安徽省高校省级自然科学研究项目(KJ2010B375)
- 作品数：16 被引量：29H指数：3
- 相关作者：凌斌周颖冯定庆肖卫华朱靖更多>>
- 相关机构：安徽医科大学附属省立医院中国科学技术大学安徽省分子医学重点实验室更多>>
- 发文基金：安徽省高校省级自然科学研究项目安徽省自然科学基金国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 乳酸杆菌及其体外表达系统在临床中的应用及其前景被引量：5
- 2011年
- 乳酸杆菌是人体中重要的益生菌,被公认为食品级的微生物,在疾病预防、治疗、抗衰老和抗肿瘤等方面发挥着重要的作用。目前,乳酸杆菌的研究主要集中于基因治疗、功能蛋白表达及作为新型疫苗载体等方面。以乳酸杆菌为载体的疫苗主要有避孕疫苗和人乳头瘤病毒疫苗等,工程化改造的乳酸杆菌在疾病预防和治疗中有着更为广阔的前景。
- 王青元周颖凌斌
- 关键词：乳酸杆菌基因表达
- 多发性硬化与妊娠被引量：1
- 2012年
- 多发性硬化是中枢神经系统的脱髓鞘性自身免疫性疾病,女性为主要易感人群,多见于育龄期妇女。多发性硬化本身不会增加妊娠合并症,有些研究发现患有多发性硬化的妊娠妇女引产、使用产钳及娩出低出生体质量儿、身材矮小儿的发生率增加,但是研究显示多发性硬化并没有增加胎儿先天性畸形及死亡率。妊娠、硬膜外麻醉、哺乳不会增加多发性硬化的活动性、复发率及疾病进展情况。综述多发性硬化与妊娠的相互影响以及妊娠期的药物治疗等情况。
- 张婉莹陈玲周颖凌斌
- 关键词：多发性硬化妊娠复发
- ITCH的功能及其与疾病的关系被引量：1
- 2012年
- ITCH又称AIP4(atrophin 1相互作用蛋白4),最初是在研究小鼠表皮颜色时被发现的。ITCH是一个单体蛋白,属于同源的HECT类型的泛素连接酶E3家族,参与体内多种蛋白质的泛素化降解过程;参与免疫反应;参与多种细胞过程,包括细胞循环、增殖和凋亡;在肿瘤的形成过程中发挥重要的作用。现就ITCH的功能及其与疾病的关系研究进展予以综述。
- 陶峰周颖朱靖凌斌
- 关键词：ITCH疾病E3泛素连接酶
- HPV18E6原核表达载体的构建及3×flag-HPV18E6融合蛋白的诱导表达被引量：3
- 2011年
- 目的构建pET-22b-3×flag-HPV18E6原核表达载体,并在大肠杆菌中诱导表达融合蛋白。方法用RT-PCR法从HeLa细胞中扩增出带HindⅢ、SalⅠ酶切位点的HPV18E6基因片段,将HPV18E6基因片段克隆到p3×flag-myc-CMV-24载体上。然后设计特异性引物扩增3×flag-HPV18E6重组基因片段,将该片段连接到pET-22b原核表达载体上,在大肠杆菌中诱导表达3×flag-HPV18E6融合蛋白,经Western blot鉴定。结果 pET-22b-3×flag-HPV18E6原核表达载体构建正确,IPTG诱导以浓度0.1 mmol/L,时间2 h为宜,表达的3×flag-HPV18E6融合蛋白相对分子质量约20 ku。结论成功构建pET-22b-3×flag-HPV18E6原核表达载体并诱导3×flag-HPV18E6融合蛋白表达。
- 王青元朱靖周颖凌斌
- 关键词：人乳头瘤病毒18原核细胞基因表达
- GRIM-19表达与人子宫颈癌移植瘤细胞凋亡关系的研究
- 2011年
- 目的通过裸鼠体内实验探讨GRIM-19基因对子宫颈癌细胞凋亡的影响。方法将HeLa/Control、He-La/GRIM-19接种到裸鼠皮下7周,利用Tunel实验检测移植瘤细胞的凋亡情况,采用Western blot检测移植瘤组织中p53及puma蛋白的表达情况。结果与对照组相比,GRIM-19高表达的移植瘤细胞生长减慢、凋亡增多,p53及其下游基因puma表达增加。结论 GRIM-19可能通过上调p53蛋白的表达促进子宫颈癌细胞的凋亡。
- 程勇凌斌
- 关键词：GRIM-19转染子宫肿瘤
- Grim-19对宫颈癌HeLa细胞端粒酶活性及衰老的影响被引量：3
- 2012年
- 目的重组质粒转染HeLa细胞以探讨Grim-19表达水平的变化对HeLa细胞中端粒酶活性的影响。方法将重组质粒p3×flag-myc-cmv-24-Grim-19(简写Grim-19)通过脂质体转染至HeLa细胞,48 h后通过Western blot检测Grim-19、htert、P16、P21的表达情况,同时检测HeLa细胞衰老和端粒酶活性。结果转染后可见flag的表达及htert的表达降低及P16、P21的表达升高,细胞衰老增加,增殖减弱及端粒酶活性的降低。结论在子宫颈癌细胞株HeLa中Grim-19具有调控端粒酶活性和细胞衰老的作用。
- 杨霞王青元朱靖冯定庆朱园园周颖凌斌
- 关键词：GRIM-19子宫颈腺癌HELA细胞端粒酶
- E6-AP三种转录本在宫颈癌的表达及临床意义
- 2010年
- 目的:探讨E6-AP3种转录本在宫颈癌的表达及其临床意义。方法:免疫组织化学SP法检测30例宫颈癌组织及20例正常宫颈组织中E6-AP蛋白的表达,分析E6-AP的表达与宫颈癌病理分级之间的关系。同时用W estern blot检测E6-AP在正常宫颈脱落细胞和宫颈癌脱落细胞的表达水平。RT-PCR方法明确E6-AP 3种转录本在正常宫颈组织和宫颈癌组织中的表达。结果:RT-PCR结果显示E6-AP3种亚型在宫颈癌组织中均存在,并且表达高于正常子宫颈组织,其中Ⅱ型表达水平很低,以Ⅰ型和Ⅲ型为主。免疫组化和W estern B lot结果显示E6-AP在宫颈癌组织表达水平高于正常宫颈组织。结论:E6-AP表达升高可能与宫颈癌的发病机制相关。
- 范少君徐静竹朱靖卫莹凌斌周颖
- 关键词：宫颈肿瘤泛素
- HPV16E6真核表达载体的构建及其在Caski细胞中的表达被引量：1
- 2010年
- 目的构建p3×flag-myc-CMV-24-HPV16E6真核表达载体,转染Caski细胞,检测其在Caski细胞中的表达。方法用RT-PCR法从CaSki细胞中扩增出带HindⅢ、XbalⅠ酶切位点的HPV16E6基因片段,将HPV16E6基因全长片段克隆到真核表达载体p3×flag-myc-CMV-24上,通过脂质体将p3×flag-myc-CMV-24-HPV16E6转染入Caski细胞。结果构建的p3×flag-myc-CMV-24-HPV16E6的真核表达载体转染Caski细胞48h后经Western-blot可检测到融合蛋白高表达。结论成功构建了p3×flag-myc-CMV-24-HPV16E6真核表达载体;为进一步研究HPV16E6导致子宫颈癌病变的机制奠定了基础。
- 王青元朱靖范少君周颖冯定庆李彩荣朱园园肖卫华凌斌
- GRIM-19对子宫颈癌细胞株HeLa细胞Survivin基因表达的影响
- 2010年
- 目的:探讨稳定转染GRIM-19对子宫颈癌细胞株HeLa细胞凋亡抑制基因Survivin的表达以及细胞增殖的影响。方法:采用脂质体转染法将GRIM-19重组质粒转染子宫颈癌细胞株HeLa细胞,建立稳定表达GRIM-19的HeLa细胞株,采用RT-PCR检测HeLa细胞转染GRIM-19后mRNA水平表达情况,采用WesternBlot检测稳定转染后GRIM-19与Survivin的表达情况,应用细胞计数法观察各组细胞增殖水平。结果:建立稳定的GRIM-19基因表达的HeLa细胞株,命名为HeLa/G19细胞,对照组细胞命名为HeLa/Con细胞。RT-PCR检测显示GRIM-19mRNA表达明显增加,WesternBlot检测显示GRIM-19的蛋白表达显著升高、Survivin蛋白的表达水平显著降低。细胞计数法实验显示HeLa/GRIM-19细胞增殖较HeLa/Con细胞明显减慢(P<0.05)。结论:GRIM-19可以抑制子宫颈癌细胞Survivin的表达,阻滞细胞的生长,可能是子宫颈癌治疗的新靶点。
- 卫莹凌斌朱靖李敏范少君冯定庆肖卫华周颖
- 关键词：GRIM-19转染子宫颈癌SURVIVIN
- GRIM-19原核表达载体的构建及GST-GRIM-19的诱导表达与纯化被引量：4
- 2011年
- 目的构建GRIM-19原核表达载体,在大肠杆菌中诱导表达并纯化GST-GRIM-19融合蛋白。方法用RT-PCR法从HeLa细胞中扩增出含BamHⅠ、XhoⅠ酶切位点的GRIM-19基因片段,将其克隆至pGEX-4T-3原核表达载体上,在大肠杆菌中诱导表达GST-GRIM-19融合蛋白,用Glu-tathione Sepharose 4B纯化,纯化后蛋白经Western blot鉴定。结果构建pGEX-4T-3-GRIM-19原核表达载体成功,表达的GST-GRIM-19融合蛋白相对分子质量约45 ku,浓度0.1mmol/L异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)诱导2 h,并成功纯化到融合蛋白。结论成功构建GRIM-19原核表达载体,诱导表达并纯化GST-GRIM-19融合蛋白。
- 朱靖周颖王青元冯定庆朱园园李彩荣凌斌
- 关键词：原核细胞重组融合蛋白质类
