江苏省科技攻关计划(BE2007301) 作品数:9 被引量:64 H指数:5 相关作者: 黎星辉 房婉萍 成浩 陈暄 王丽鸳 更多>> 相关机构: 南京农业大学 中国农业科学院茶叶研究所 苏州市吴中区农业局 更多>> 发文基金: 江苏省科技攻关计划 国家教育部博士点基金 国家自然科学基金 更多>> 相关领域: 农业科学 生物学 更多>>
几种农杆菌的耐酚性能比较与驯化研究 被引量:4 2008年 为了明确不同农杆菌菌种对茶多酚的耐受性能变化幅度,以及驯化培养对提高农杆菌茶多酚耐受性、从而提高茶树遗传转化中遗传转化率的作用与可行性,本文比较了茶多酚对四种农杆菌生长的抑制率,进行了耐酚菌株的驯化培养,最后比较了驯化菌株与原始菌株的转化能力。结果表明:茶多酚对几种农杆菌均有明显的生长抑制作用,但不同菌种的耐受性能差异较大;通过驯化培养得到的耐酚菌株EHA105AP,其耐酚性能提高了90.89%,同时,其在茶树叶片和愈伤中的GUS瞬时表达率也分别提高了43.85%和57.55%。 仓梅芹 周健 成浩 黎星辉 王丽鸳关键词:茶多酚 农杆菌 利用GS基因构建茶氨酸生物合成工程菌的研究 被引量:9 2008年 为了高效合成茶氨酸,本研究通过将荧光假单胞菌GS基因转接入pET32a质粒中,再将重组质粒转化到E.coli BL21中,构建了一种生物合成茶氨酸的基因工程菌。工程菌株经0.1mmol/LIPTG,28℃诱导表达,湿菌体的酶活达到41.79U/mg prot,大约是出发菌株E.coli BL21的126.64倍。工程菌催化L-谷氨酸钠和盐酸乙胺反应生成茶氨酸的产量达到6.2g/L,其催化L-谷氨酰胺和盐酸乙胺反应生成茶氨酸的能力较出发菌株E.coliBL21有显著提高。 朱文娴 黎星辉 王丽鸳 房婉萍 成浩关键词:谷氨酰胺合成酶 茶氨酸 工程菌 茶树花发育相关蛋白激酶基因的分离与序列分析(英文) 应用cDNA-AFLP(Amplified fragment length polymorphism)技术,分析了茶树在花蕾发育过程中基因表达的差异。其中一个特异片段测序结果表明,其氨基酸序列与拟蓝芥的一种蛋白激酶的同源... 汤茶琴 陈暄 黎星辉 房婉萍 杨亦扬关键词:茶树 花发育 蛋白激酶基因 文献传递 早生高产优质茶树新品种苏茶早的选育 被引量:2 2008年 苏茶早是经系统选育途径育成的早生优质抗寒茶树良种。品比试验结果表明:苏茶早春季新梢萌发期较对照品种福鼎大白早3 d;产量达到237.2 kg/667m2,较福鼎大白高17%;一芽二叶原料中茶多酚含量25.43%、氨基酸含量4.48%、咖啡碱含量3.95%,生化成分含量高,各成分比例协调,绿茶品质优异;抗寒抗旱性均强,适应性强;抗病虫鉴定结果与福鼎大白相当。 房婉萍 潘同兴 徐玉琴 陈暄 黎星辉关键词:茶树 选育 脲醛控释复合肥对洞庭碧螺春茶树冠层叶绿素含量的影响 被引量:6 2008年 为了提高碧螺春茶叶品质和控制太湖水体的富营养化,提高太湖周边地区的肥料利用效率,在苏州碧螺春原产地进行了脲醛控释复合肥肥料试验,结果表明:脲醛控释复合肥能有效地增加茶树冠层叶片中叶绿素含量,降低叶绿素a、b含量比值。施用氮磷钾脲醛控释复合肥和传统的高浓度的复合肥,都能有效地增加茶树叶片中叶绿素含量。各处理小区叶绿素a、b含量比值间差异不明显。 郭益红 季小明 房婉萍 肖润林 陈易飞 马运涛 黎星辉关键词:碧螺春茶 叶绿素 茶树花发育相关的一个钙依赖蛋白激酶基因的克隆与表达分析 被引量:5 2009年 应用cDNA-AFLP(Amplified Fragment Length Polymorphism)技术分析了结实率差异显著的龙井43和大叶乌龙两个茶树品种在花蕾发育过程中基因表达的差异。从获得的差异图谱中,克隆得到一个与茶树花发育相关的钙依赖蛋白激酶基因片段,然后用RCAE方法扩增获得其cDNA全长序列,命名为茶树TCK(Camellia sinensis calcium-dependent protein kinase)基因,GenBank登录号EU732607。该基因cDNA序列全长2281bp,编码760个氨基酸。用RT-PCR方法进一步研究该基因的功能,检测其表达特异性,结果表明该基因只在茶树花蕾发育后期特异表达,在叶、花蕾发育早期均无表达,提示TCK基因可能在茶树花发育过程中发挥重要作用。 陈暄 汤茶琴 邹中伟 杨亦扬 房婉萍 王玉花 黎星辉关键词:茶树 花发育 特异表达 茶树冷胁迫诱导抗寒基因CBF的克隆与表达分析 被引量:28 2009年 利用cDNA-AFLP技术进行了茶树低温胁迫处理的基因表达差异分析,获得低温诱导后特异表达的差异片段TDF11(transcript derived fragment,TDF)。经BLAST比对发现该片段与白菜、拟南芥、烟草的抗寒基因CBF(C-repeat binding factor)分别有94%、84%、81%的同源性。通过3’/5’RACE的方法获得该片段cDNA全长序列(GenBank,登录号EU857638)。所得序列全长981bp,其开放阅读框编码275个氨基酸。该基因与白菜、烟草、拟南芥中的CBF基因编码的氨基酸序列分别有74%、57%、57%的同源性。用RT-PCR的方法对其在低温处理过程中的表达进行分析,结果表明,茶树CBF基因在低温诱导4h开始表达,在8h左右表达量最高,然后开始下降,但仍维持在一个较高的水平。结果提示CBF基因可能在茶树抗寒分子机制的形成过程中发挥重要的作用。 陈暄 房婉萍 邹中伟 王玉花 成浩 黎星辉关键词:茶树 CBF基因 克隆 茶树无性系引进良种的生长适应性研究 被引量:8 2009年 为了提高江苏省茶园良种率,建立优质、高产、高效茶园,对从福建、浙江、安徽、湖南4省引进的19个无性系茶树良种在茶树幼龄期和试采期的移栽成活率、树冠性状、萌发期、定型修剪物重量、早期鲜叶产量、抗旱性、抗寒性等性状进行了大田试验分析与比较。结果表明:黔方、汝城早芽、蒿绿细芽、云桂大叶、龙井长叶、龙井43、迎霜、9201、乌牛早、浙农113、白毫早、日铸茶、浙农139等品种的生长势、物候期、抗旱性、抗寒性和早期鲜叶产量等性状表现较好,适合江苏传统茶区引种栽培。 施伟文 龚艳 汤茶琴 周静峰 徐德良 顾卫忠 张定 黎星辉关键词:茶树 引种 无性系良种 适应性 茶园对氮素的生物拦截作用综述 2010年 田间氮素的过量施用产生氮素流失,造成水体富营养化、环境污染等一系列问题。本文对氮素流失与茶园生物拦截作用作一简要的回顾与展望,以期为今后的理论及实践研究提供参考。 季小明 杨路成 宋储君 王玉花 陈暄 黎星辉关键词:氮素 茶园 催化合成茶氨酸的基因工程菌的构建及重组基因的表达 被引量:5 2008年 将大肠杆菌DH5α的GGT基因转接入pUC19质粒中后,再转入大肠杆菌菌液DH5α,构建了一种生物合成茶氨酸的基因工程菌。表达重组酶的最适养菌温度、最适诱导剂浓度及最适诱导温度分别为32℃、0.1mmol/L、32℃。工程菌株经IPTG诱导后,酶活大约是出发菌株DH5α的2.6倍,其催化谷氨酰胺和盐酸乙胺反应生成茶氨酸的产量达到0.317 mg/ml,生物生成茶氨酸的能力比出发菌株E.coliDH5α明显提高。 朱文娴 王丽鸳 成浩 房婉萍 黎星辉关键词:Γ-谷氨酰转肽酶 茶氨酸 工程菌 基因表达