(AMPKα2)基因的pGPU6/GFP/Neo-shRNA表达载体,转染SH-SY5Y细胞株,观测其对AMPKα2基因的沉默效果。方法利用Ambion在线设计软件设计针对人AMPKα2基因的shRNA干扰序列,克隆到pGPU6/GFP/Neo质粒载体上。对重组质粒进行DNA序列测定和酶切分析。用质脂体将重组质粒转导SH-SY5Y细胞株,经G418筛选阳性克隆后用RT-PCR和Western blot法检测AMPKα2的mRNA和蛋白表达水平。结果经DNA测序和酶切鉴定表明,4个shRNA表达载体构建成功。4个重组质粒之一的pGPU6/GFP/Neo-shRNAAMPKα2(3)能有效抑制AMPKα2基因在SH-SY5Y细胞株中的表达,抑制率为63%。结论成功构建了针对人AMPKα2基因的shRNA表达载体pGPU6/GFP/Neo-shRNAAMPKα2。pGPU6/GFP/Neo-shRNAAMPKα2(3)能有效抑制AMPKα2基因在SH-SY5Y细胞株中的表达,为将来应用其研究AMPK在细胞损伤中的作用奠定了基础。
- 卢俊徐世元崔睿张庆国雷洪伊
- 关键词：局麻药
- 妊娠对大鼠布比卡因脊麻效力的影响被引量：3
- 2010年
- 目的 探讨妊娠对大鼠布比卡因脊麻效力的影响.方法 雌性SD大鼠,非孕鼠体重180～220 g,孕鼠（孕17 d）体重350～400 g.取鞘内置管成功的非孕鼠及孕鼠各18只,非孕鼠随机分为3组（n=6）：正常对照组（C组）、2%布比卡因组（B2组）及4%布比卡因组（B4组）;孕鼠随机分为3组（n=6）：对照组（PC组）、2%布比卡因组（PB2组）及4%布比卡因组（PB4组）.C组与PC组：鞘内注射生理盐水30μl,其余4组相应鞘内分别注入2%或4%布比卡因30μl.分别于给药前（基础状态）、给药后10 min、20 min、30 min、1h、2 h、4 h、1 d、2 d、3 d和4 d时测定甩尾反应潜伏期,计算最大镇痛效应百分比（MPE）;并进行后肢运动功能（MF）评分.结果 与基础值比较,B2组于给药后10 min～2 h时MPE升高,给药后10 min～1 h时MF评分升高;B4组于给药后10 min～4 h时MPE升高,给药后10 min～1 h时MF评分升高;PB2组于给药后10 min～1 d时MPE升高,给药后10 min～2 h时MF评分升高;PB4组于给药后10 min～1 d时MPE升高,给药后10 min～4 h时MF评分升高（P＜0.05）.结论 妊娠可增加大鼠布比卡因脊麻的效力.
- 崔睿徐世元雷洪伊蔡清香王冬梅
- 关键词：布比卡因麻醉脊椎
- T-型钙通道在利多卡因致神经母细胞瘤SH-SY5Y细胞损伤中的作用被引量：7
- 2011年
- 目的探讨T-型钙通道在利多卡因致神经母细胞瘤SH—SY5Y细胞损伤中的作用。方法SH—SY5Y细胞离体培养后，采用随机数字表法，将SH—SY5Y细胞随机分为4组，每组66孔，正常对照组（C组）：SH—SY5Y细胞继续培养24h；米贝地尔＋SH—SY5Y细胞组（M组）：培养液中加入T-型钙通道阻断剂米贝地尔，终浓度5μmol／L，孵育24h；利多卡因＋SH-SY5Y细胞组（L组）：培养液中加入利多卡因，终浓度10mmol／L，孵育24h；米贝地尔＋利多卡因＋SH．SY5Y细胞组（ML组）：培养液中加入米贝地尔和利多卡因，终浓度分别为5μmol／L、10mmol／L，孵育24h。于开始培养或孵育时（Tn）、培养或孵育1、6、12和24h时测定SH-SY5Y细胞活力和凋亡率，孵育24h时观察SH．SY5Y细胞形态学。结果与C组比较，L组和ML组SH—SY5Y细胞活力降低，凋亡率升高（P〈0．05），M组差异无统计学意义（P〉0．05）；与M组比较，L组和ML组SH-SY5Y细胞活力降低，凋亡率升高（P〈0．05）；与L组比较，ML组SH-SY5Y细胞活力升高，凋亡率降低（P〈0．05）。L组SH-SY5Y细胞形态学发生改变，ML组SH—SY5Y细胞形态学改变较L组减轻。结论T-型钙通道参与了利多卡因导致的神经细胞损伤。
- 文先杰徐世元周树勤梁桦郑雪琴杨承祥
- 关键词：利多卡因钙通道
