国家自然科学基金(30571967)
- 作品数：9 被引量：57H指数：4
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- TGF-β_1、siRNA对BPD模型鼠肺损伤的干预研究被引量：2
- 2008年
- 目的探讨核糖核酸(RNA)干扰在支气管肺发育不良(BPD)模型鼠干预治疗中的作用及相关机制。方法体外化学合成转化生长因子-β1(TGF-β1)序列特异性双链小干扰RNA(siRNA),在高氧(≥95%,7d)诱导下体内导入新生SD大鼠,应用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)技术和酶联免疫吸附法(ELISA)技术测定干预前后肺组织TGF-β1信使核糖核酸(mRNA)和蛋白表达,苏木素-伊红(HE)染色对照观察干预前后肺组织形态结构变化。结果干预后TGF-β1mRNA和蛋白表达水平降低。高氧干预组肺组织病理形态分析,与正常组相比较,高氧组干预后较未干预组明显好转,肺泡大小变得较为均一,肺间隔开始增厚,肺泡数增多。结论体外合成的siRNA可有效抑制高氧肺组织中TGF-β1基因的高表达,减轻高氧所致肺泡化阻滞。
- 王玲朱翠平吕回
- 关键词：转化生长因子Β1高浓度氧SIRNA肺损伤
- 支气管肺发育不良患儿TGF-β1蛋白表达的研究被引量：8
- 2010年
- 目的 探讨在支气管肺发育不良患儿中转化生长因子β1蛋白的表达变化及其意义.方法 收集北京军区总医院附属八一儿童医院早产新生儿重症监护室患儿血清共65例,其中有支气管肺发育不良趋势患儿34例（血清支气管肺发育不良组）,血清对照组31例;同时收集家属放弃后死亡的早产儿肺组织6例,肺组织支气管肺发育不良组和肺组织对照组各3例.采用酶联免疫吸附试验方法 检测血清中转化生长因子β1蛋白的浓度;苏木素-伊红染色观察肺组织病理变化,免疫组化及荧光技术检测转化生长因子β1蛋白的表达变化.结果 转化生长因子β1蛋白血清支气管肺发育不良组表达量（9 819.1±5 540.1pg/mL）远高于血清对照组（5 952.7±2 666.0pg/mL）,两组间比较差异有统计学意义（t=3.634,P=0.001）;免疫组化结果 显示肺组织支气管肺发育不良组染色面积及强度均大于肺组织对照组,应用专业图像软件分析显示肺组织支气管发育不良组平均光密度值（0.245±0.152）高于肺组织对照组（0.116±0.073）,两组比较差异有统计学意义（t=-2.282,P=0.042）;免疫荧光显示肺组织支气管肺发育不良组肺泡上皮细胞内转化生长因子β1荧光表达强,密度大且饱满;肺组织对照组荧光表达弱,呈空泡状.结论 转化生长因子β1的过度表达可能在支气管肺发育不良患儿的肺发育障碍及肺间质纤维化中发挥重要作用.
- 孙永强李秋平封志纯
- 关键词：转化生长因子Β1支气管肺发育不良酶联免疫吸附试验免疫荧光技术
- 小分子干扰RNA对新生鼠肺成纤维细胞转化生长因子β1的干预效果及意义
- 2008年
- 目的探讨转化生长因子β1（TGF—β1）小分子干扰RNA（siRNA）体外转染新生鼠肺成纤维细胞的干预效果，研究TGF—β1 siRNA的最佳干预剂量及维持时间。方法首先采用化学合成TGF—β1 siRNA对新生鼠肺成纤维细胞进行干预，通过实时定量PCR检测技术筛选出有效干扰片段；然后构建TGF-β1 siRNA腺病毒载体，体外转染新生鼠肺成纤维细胞，半定量PCR检测体外转染后TGF—β1基因的抑制效果，确定其最佳干预剂量及维持时间。结果（1）化学合成siRNA抑制TGF-β1基因表达的效果：siRNA剂量为20pmol，转染后24h检测抑制效果，第2、3、4条siRNA均有不同效果，其中第3条siRNA抑制效率〉70％；（2）TGF—β1 siRNA腺病毒载体转染细胞，观察20、50μl不同剂量转染后24h抑制情况，并与20μl阴性和空白对照比较，结果显示20、50μl均有明显抑制效果；观察转染后24、48、72h的抑制效果，比较显示转染后24h有明显抑制效果，72h抑制效果最强，说明随着转染时间延长，抑制作用越明显。结论TGF—β1 siRNA腺病毒载体体外转染新生鼠肺成纤维细胞对TGF-β1的表达均有明显抑制效果。
- 王玲朱翠平吕回
- 关键词：小分子干扰转化生长因子Β
- 地塞米松对新生鼠高氧肺损伤肺组织甲状腺转录因子-1和表面活性蛋白C表达的影响
- 2007年
- 目的探讨甲状腺转录因子-1(TTF-1)和表面活性蛋白C(SPC)在地塞米松干预新生鼠高氧肺损伤中的作用。方法将3日龄新生SD大鼠随机分为高氧组(95%氧7 d)、高氧+地塞米松组(地塞米松组)和空气组。HE染色观察肺组织形态结构变化,并做辐射状肺泡计数(RAC)。采用免疫组化法检测肺组织TTF-1和SPC表达。结果(1)高氧组可见肺泡壁较薄、结构简单化、肺泡大小不均,有些肺泡融合、体积增大;地塞米松组除具有上述高氧组特征外,肺组织结构明显紊乱,部分肺泡壁及间隔破坏;高氧组和地塞米松组RAC值分别为(9.50±1.05)、(10.03±3.26),较空气组(13.00±1.79)减少,差异均有显著性(P<0.05)。(2)空气组TTF-1阳性显色细胞分布在肺间隔和肺泡壁II型肺泡上皮细胞(AECII),无扩张肺组织处也有阳性细胞,各级支气管及小血管部位未见阳性显色。高氧组较空气组表达减少,散在分布于肺泡壁、肺间隔增厚部位及脱落于肺泡腔的AECII;地塞米松组较空气组明显增强,变薄及扩张的肺泡壁也有阳性显色。空气组、高氧组、地塞米松组TTF-1表达积分分别为(1.32±0.55)、(0.96±0.67)、(1.76±0.69),高氧组较地塞米松组和空气组明显减少,差异有显著性(P均<0.05);而地塞米松组较空气组明显增高,差异有显著性(P<0.05)。(3)SPC阳性显色主要在肺间隔和肺泡壁AECII,支气管黏膜上皮细胞也可见弱阳性表达,但存在个体差异,有些标本整个切片未见表达。高氧组、地塞米松组和空气组SPC表达积分差异无显著性,分别为(1.58±0.49)、(1.52±0.50)、(1.66±0.48),P>0.05。结论(1)SPC不仅在AECII表达,也表达在支气管黏膜上皮细胞;在高氧肺损伤及地塞米松干预肺组织SPC表达变化不大,有可能是AECII增殖、分化不足的反映。(2)高氧肺损伤组织TTF-1表达减少,地塞米松可使TTF-1表达增强,加重肺部病理改变。
- 朱翠平吕回严建江李秋平陶少华封志纯
- 关键词：地塞米松新生鼠高氧肺损伤肺组织甲状腺转录因子-1
- 5溴脱氧尿苷和端粒酶逆转录酶标记肺干细胞在新生鼠高氧肺损伤中的作用被引量：7
- 2006年
- 目的探讨5溴脱氧尿苷(bromodeoxyuridine,Brdu)和端粒酶逆转录酶(tolomerase re verse transeriptase,TERT)标记肺干细胞特点及其在肺发育和损伤修复中的作用。方法 95％左右氧气7 d制备新生鼠高氧肺损伤模型;将Brdu自腹腔注入模型鼠,免疫组化法检测Brdu和TERT阳性显色细胞,并和表面蛋白C(surfactant protein C,SPC)抗体免疫双染。结果 (1)Brdu阳性显色部位主要在各级支气管黏膜下和肺间隔,支气管黏膜上皮及肺泡壁有散在分布,阳性细胞数量较少,多呈立方形、核大;TERT阳性显色在外周肺组织,肺间隔和肺泡壁部位,数量明显少于Brdu,且阳性显色呈不对称性,即多集中在某一肺叶;(2)SPC阳性显色细胞在肺间隔和肺泡壁,分别和Brdu、TERT双染,可见少量阳性细胞;(3)Brdu、TERT和SPC表达积分在高氧组与正常氧组差异无统计学意义(P>0．05)。 Brdu表达积分无论在高氧组(1．61±0．83)还是正常氧组(1．43±0．85),均高于TERT(分别为0.83± 0．84和0.62±0．55,P<0．05)。结论 Brdu和TERT作为肺干细胞标记,两者各有其特征;肺损伤时Brdu和TERT标记阳性细胞量可提示肺干细胞增殖分化及肺泡Ⅱ型上皮细胞损伤修复情况。至于 Brdu和TERT哪一个指标更具特异性,是否Brdu同时标记了已从干细胞增殖分化但尚保留干细胞特征的短暂扩增细胞,或TERT更能反映干细胞特征尚待深入研究。
- 朱翠平杜江封志纯
- 关键词：高氧症干细胞溴脱氧尿苷
- 降钙素原在儿童细菌感染性疾病中的应用被引量：30
- 2012年
- 降钙素原（PCT）作为新型的感染指标,近年来受到越来越多的关注。研究发现PCT能早期鉴别细菌与非细菌性感染,评估病情、指导用药,是小儿细菌感染性疾病理想的生物指标。笔者就其在儿科中的应用做一综述,为提高患儿的救治率提供帮助。感染性疾病是小儿常见性疾病,有着不同于成人的特点：疾病早期临床表现不典型,病情变化快,实验室检查尚未出结果病情就发生恶化,丧失治疗的最佳时机。
- 彭宝玲朱翠平万根平
- 关键词：降钙素原儿童
- 地塞米松对新生鼠高氧肺损伤的作用机制探讨被引量：3
- 2006年
- 【目的】探讨地塞米松在新生鼠高氧肺损伤中的作用及其作用机制，为临床合理用药提供参考。【方法】将3dSD新生鼠随机分为高氧（95％左右氧7d）、高氧＋地塞米松和空气氧组；HE染色观察肺组织形态结构，做辐射状肺泡计数（radical alveoli courlt。RAC）；免疫组化检测TGF-β1表达。【结果】①高氧组可见肺泡壁较薄、结构简单化、肺泡大小不均。有些肺泡融合、体积增加，地塞米松组除具有上述高氧组特征外，肺组织结构明显紊乱。部分肺泡壁及间隔破坏;高氧组（9．50±1.05）和地塞米松组（10．03±3．26）RAC值较正常组（13．00±1．79）减少（P均〈0．05）。②TGF—β1免疫组化阳性细胞主要分布在肺间隔，较厚肺泡壁也有散在分布正常组表达较少。散在分布，偶见靠近支气管部位的集中显色；高氧组阳性细胞明显增多。可见明显集聚，地塞米松组阳性显色也明显多于正常组，但多为散在分布。高氧组、地塞米松组和正常组表达积分分别为1．76±0．66、1．62±0．60和1．28±0．64，两组均高于正常组（P值均〈0．05）。【结论】新生鼠3～10d暴褥于高氧环境（95％），可使肺组织TGF—β1表达明显增高，导致肺泡化停滞，地塞米松可加重这一病理改变。
- 朱翠平杜江封志纯
- 关键词：高浓度氧肺损伤TGF-Β地塞米松
- 角化细胞生长因子在地塞米松干预高氧新生鼠肺组织的表达被引量：3
- 2006年
- 目的 探讨角化细胞生长因子（keratinocyte growth factor，KGF）在高氧新生鼠以及地塞米松干预肺组织的表达与作用。方法 将3dSD新生鼠随机分为高氧组（95％氧）、高氧＋地塞米松（简称地塞米松组）和正常组；HE染色观察肺组织形态结构，做辐射状肺泡计数；免疫组化检测KGF表达。结果 （1）高氧组可见肺泡壁较薄、结构简单化、肺泡大小不均，有些肺泡融合、体积增加，地塞米松组除具有上述高氧组特征外，肺组织结构明显紊乱，部分肺泡壁及间隔破坏；高氧组（9．50±1．05）和地塞米松组（10．03±3．25）辐射状肺泡计数值较正常组（13．00±1．79）减少（P均〈0.05）。（2）KGF阳性细胞显色部位在胞浆，显色细胞呈圆形，阳性细胞分布在肺间隔，肺泡周围呈散在分布，靠近支气管处阳性细胞较为集中，有些密集分布。各级支气管及小血管部位未见阳性显色。高氧组和地塞米松组肺组织除了较厚肺间隔偶见散在数个细胞显色外，整个肺组织几乎见不到阳性细胞。结论 新生鼠3～10d暴露于高氧环境（95％），可导致肺泡化停滞，肺组织KGF表达被抑制，地塞米松可加重肺部病理改变，KGF表达抑制可能是导致高氧肺发育阻滞的重要因素。
- 朱翠平杜江封志纯
- 关键词：高氧症成纤维细胞生长因子
- 致死性高浓度氧对新生鼠发育和肺损伤的影响被引量：5
- 2006年
- 目的探讨致死浓度氧(95%)与新生鼠肺发育及损伤的关系,建立支气管肺发育不良动物模型。方法将3dSD新生鼠随机分为高氧(95%)和空气氧组,并和成年鼠对照,观察记录体质量、身长;HE染色观察肺组织形态结构,做辐射状肺泡计数(RAC)。结果(1)高氧新生鼠和成年鼠死亡率分别为12.5%、35.2%,与正常空气氧组比较,新生鼠体质量(18.02±0.68vs13.24±0.59)和身长(8.83±0.25vs6.76±0.51)增长明显减少(P<0.05)。(2)高氧新生鼠RAC值为9.50±1.05,较正常同日龄新生鼠(13.00±1.79)明显减少(P<0.05),高氧成年鼠RAC值(12.67±2.25)比高氧新生鼠为高(P<0.05),跟正常空气组新生鼠差异不明显(P>0.05)。(3)10d新生鼠肺结构已接近成年鼠肺,高氧组新生大鼠可见肺泡壁较薄、结构简单化、数目明显减少,肺泡大小不均,有些肺泡融合、体积增加,部分间隔细胞增多,小血管扩张、充血;成年鼠高氧组肺间质水肿、肺间隔增厚、肺泡腔缩小,肺间隔伊红显色强度增强,肺泡腔内出现红细胞、巨噬细胞及脱落的肺上皮细胞。结论新生大鼠暴露于92%￣95%氧7d可致生长障碍和肺泡化阻滞,出现类似早产儿支气管肺发育不良的肺组织形态特征。
- 朱翠平杜江李秋平封志纯
- 关键词：高浓度氧肺损伤发育
