国家自然科学基金(30772172)
- 作品数：6 被引量：26H指数：4
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- 相关机构：华中科技大学湘西自治州人民医院更多>>
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- 相关领域：医药卫生更多>>
- 人胆囊癌CD133^+细胞亚群致瘤性的实验研究被引量：5
- 2010年
- 目的:研究CD133在人胆囊癌细胞中的表达,初步探讨胆囊癌CD133+亚群的致瘤能力。方法:将人原代胆囊癌组织植入裸鼠皮下形成移植瘤,并同人原代胆囊癌组织分别制成单细胞悬液;FCM法检测CD133的表达情况,并分选出CD133+和CD133-亚群;对不同亚群细胞进行体外克隆形成实验和裸鼠体内移植瘤形成实验,免疫组织化学法验证移植瘤的组织表型。结果:FCM法检测显示,胆囊癌细胞中1.95%~3.24%的细胞CD133呈阳性表达;体外培养显示CD133+亚群比CD133-亚群具有更强的克隆球形成能力,在裸鼠体内也具有更强的肿瘤形成能力(P<0.05);免疫组织化学检测结果提示,胆囊癌CD133+细胞形成的移植瘤同人原代胆囊癌具有相同的组织表型,均表达CA19-9和CD44 s。结论:人胆囊癌CD133+细胞亚群具有高致瘤性,其中可能富含有肿瘤干细胞。
- 石程剑秦仁义石秀春田锐王敏宫伟强
- 关键词：胆囊癌组织亚群单细胞悬液
- 肿瘤干细胞标记物CD24、CD44、ESA和CD34在胆道肿瘤中的表达被引量：7
- 2009年
- 目的观察肿瘤干细胞标记物CD24、CD44、ESA和CD34在胆道肿瘤中的表达，初步明确其能否用于胆道肿瘤干细胞的分选。方法运用组织化学和流式细胞术裣测CD24、CD44、ESA和CD34在人胆道肿瘤细胞株和组织中的表达率。结果CD24、CD44和ESA在人胆管癌和胆囊癌细胞株及组织中均有表达，胆管癌细胞株QBC939和胆囊癌细胞株GBC—SD中CD24＋CD44＋ESA＋平均表达率分别为86．1％和92．7％，人胆管癌和胆囊癌组织标本CD24＋CD44＋ESA＋表达率为0．62％和0．83％；而CD34在胆管癌和胆囊癌细胞及组织中均无表达。结论CD24、CD44和ESA是人胰腺癌干细胞和人乳腺癌干细胞表面标记物，其在人胆管癌和胆囊癌中的表达率和以上两者肿瘤干细胞的分选比例十分相似，有可能是胆道肿瘤干细胞表面标记物。
- 王敏秦仁义申铭江建新胡均杜志勇石程剑
- 关键词：肿瘤干细胞胆道肿瘤标记物
- 人胰腺癌干细胞差异性基因的表达被引量：5
- 2009年
- 目的分选、鉴定人胰腺癌干细胞，运用基因芯片技术分析其差异性基因的表达。方法运用流式分选技术分选胰腺癌干细胞（CD24^＋CD44^＋ESA^＋），NOD／SCID鼠移植瘤试验进行肿瘤干细胞特性鉴定。采用Affymetrix U133 plus2．0人类全基因组表达谱芯片对胰腺癌干细胞和非干细胞进行差异基因筛选。结果分选得到人胰腺癌CD24^＋CD44^＋ESA^＋亚群细胞，占所有细胞的0．8％；5×10’个CD24^＋CD44^＋ESA^＋细胞就能成瘤（2／4），而阴性细胞1×10’才能成瘤（1／4）；CD24^＋CD44^＋ESA^＋具有一定的自我更新和分化能力。基因芯片杂交获得6553（11．99％）条差异基因，胰腺癌干细胞中5255（9．61％）条上调表达，1298（2．37％）条下调表达。其中差异基因涉及细胞凋亡、细胞周期、代谢、细胞线粒体结构和耐药等多个方面。结论胰腺癌干细胞具有自身特征性基因表达谱，为进一步从干细胞层面研究胰腺癌发病机制及靶向治疗奠定基础。
- 黄焕军王敏秦仁义申铭江建新朱峰田锐
- 关键词：胰腺癌干细胞基因芯片
- 人胆管癌CD24＋ CD44＋ EpCAMhigh细胞亚群的分选及其肿瘤干细胞样特性的鉴定被引量：3
- 2010年
- 目的 检测及分选人胆管癌中的CD24＋ CD44＋ EpCAMhigh细胞亚群,探讨其是否具有肿瘤干细胞样生物学特性.方法 流式细胞术检测6例人胆管癌中CD24、CD44、EpCAM的表达率 取2例人胆管癌新鲜标本种植到NOD/SCID鼠皮下,建立荷人胆管癌小鼠模型.流式细胞术分选CD24＋ CD44＋ EpCAMhigh亚群细胞,NOD/SCID鼠移植瘤试验鉴定其成瘤和分化能力.结果 6例人胆管癌组织标本和2例移植瘤中,CD24＋ CD44＋ EpCAMhigh在人胆管癌中表达率为0.58%～2.43%（平均值0.94%）.运用NOD/SCID鼠移植瘤模型,分选得到CD24＋ CD44＋ EpCAMhigh亚群细胞.NOD/SCID鼠移植瘤试验,1×103个CD24＋ CD44＋ EpCAMhigh细胞能成瘤（3/8）,而CD24- CD44- EpCAMlow/-细胞在5×104才能成瘤（1/8）.CD24＋ CD44＋ EpCAMhigh胆管癌细胞NOD/SCID鼠移植瘤的组织类型及标记物的表达率和原代肿瘤相似.结论 人胆管癌中含有CD24＋ CD44＋ EpCAMhigh细胞亚群,具有强成瘤能力、自我更新和分化的能力,可能是胆管癌干细胞.
- 朱峰王敏秦仁义申铭王欣田锐江建新石程剑
- 关键词：胆管癌肿瘤干细胞
- 人胰腺癌干细胞对吉西他滨的敏感性及其分子机制研究被引量：4
- 2010年
- 目的检测人胰腺癌干细胞对吉西他滨的敏感性,分析其差异性基因的表达,初步阐明其耐药分子机制。方法运用流式技术从人原代胰腺癌和细胞系SW1990中分选CD24+CD44+ESA+细胞,行NOD/SCID鼠移植瘤实验验证其肿瘤干细胞特性;运用吉西他滨进行体内、外干预,检测胰腺癌干细胞凋亡和表达率变化情况。采用人类全基因组表达谱AffymetrixU133plus2.0芯片对胰腺癌干细胞和非干细胞进行差异基因筛选。结果人原代胰腺癌和细胞系SW1990中分选到CD24+CD44+ESA+(0.8%)和CD24+CD44+(3.6%)细胞,移植瘤实验证实其为胰腺癌干细胞。肿瘤干细胞凋亡率及表达率检测提示胰腺癌干细胞对吉西他滨显著耐药。与胰腺癌非干细胞比对,基因表达谱芯片筛查到胰腺癌干细胞820条差异基因,其中上调表达281个,下调表达539个。结论胰腺癌干细胞对吉西他滨耐药,具有特征性基因表达谱,为阐明胰腺癌多药耐药机制及靶向治疗奠定基础。
- 朱峰王敏秦仁义申铭王欣田锐张志发石程剑
- 关键词：胰腺癌肿瘤干细胞基因芯片多药耐药
- EGFR及ADAM9在胰腺癌干细胞与分化细胞中的表达及意义被引量：4
- 2011年
- 目的 通过微球体培养富集胰腺癌干细胞,检测其表皮生长因子受体（EGFR）和去整合素-金属蛋白酶9（ADAM9）的表达,并探讨其意义.方法 运用无血清条件培养基悬浮培养胰腺癌PANC1细胞,并连续传代培养.将部分微球体接种于含血清及胶原底物的培养基中进行分化诱导.收集微球体细胞及分化细胞,流式细胞仪检测侧群（SP）细胞比例;实时PCR及蛋白质印迹法检测细胞EGFR、ADAM9 mRNA和蛋白的表达.结果 成功培养出胰腺癌PANC1细胞微球体,并能在体外连续传代.微球体细胞分化诱导后能重新贴壁生长.微球体细胞和分化细胞中SP细胞比例分别为（5.40±0.38）%和（2.80±0.42）%,两者差异具有统计学意义（P＜0.05）.微球体细胞与分化细胞相比,EGFR及ADAM9 mRNA表达分别上调约2.5和3.0倍（P＜0.05）;微球体细胞EGFR及ADAM9蛋白相对表达量分别为0.90±0.09和0.64±0.07,显著高于分化细胞的0.62±0.11和0.48±0.09（P＜0.05）.结论 微球体培养能富集胰腺癌干细胞,ADAM9可能通过EGFR信号通路在胰腺癌的发生、发展中起重要作用.
- 洪晓泉林凡王敏王欣秦仁义
- 关键词：胰腺肿瘤干细胞
