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湖南省研究生科研创新项目(CX2011B397)
作品数:
1
被引量:9
H指数:1
相关作者:
龚凤娟
张宇凤
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相关机构:
医学部
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发文基金:
湖南省研究生科研创新项目
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相关领域:
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张宇凤
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龚凤娟
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2013
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禽多杀性巴氏杆菌C48-3株ompH基因敲除突变株的构建及其生物学功能
被引量:9
2013年
【目的】探讨ompH基因在禽多杀性巴氏杆菌致病过程中的作用。【方法】利用同源重组原理构建中间为四环素抗性基因,两侧为ompH基因上下游同源序列同源的敲除载体pWSK29ΔompH,将敲除载体电击转入C48-3株感受态细胞中,通过四环素抗性和菌落PCR筛选ompH基因的敲除突变株,并通过组合PCR、逆转录PCR和DNA测序对突变株进行验证。用生物学功能实验比较野生株、互补株和突变株在生长速率、荚膜结构、粘着能力和致病性等方面的差异。【结果】组合PCR、逆转录PCR和DNA测序结果证实ompH基因的敲除突变株C48-3ΔompH构建成功,电镜观察结果证实ompH基因的缺陷影响细菌的荚膜合成能力,粘附实验结果显示与野生株C48-3和互补株C48-3C相比突变株C48-3ΔompH对CEF细胞的粘附能力显著降低(P<0.01),而小鼠毒力实验结果表明突变株C48-3ΔompH的致病性相对减弱。【结论】本实验构建的突变株C48-3ΔompH,为进一步研究多杀性巴氏杆菌的致病机理奠定基础。
吾鲁木汗.那孜尔别克
张宇凤
龚凤娟
泽田拓士
恩特马克.布拉提白
关键词:
禽多杀性巴氏杆菌
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