国家科技重大专项(2014ZX09201022-006)
- 作品数：9 被引量：48H指数：5
- 相关作者：陈曦陈哲路娟柴瑞平李琳更多>>
- 相关机构：中国医学科学院北京协和医学院山东中医药大学黑龙江中医药大学更多>>
- 发文基金：国家科技重大专项国家自然科学基金北京市自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 柱前衍生RP-HPLC法同时测定珐菲亚中14种水解氨基酸被引量：3
- 2017年
- 目的建立柱前衍生反相高效液相色谱法同时测定珐菲亚中14种水解氨基酸含量的方法。方法采用Waters XBridge Shield RP_(18)色谱柱(4.6mm×250mm,5μm),异硫氰酸苯酯为柱前衍生化试剂,梯度洗脱,流速0.8ml/min,检测波长254nm,柱温25℃。结果 14种氨基酸在一定浓度范围内呈良好的线性关系,相关系数r值均>0.999 0,加样回收率(n=6)为90.2%~105.1%,氨基酸衍生溶液在24h内稳定。结论本实验建立的方法可靠,可用于珐菲亚中氨基酸的含量测定。
- 陈哲路娟彭纪铭柴瑞平陈曦
- 关键词：柱前衍生反相高效液相色谱法氨基酸异硫氰酸苯酯
- 虾原肌球蛋白及其IgE单克隆抗体建立I型过敏反应体内外模型被引量：4
- 2016年
- 目的利用虾原肌球蛋白及其Ig E单克隆抗体建立I型过敏反应体内外模型。方法采用等电点沉淀法制备刀额新对虾原肌球蛋白,利用杂交瘤技术制备抗虾原肌球蛋白Ig E单克隆抗体。建立虾原肌球蛋白攻击Ig E单抗致敏的RBL-2H3细胞模型,测定β-氨基己糖苷酶释放量。利用虾原肌球蛋白及其Ig E单抗建立被动全身过敏反应小鼠模型,监测抗原攻击后30 min内肛温的变化。结果 Ig E单抗致敏的RBL-2H3细胞在虾原肌球蛋白攻击后发生脱颗粒,β-氨基己糖苷酶释放量明显增加。虾原肌球蛋白及其Ig E单抗诱导了小鼠被动全身过敏反应,抗原攻击后小鼠肛温平均下降约1.44℃。结论虾原肌球蛋白及其Ig E单克隆抗体成功建立了I型过敏反应体内外模型。
- 方蕾侯睿费巧玲高源刘芬蔡润兰齐云
- 关键词：原肌球蛋白刀额新对虾免疫球蛋白ERBL-2H3细胞
- 多波长检测UPLC法测定地锦草中鞣花酸等4种指标性成分的含量被引量：6
- 2017年
- 目的:建立多波长同时测定地锦草药材中没食子酸、鞣花酸、槲皮素、山柰酚4种指标成分含量的超高效液相色谱法,并比较不同地锦草化学成分的差异。方法:采用Acquity UPLC BEH C_(18)色谱柱(50 mm×2.1 mm,1.7μm),以乙腈-0.2%磷酸水溶液为流动相,梯度洗脱,柱温30℃,流速0.2 mL·min^(-1),检测波长为271 nm(0~2 min)、254 nm(2~6 min)和360 nm(6~8 min)。结果:地锦草中没食子酸、鞣花酸、槲皮素、山柰酚4种成分在8 min内均达到基线分离,线性范围分别为65.88~164.70(R^2=0.999 2)、149.10~372.75(R^2=0.999 2)、27.48~68.70(R^2=0.999 7)、30.24~75.60μg·mL^(-1)(R^2=0.999 2),平均回收率(n=6)分别为99.5%(RSD=1.4%)、98.3%(RSD=0.92%)、99.1%(RSD=1.2%)和99.3%(RSD=1.4%);6批地锦草样品中没食子酸、鞣花酸、槲皮素、山柰酚的含量分别为4.148~7.663、9.727~17.388、1.763~2.977、0.684~2.037 mg·g^(-1)。结论:本文对不同产地地锦草中指标性成分含量差异性的研究,可为地锦草的质量控制提供理论依据。
- 彭纪铭路娟陈哲王同瑾李伟陈曦
- 关键词：地锦草鞣花酸山柰酚超高效液相色谱法
- 一种以虾原肌球蛋白为致敏原的Th2反应小鼠模型的建立被引量：7
- 2017年
- 目的:采用虾原肌球蛋白为致敏原建立Th2反应小鼠模型。方法:虾原肌球蛋白腹腔注射小鼠6周诱导Th2反应,ELISA测定小鼠血清总IgE、sI gE和sI gG水平、脾淋巴细胞分泌Th1和Th2细胞因子的含量,采用流式细胞术检测血液中嗜碱性粒细胞的活化。结果:与对照组比较,致敏6周的小鼠血清总IgE、sI gE和sI gG(sI gG 1、sI gG 2a和sI gG 2b)均显著升高;脾淋巴细胞在抗原刺激后分泌Th2细胞因子(IL-4、IL-5、IL-10和IL-13)增加,而Th1细胞因子INF-γ则出现明显降低;血液中嗜碱性粒细胞表面标志物CD200R和CD41表达增强。结论:成功建立一种以虾原肌球蛋白为致敏原的Th2反应小鼠模型。
- 方蕾侯睿费巧玲高源蔡润兰齐云
- 关键词：TH2反应嗜碱性粒细胞IGE
- Box-Behnken设计-效应面法优化紫檀茋纳米混悬剂处方被引量：2
- 2017年
- 目的:对紫檀茋纳米混悬剂的处方及制备工艺进行优化。方法:采用反溶剂沉淀法制备紫檀茋纳米混悬剂,以粒径、多分散系数(PDI)作为评价指标,采用Box-Behnken效应面法优化紫檀茋纳米混悬剂的处方,并对处方加以验证。结果:通过软件对实验数据进行模型拟合,用响应面法预测最佳处方,所得处方为:紫檀茋的浓度为36 g/L,pluronic F68浓度为2.2 g/L,牛磺胆酸钠的浓度为3.0 g/L。验证实验得到的紫檀茋纳米混悬剂粒径为(134.6±2.5)nm,PDI为(0.097±0.006)。体外溶出结果表明,紫檀茋的纳米化促进了其溶出速度。扫描电镜观察紫檀茋原料药及紫檀茋纳米混悬剂形态,可见紫檀茋纳米混悬剂呈类球状,且分布均匀。结论:Box-Behnken效应面法能够有效地优化紫檀茋纳米混悬剂处方,方法具有可行性。
- 陈哲路娟彭纪铭柴瑞平赵颖王晓静陈曦
- 关键词：效应面法纳米混悬剂
- 平痤洗剂皮肤刺激和过敏性实验研究被引量：9
- 2016年
- 目的观察平痤洗剂外用对动物皮肤的刺激性和过敏性反应。方法皮肤刺激反应实验选用新西兰大耳白家兔,分为完整皮肤组和破损皮肤组,2组分别在背部两侧的脱毛处涂以蒸馏水和平痤洗剂,观察皮肤的刺激反应并进行评分。皮肤过敏反应实验选用白色豚鼠,分为蒸馏水组、平痤洗剂组和阳性对照组,分别在背部脱毛处涂以蒸馏水、平痤洗剂和2,4-二硝基氯苯,观察皮肤过敏反应并进行评分。结果平痤洗剂对家兔完整皮肤无刺激性作用,豚鼠皮肤无过敏反应。结论平痤洗剂外用具有较高的安全性。
- 李彦林周云丰李琳王丽丽陈曦许扬
- 关键词：皮肤刺激性皮肤过敏性动物实验
- 双黄连注射液及其中间品对RBL-2H3细胞增殖的影响被引量：2
- 2016年
- 目的:探讨双黄连注射液(SHLI)及其中间品(金银花连翘提取物、黄芩提取物)不同浓度对白血病细胞株RBL-2H3增殖和形态的影响,为类过敏细胞模型的建立及药品质量的监控提供实验依据。方法:将双黄连注射液以体积比1∶16为初始浓度,按2倍梯度稀释至1∶4 096,中间品分别以体积比1∶8为初始浓度,按2倍梯度稀释至1∶2 048,作为受试样品。以各受试样品分别孵育RBL-2H3细胞,观察细胞形态变化。应用噻唑蓝(MTT)比色法测定各组RBL-2H3细胞增殖活力,并计算细胞增殖的半数抑制浓度(IC50)。根据IC50设置不同给药浓度,观察SHLI对RBL-2H3细胞凋亡的影响。结果:随着给药浓度的升高,SHLI及其中间品对细胞增殖的抑制作用逐渐增强,细胞存活力明显降低。给药后随着药物浓度的升高,细胞损伤逐渐加重,形态发生明显变化。高浓度SHLI可引起RBL-2H3细胞凋亡。结论:SHLI可抑制RBL-2H3细胞增殖活力,为SHLI类过敏细胞模型的建立,评价SHLI及中间品的安全性及药物质量控制提供依据。
- 李彦林周云丰李琳许扬
- 关键词：双黄连注射液RBL-2H3细胞增殖
- 密蒙花中4个化合物含量的多波长高效液相色谱法测定被引量：5
- 2017年
- 目的建立HPLC多波长法测定密蒙花中4个化合物(毛蕊花糖苷、蒙花苷、木犀草素、芹菜素)的含量,为密蒙花药材质量标准的建立提供参考。同时对不同产地密蒙花进行比较研究。方法采用高效液相色谱法,使用Waters Symmetry Columns(4.6mm×250mm,5 um)色谱柱,以甲醇(A)-0.1%磷酸水(B)为流动相,梯度洗脱(0-5min,5%A→40%A;5-15 min,40%A→50%A;15-20 min,50%A→63%A;20-35 min,63%A→100%A),流速0.8 ml·min^(-1),330nm(毛蕊花糖苷、蒙花苷),350nm(木犀草素),338nm(芹菜素),柱温25℃。结果在所建立色谱条件下各成分的专属性良好,无干扰峰;线性关系良好,均在0.9990以上;回收率在93.34%~104.69%,RSD均小于2%,回收率符合要求。测得6产地毛蕊花糖苷、蒙花苷、木犀草素、芹菜素的含量分别为0.3018~1.5269,2.0274~3.2220,0.0536~0.1214,0.3175~0.5590mg/g。结论经方法学验证,该法可在同一色谱条件下利用不同检测窗口实现多类组分及多个成分的同时测定。
- 王晓静路娟彭纪铭陈哲柴瑞平赵颖李伟陈曦
- 关键词：毛蕊花糖苷蒙花苷木犀草素芹菜素
- 逍遥散对肝纤维化大鼠模型抗纤维化作用及其机制研究被引量：13
- 2014年
- 目的研究逍遥散对四氯化碳(CCl4)致大鼠肝纤维化的干预作用机制。方法将30只大鼠随机分为空白对照组、模型组、逍遥散组。除空白对照组外,均采用皮下注射CCl4橄榄油溶液制备肝纤维化模型,逍遥散组同时灌胃给予逍遥散水煎液。检测大鼠肝匀浆中超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)以及血清中丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天门冬氨酸氨基转移酶(AST)、白蛋白(ALB)、总蛋白(TP)、总胆红素(TBIL)、转化生长因子β1(TGF-β1)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)、人基质金属蛋白酶组织抑制因子-1(TIMP-1)、血小板衍生生长因子(PDGF)、白介素6(IL-6)、透明质酸(HA)、层粘蛋白(LN)、Ⅲ型前胶原(PCⅢ)、Ⅳ型胶原(C-Ⅳ)的含量,并进行肝组织病理学检查。结果与模型组比较,逍遥散能显著降低MDA、ALT、AST、TBIL、TGF-β1、TNF-α、TIMP-1、PDGF、IL-6、HA、LN、PCⅢ、C-Ⅳ水平(P<0.05,P<0.01),明显升高SOD、ALB、TP水平(P<0.05,P<0.01)。组织病理检查显示,逍遥散能减轻肝细胞变性、坏死、炎性浸润,促进肝细胞再生。结论逍遥散具有抗肝纤维化的作用,其作用机制可能是抑制胶原纤维蛋白的合成与分泌,清除自由基,减少脂质过氧化,促进肝细胞再生,加快肝细胞修复。
- 陈曦牟璐璐陈丹丹张春胜刘海洋李绍民张宁
- 关键词：逍遥散四氯化碳肝纤维化
