上海市科学技术委员会基础研究重点项目(03JC14057)
- 作品数：6 被引量：29H指数：3
- 相关作者：王全喜吴双秀章秀于晶汪滢更多>>
- 相关机构：上海师范大学上海交通大学苏州科技学院更多>>
- 发文基金：上海市科学技术委员会基础研究重点项目上海市教育委员会重点学科基金上海市教委科研基金更多>>
- 相关领域：生物学农业科学更多>>
- 发菜中麦芽寡糖基海藻糖合成酶的抗体制备及鉴定
- 2009年
- 通过PCR法从发菜总DNA中克隆到编码麦芽寡糖基海藻糖合成酶基因前645bp的催化位点保守序列的片段,将该基因片段在大肠杆菌中表达,得到符合预期大小的重组蛋白.将该重组蛋白纯化回收用于制备该酶的特异性抗体.检测表明抗体具有较高效价.利用该抗体检测干旱胁迫下发菜藻丝体中该酶的表达量表明干旱胁迫条件下该酶的表达量增加,且与海藻糖积累量呈正相关,可能参与发菜的抗逆性保护作用.
- 沈蓉蓉章秀吴双秀何靓王全喜
- 关键词：发菜抗体干旱胁迫
- 发菜中超氧化物歧化酶基因的克隆及在大肠杆菌中的表达被引量：15
- 2007年
- 采用基因工程技术从发菜总DNA中克隆了一段的基因序列,该序列与基因库中已公布的编码地木耳(Nostoc commnue)超氧化物歧化酶的氨基酸序列同源性为97%。将该基因插入含T7启动子质粒pET-32中构建表达质粒pET-sod,然后将该表达质粒转入大肠杆菌BL21中进行蛋白表达,表达菌株用1 mmol.L-1IPTG诱导表达数小时后,产生较多的重组的蛋白,且该蛋白以可溶性蛋白形式存在。SDS-PAGE分析表明,在相对分子量约为22 kd的位置有一条明显蛋白质带。将诱导表达后的蛋白通过亲和层析的方法进行蛋白纯化;NBT光还原法测定表达产物的比活力,每毫克纯化蛋白约为2 550 U。对纯化后的蛋白进行高温胁迫研究,将该纯化蛋白在60℃高温下胁迫90 min后,其活性为原(未经胁迫)蛋白活性的85%。
- 汪滢陈李萍陈晓章秀于晶王全喜
- 关键词：发菜酶活测定
- 益生菌制剂和植酸酶对育成期雉鸡生长、营养物质利用的影响被引量：9
- 2006年
- 研究采用2×2因子试验设计,选择96只健康育成期环颈雉鸡,在基础日粮中添加益生菌EM(0.1%)、植酸酶(300U·kg-1)进行生长、代谢试验,研究EM、植酸酶对雉鸡育成期生长、营养物质利用的影响。结果表明:无论单一添加EM或植酸酶,还是同时添加EM和植酸酶,均能够显著提高促进育成期雉鸡的平均日增重,降低料重比,提高营养物质利用率。与对照组相比,EM、植酸酶处理组平均日增重分别提高8.95%(P<0.05)、5.34%(P<0.05),对采食量及平均体重无显著影响(P>0.05);同时添加EM、植酸酶处理组代谢能、粗蛋白及总磷表观消化率分别提高6.2%(P<0.05)、4.8%(P<0.05)、4.9%(P<0.05),而存留氮量提高6.45%(P<005),益生菌EM和植酸酶在雉鸡育成期生长性能和营养物质利用存在加性效应。
- 李新红顾孝连
- 关键词：植酸酶雉鸡
- 葛仙米中SOD基因的克隆及在大肠杆菌中的表达被引量：1
- 2008年
- 采用PCR技术从葛仙米(Nostoc sphaeroides)总DNA中克隆了一段基因序列,该序列与基因库中已公布的编码普通念珠藻(Nostoc commnue)超氧化物歧化酶的氨基酸序列同源性为98%.将该基因插入含T7启动子的质粒pET-32a(+)中构建表达质粒pET-sod,然后将该表达质粒转入大肠杆菌BL21中进行蛋白表达,表达菌株用1mmol/LIPTG诱导表达数小时后,产生较多重组的蛋白,且该蛋白以可溶性蛋白形式存在.SDS-PAGE分析表明:在相对分子量约为22kd的位置有一条明显蛋白质带.将诱导表达后的蛋白通过亲和层析的方法进行蛋白纯化;NBT光还原法测定表达产物的比活力,每毫克纯化蛋白约为2550U.
- 汪滢章秀吴双秀王全喜
- 关键词：葛仙米
- 干旱胁迫下发菜原植体中海藻糖、蔗糖测定被引量：7
- 2007年
- 检测了吸水饱和后的发菜原植体,在不同干燥时间下海藻糖及蔗糖的含量变化,研究表明:发菜原植体中有海藻糖、蔗糖存在.尽管发菜原植体内海藻糖含量略低于蔗糖含量,但海藻糖含量在干旱胁迫初期便迅速升高,之后一直保持较高水平,这与发菜中蔗糖含量变化趋势相同.所以在干旱胁迫时,海藻糖和蔗糖都可能对原植体有保护作用,海藻糖很可能是发菜适应极端环境的重要保护因子之一.
- 庞婉婷吴双秀于晶王全喜
- 关键词：发菜发状念珠藻海藻糖蔗糖干旱胁迫
- 发状念珠藻中麦芽寡糖基海藻糖水解酶基因的克隆和序列分析
- 2011年
- 从发状念珠藻(Nostoc flaglliforme)中克隆出麦芽寡糖基海藻糖基水解酶MTHase的基因TreZ,对该基因核苷酸序列测序表明开读框全长1848 bp,编码的蛋白质有615个氨基酸.根据基因序列预测的TreZ氨基酸序列具有MTHase的催化功能保守区.发菜TreZ和TreY与点形念珠藻(Nostoc punctiforme)的TreZ和TreY有很高的同源性.结果初步表明:可以从发状念珠藻中克隆到麦芽寡糖基海藻糖水解酶基因TreZ,为进一步研究海藻糖代谢在发状念珠藻抗逆机理的工作奠定了理论和实验基础.
- 何靓吴双秀沈蓉蓉王全喜
- 关键词：发状念珠藻基因克隆
