国家自然科学基金(30972821)
- 作品数：7 被引量：52H指数：4
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- 相关机构：南京医科大学江苏省人民医院更多>>
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- 非小细胞肺癌患者血清中SP70的检测及其临床意义被引量：24
- 2012年
- 目的评价血清中单抗NJ001相关靶抗原SP70能否成为检测非小细胞肺癌（NSCLC）的新型血清肿瘤标志物。方法以SPC—A1为抗原免疫新西兰兔，制备多抗。用多抗包被微孔板，NJ001为一抗，酶标记的羊抗鼠抗体为标记抗体，建立双抗体夹心ELISA法，并优化实验条件；采用该法对2007年10月至2011年6月从南京医科大学第一附属医院收集的经病理确诊的175例肺癌（包括80例肺腺癌、70例肺鳞癌和25例小细胞肺癌）、25例肺良性疾病患者和300名健康体检者血清中SP70进行检测；同时与电化学发光法检测癌胚抗原（CEA）、神经元特异性烯醇化酶（NSE）和角质蛋白19片段（CYFRA21—1）进行比较；各组问阳性率比较采用，检验或Fisher确切概率法。结果肺腺癌、肺鳞癌、小细胞肺癌和肺良性疾病组的阳性率分别为68．8％、51．4％、16．0％和12．0％，均明显高于健康体检组（7．3％）；NSCLC组（肺腺癌和肺鳞癌）阳性率高于小细胞肺癌组（60．7％vs16．0％，x2=17．23，P〈0．05）和肺良性疾病组（60．7％vs12．0％，r=20．41，P〈0．05）；68例有分期资料的NSCLC患者中，早期组（x2=30）的阳性率达76．7％。另外，ELISA法对NSCLC患者SP70总检出率高于CEA、NSE和CYFRA21—1（32．7％、18．0％和37．3％），差异有统计学意义（60．7％vs32．7％，χ^2=23．63，P〈0．05；60．7％vs18．0％,χ^2=57．22，P〈0．05；60．7％vs37．3％，χ^2=16．34，P〈0．05）。结论NSCLC患者血清中SP70阳性检出率较高，SP70可能是潜在的用于诊断NSCLC的血清肿瘤标志物。
- 彭婪潘世扬王芳黄佩珺徐婷黄蕾张丽霞黎青张红梅徐建秦雪君韩月徐娟朱善军
- 关键词：肺肿瘤HSP70热休克蛋白质类酶联免疫吸附测定
- 熔解曲线法用于肺癌APC基因甲基化模式的研究被引量：2
- 2012年
- 目的以熔解曲线法测定4株肺癌细胞株和肺癌病人APC基因启动子区的甲基化模式。方法以脐血淋巴细胞DNA及其转甲基后的DNA经化学修饰、克隆测序的质粒，作为完全非甲基化和完全甲基化标准品。设计通用引物，采用加入荧光染料SYBRGreen1的荧光定量PCR法扩增包含21个CpG位点的APC基因启动子区的目的序列，以熔解曲线法通过与完全非甲基化和完全甲基化标准品的Tm值比较，确定四株肺癌细胞株（NCI-H446，NCI-H460，SPCA1，NCI—H520）在该区段的甲基化模式，并通过克隆测序验证。同时测定两例肺癌患者癌组织中APC基因启动子区甲基化模式。结果四株肺癌细胞株中，NCI-H446，SPCA1和NCI—H520的Tm值与完全非甲基化标准品的Tm值相同，而NCI—H460的Tm值有两个，分别与完全非甲基化和完全甲基化标准品的Tm值吻合，并经克隆测序验证。两例肺癌患者癌组织的Tm值位于完全非甲基化和完全甲基化标准品的Tm值之间。结论小细胞肺癌细胞株NCI—H446，肺腺癌细胞株SPCA1和肺鳞癌细胞株NCI—H520的APC基因启动子区为完全未甲基化型，而大细胞肺癌细胞株NCI—H460APC基因启动子区甲基化模式为等位基因杂合型。两例肺癌患者癌组织中的APC基因启动子均为部分甲基化型。熔解曲线法是简单、经济和实用的甲基化模式检测方法。
- 高丽潘世扬陈丹张丽霞谢而付徐建黄佩珺
- 关键词：熔解曲线肺癌甲基化
- 良恶性胸腔积液鉴别中SP70检测的临床意义被引量：13
- 2012年
- 目的探讨SP70抗原的检测对鉴别癌性胸腔积液和非癌性胸腔积液的诊断价值。方法采用病例对照研究。收集2011年7月至2012年2月经临床确诊的肺癌患者胸腔积液108例和非癌性胸腔积液122例，采用双抗体夹心ELISA法对胸腔积液中SP70抗原进行检测；同时与电化学发光法检测CEA、CYFRA21—1和NSE的结果进行比较；采用直接免疫荧光法对胸腔积液脱落细胞上的SP70抗原进行检测，并与HE染色法的脱落细胞学检测结果进行比较，各组问阳性率比较采用矿检验或Fisher确切概率法。结果癌性胸腔积液患者中SP70、CEA、CYFRA21—1、NSE的阳性率分别为72．2％、58．3％、52．8％和30．6％，显著高于非癌性胸腔积液组（9．8％、13．1％、23．O％和19．7％），SP70、CEA、CYFRA21—1、NSE的特异度分别为90．2％、86．9％、77．0％和80．3％；非小细胞肺癌组的总阳性率显著高于小细胞肺癌组的阳性率（74．3％〉0．0％），差异有统计学意义（P=0．02〈0．05），癌性胸腔积液患者中SP70的阳性符合率高于传统脱落细胞学HE染色的阳性符合率（72．2％〉47．2％），差异有统计学意义（x2=14．03，P〈0．05）。结论测定胸腔积液中及脱落细胞上的SP70抗原，能提高癌性胸腔积液诊断的敏感度和特异度。
- 杨瑞霞潘世扬王芳徐建黄珮珺张燕徐娟韩月朱善军曹艳王鹏许雨乔娄鉴芳史新惠
- 关键词：酶联免疫吸附测定荧光免疫测定胸腔积液
- 甲基化CpG结合域重组蛋白的表达与鉴定
- 2012年
- 目的:在大肠杆菌中表达甲基化CpG结合域(methyl-CpG-binding domain,MBD)重组蛋白。方法:对人甲基化CpG结合蛋白2(methyl-CpG-binding protein 2,Mecp2)的MBD区行密码子优化,将人工合成的DNA克隆至原核表达载体pGS21a,在大肠杆菌E.coli Rosetta(DE3)中诱导表达,通过SDS-PAGE和Western blot鉴定蛋白表达;镍亲和层析柱纯化重组蛋白。表面等离子共振分析重组MBD蛋白与甲基化DNA的结合能力。结果:酶切和核酸测序证实,成功构建了含密码子优化的MBD基因的原核表达载体。SDS-PAGE和Western blot结果显示,MBD重组蛋白在大肠杆菌中得到表达。亲和层析法纯化后获得了相对分子量为38 000的MBD重组蛋白。SPR分析显示MBD重组蛋白能特异结合甲基化DNA。结论:成功构建含密码子优化的MBD基因的原核表达载体,MBD重组蛋白能在大肠杆菌中表达。
- 徐建潘世扬许雨乔孙瑞红黄蕾彭珊珊
- 关键词：原核表达
- 血浆DNA定量检测在晚期肺癌患者个体化治疗中的应用被引量：6
- 2010年
- 目的通过监测晚期肺癌患者化疗过程中血浆DNA水平的变化,探讨其在疗效预测以及个体化治疗中的应用。方法采集35名晚期肺癌患者化疗前、后静脉血,用磁珠法提取血浆循环DNA和内参照质粒DNA,双重荧光定量PCR技术进行DNA定量检测,以100名体检健康者为对照。结果晚期肺癌患者化疗前血浆DNA平均含量为66.4（33.1-105.0）ng/ml,显著高于健康对照组血浆DNA平均含量22.4（16.2-30.0）ng/ml（P〈0.01）。一线药物化疗后,部分缓解组肺癌患者血浆DNA值较化疗前显著下降（P〈0.01）,且与病情稳定组、病情进展组患者血浆DNA值有显著差异（P均〈0.05）,而与健康对照组已无差异。生存曲线分析显示,化疗后血浆DNA〈50 ng/ml的患者生存率高于血浆DNA≥50 ng/ml的患者（P〈0.01）。结论血浆DNA的变化可敏感地反映晚期肺癌患者化疗疗效,在肿瘤个体化治疗中发挥重要作用。
- 夏文颖丁清清潘世扬束永前徐婷陆雅春耿雁陈丹黄珮珺黄蕾徐建
- 关键词：晚期肺癌化疗个体化治疗血浆DNA
- 完全胸腔镜与传统开放肺叶切除术对非小细胞肺癌患者围手术期影响的比较被引量：16
- 2010年
- 目的:比较完全胸腔镜与传统开放行非小细胞肺癌肺叶切除术对患者围手术期临床疗效、创伤及急性期反应。方法:将40例非小细胞肺癌患者分为完全胸腔镜手术(VATS)组和传统开放手术(TOS)组,每组20例。比较肺叶切除术围手术期临床疗以及血浆游离DNA浓度和血清C反应蛋白(CRP)水平,并进行统计分析。结果:两组无死亡病例,均未出现术后不良并发症,VATS组无中转开胸。两组的手术时间、清扫淋巴结站数及个数、术后引流时间、引流量无统计学差异(P>0.05)。VATS组的术中失血量、术后疼痛评分、术后下床活动日、术后住院天数明显低于TOS组,有统计学差异(P<0.05)。两组术前血浆DNA浓度和CRP水平无统计学差异(P>0.05),术后第1、3和5天各时间点VATS组血浆DNA浓度和CRP水平均明显低于同时间点TOS组(P<0.05)。结论:完全胸腔镜下非小细胞肺癌肺叶切除术与传统开放手术相比,围手术期疗效没有明显差异,却明显减轻了对机体的创伤、急性期反应和病人的痛苦,具有明确的微创性。
- 于裕陈亮潘世扬朱全张石江陈亦江夏文颖
- 关键词：肺叶切除术非小细胞肺癌血浆DNAC反应蛋白
- 急性髓系白血病患者血浆循环DNA动态监测及其临床意义被引量：4
- 2012年
- 本研究旨在动态监测急性髓系白血病(AML)患者血浆循环DNA的含量,探讨其临床意义。采集66例AML患者不同临床状态的静脉血,以60例体检健康者、20例良性血液病患者、20例实体肿瘤患者为对照,用磁珠法提取血浆标本中循环DNA和内参照质粒DNA,双重荧光定量PCR技术进行DNA定量检测。结果表明:AML患者诊断时血浆DNA含量为168.5(73.4-245.1)ng/ml,显著高于各对照组,男性患者血浆DNA含量显著高于女性患者(P=0.019),不同年龄、不同FAB型别的患者间血浆DNA含量无统计学差异。化疗后血浆DNA水平显著低于化疗前,完全缓解、部分缓解组患者血浆DNA水平与健康对照组已无显著差异,但与未缓解组有显著性差异(P<0.05)。缓解后复发的6例患者中有5例(83.3%)复发时血浆DNA水平明显升高,未复发的25例患者中有22例(88.0%)血浆DNA水平保持稳定。结论:血浆DNA定量检测对AML的化疗疗效判断及复发监测具有重要意义。
- 蒋叶潘世扬夏文颖陈丹王宏张丽霞徐娟彭蘡仇海荣缪扣荣李建勇吴雨洁
- 关键词：急性髓系白血病
