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国家自然科学基金(30972992)
作品数:
2
被引量:43
H指数:1
相关作者:
蔡志明
桂耀庭
崔光辉
郭新
秦洁
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相关机构:
北京大学深圳医院
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机构
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作者
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蔡志明
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漆正宇
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张艳敏
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郭新
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崔光辉
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桂耀庭
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中华男科学杂...
1篇
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2011
1篇
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Stra8基因启动子逆转录病毒包装细胞株的建立
2011年
目的建立小鼠Stra8基因启动子控制绿色荧光蛋白EGFP表达(Pstra8-EGFP)的逆转录病毒包装细胞株,以方便地将Pstra8-EGFP转导到目的细胞,为生殖细胞鉴定分选提供基础。方法PCR扩增小鼠基因组DNA中的Stra8基因启动子片段,构建Stra8基因启动子控制表达的EGFP报告基因逆转录病毒质粒。将质粒脂质体法转染PT67病毒包装细胞,G418抗性筛选后,梯度稀释法将包装细胞单克隆化并扩增成多个细胞株。以包装细胞培养上清液感染NIH3T3细胞的所形成的G418抗性阳性细胞数定义病毒滴度,确定高滴度病毒包装细胞株。通过染毒小鼠骨髓间充质干细胞(mouse bone marrow mesenchymal stemcells,MSCs)验证该细胞株的Pstras8-EGFP转导效果。结果所建立的病毒包装细胞株培养上清液滴度达到1.3×10^6 cfu/ml。MSC经包装细胞培养上清液感染后,在(retinoicacid,RA)诱导下能表达EGFP蛋白。结论成功构建了将Pstras.EGFP转导到目的细胞的PT67逆转录病毒包装细胞株。
漆正宇
崔光辉
郭新
秦洁
张艳敏
桂耀庭
蔡志明
关键词:
视黄酸
间充质干细胞
生殖细胞
Y染色体及其微缺失与男性不育:过去、现在与将来
被引量:43
2010年
由遗传缺陷所引起的精子发生障碍是男性不育的一个重要病因。一直以来,Y染色体被认为缺乏重要的功能基因。直到睾丸决定基因的发现,Y染色体的研究才重新得到重视。Y染色体的成功测序揭开了Y染色体的真实结构和Y染色体微缺失的分子基础。在Y染色体上的220个基因中,位于AZF区的16个编码基因或基因家族与男性生殖与发育相关。至今,在Y染色体AZF区已发现至少12种缺失。Y染色体上大量的同源序列与回文结构所致非等位的同源性重组是Y染色体微缺失发生的分子基础。Y染色体微缺失是已知的导致男性不育的最主要的分子遗传病因,临床上常使用PCR扩增Y染色体特异的序列标记位点来进行检测。基因组学时代的到来为男性不育的研究带来革命性的工具与方法,有利于加深对Y染色体缺失发生机制的了解,进一步明确Y染色体基因的功能以及相互之间的联系,为基因治疗奠定基础。
蔡志明
关键词:
Y染色体
男性不育
无精子因子
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