国家自然科学基金(30571911)
- 作品数：7 被引量：15H指数：3
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- 体外诱导大鼠骨髓间充质干细胞向GABA能神经元分化被引量：3
- 2009年
- 目的研究骨髓间充质干细胞(BMSCs)在体外向γ-氨基丁酸(GABA)能神经元方向的分化。方法大鼠股骨骨髓分离出BMSCs,培养传代,通过10%胎牛血清(FBS)、20 ng/ml表皮生长因子(EGF)和改良Eagle培养基(DMEM/F12)预诱导24 h,随之加入含10 ng/ml碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)、10 ng/ml骨形成蛋白-2(BMP-2)和10 ng/ml脑源性神经营养因子(BDNF)作用48 h后,再以10μmol/L全反式维甲酸(ATRA)培养48 h,最后用40 mmol/L KCl刺激15 min完成诱导分化。对照组用10%FBS和DMEM/F12培养不添加任何诱导因子。形态学观察和Western blot对分化后的细胞进行鉴定分析。结果实验组细胞在形态学上表现出典型的神经元样细胞形态,对照组无明显变化;Western blot分析知实验组Ⅰ和实验组Ⅱ都有分化为GABA能神经元的趋势,但实验组Ⅱ的分化率高于实验组Ⅰ。结论BMSCs可在体外分化为GABA能神经元。
- 龙乾发刘卫平玉石刘阳韩蕊王孝安李娟
- 关键词：骨髓间充质干细胞Γ-氨基丁酸能神经元
- 细胞外钾离子对小鼠神经干细胞凋亡的影响被引量：4
- 2008年
- 目的探讨细胞外钾离子对体外培养神经干细胞增殖活性及凋亡的影响。方法无血清悬浮培养方法分离培养神经干细胞,取第3~5代培养细胞随机分为对照组,低、中、高浓度氯化钾组,利用MTT法检测不同浓度氯化钾对细胞活性的影响,通过Western Blot检测Caspase-3表达和原位末端标记(TUNEL)技术分析各组细胞凋亡上的差异。结果干预24 h后,各试验组细胞增殖活性均降低,且与对照组相比有统计学差异(P<0.01),高浓度氯化钾作用下TUNEL阳性细胞率为27.3%,显著高于对照组7.0%(P<0.01),而低浓度氯化钾和中等浓度氯化钾作用后TUNEL阳性细胞率分别为4.8%和5.4%,与对照组无显著升高(P>0.05),且高浓度氯化钾可以上调Caspase-3表达增加。结论提高细胞外钾离子可以抑制神经干细胞增殖,且高浓度钾离子可以诱导神经干细胞的凋亡。
- 王轩刘卫平章翔姬西团甄海宁庞海峰
- 关键词：钾离子神经干细胞细胞凋亡细胞增殖
- 葡萄糖浓度对原代培养神经干细胞增殖、分化的影响被引量：3
- 2007年
- 目的探讨不同浓度葡萄糖对神经干细胞增殖、分化的影响。方法胚胎小鼠脑细胞原代培养并鉴定。生理浓度和高浓度葡萄糖培养及诱导分化后,四唑盐比色(MTT)法及免疫荧光法观察两组不同葡萄糖浓度对神经干细胞增殖、分化的影响。结果原代培养的神经球表达巢蛋白(nestin),神经球分化的细胞表达神经丝200(NF200)和胶质纤维酸性蛋白(GFAP)。与生理浓度葡萄糖相比,高浓度葡萄糖降低了神经干细胞的增殖活力;分化3 d后,高糖组的NF200阳性细胞和GFAP阳性细胞比例高于生理浓度组(P<0.01),而nestin阳性细胞比例则反之(P<0.01);分化10 d后,神经干细胞完全分化,免疫荧光检测发现生理浓度葡萄糖提高了NF200阳性细胞比例。结论高糖损害了神经干细胞的增殖活性,加速了神经干细胞的早期分化,降低了神经元的分化率。
- 刘卫平王剑博姬西团侯俊峰王鹏
- 关键词：神经干细胞葡萄糖增殖分化
- 细胞移植治疗脑外伤的研究进展
- 2009年
- 玉石刘卫平章翔甄海宁王轩
- 关键词：脑外伤细胞移植
- 青霉素与海人酸癫痫模型的比较被引量：1
- 2008年
- 目的通过用青霉素、海人酸2种药物制作癫痫模型，探讨2种致痫剂的作用特点及应用条件。方法取健康雄性昆明小鼠90只，分为3组，对照组（n=10）、青霉素致痫组（n=40）和海人酸致痫组（n=40），青霉素致痫组腹腔注射青霉素7×10^6U／kg，海人酸致痫组腹腔注射海人酸10mg／kg，生理盐水组腹腔注射生理盐水35μ/Lg。注射后连续5h观察小鼠是否有痫性发作并分级，进行脑电图描记。结果空白对照组无痫性发作，两模型组均出现痫性发作，海人酸致痫组与青霉素致痫组按Racine分级0～V级各级之间无明显差异（P〉0．05），小鼠出现癫痫的潜伏期海人酸致痫组比青霉素致痫组短（P〈0．05），而且海人酸致痫组比青霉素致痫组死亡率低（P〈0.05）。结论腹腔注射海人酸所致的动物模型具有与人类颞叶癫痫极为相似的癫痫发作行为学、脑电图特征，是理想的模拟人类颞叶癫痫的动物模型。
- 杨小岗刘卫平章翔王剑博姬西团
- 关键词：青霉素海人酸癫痫小鼠
- 神经干细胞分化过程中bHLH基因表达被引量：4
- 2007年
- 目的通过检测神经干细胞分化过程中抑制型和激活型碱性螺旋(bHLH)转录调控因子mRNA的表达,探讨神经干细胞定向分化机制。方法小鼠胎脑细胞原代培养并鉴定。用全反义维甲酸(RA)诱导神经干细胞分化,通过反转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测神经干细胞分化前以及分化后1d、2d、3d、5d和10d时Hes1、Hes5、Mash1、Math1及NeuroD mRNA的表达。结果Hes1 mRNA在神经干细胞分化前后均表达,无显著差异;Hes5 mRNA随分化时间延长表达下降;NeuroD mRNA和Mash1 mRNA仅在已分化神经元中表达;Math1 mRNA在分化后期表达明显。结论神经干细胞分化过程中bHLH转录因子mRNA的表达具有明显的时相性,这将为最终揭示神经干细胞分化调控机制提供实验基础。
- 王剑博刘卫平章翔姬西团侯俊峰王鹏
- 关键词：神经干细胞分化
- 构建海人酸急性致痫小鼠模型
- 2008年
- 目的建立海人酸诱导的小鼠急性癫痫模型,并探讨其特点。方法实验取健康雄性昆明小鼠99只,随机分为生理盐水组(n=33)和致痫组(n=66),痫组腹腔注射海人酸10mg/kg,生理盐水组腹腔注射生理盐水35μl/g。注射后连续5h观察小鼠是否有痫性发作并分级。当小鼠持续痫性发作达1h时给予地西泮4mg/kg腹腔注射,对照组3只和致痫组9只同时描记脑电图,并取脑切片后苏木精-伊红染色法观察海马各区病理学改变。结果①行为学表现,模型组小鼠注射海人酸后可出现湿狗样抖动、头面部肌肉阵挛、肢体阵挛及全面强直阵挛发作。生理盐水对照组未见癫痫发作。②脑电图表现,癫痫持续状态小鼠表现为持续性节律性棘波、棘慢波或高波幅慢波。③病理学研究,双侧海马均可出现神经元变性,以CA1和门区为主。结论腹腔注射海人酸致痫小鼠急性模型同相应的大鼠模型一样,具有制作简便、痫性发作潜伏期短、致痫率高等特点,其所产生的急性癫痫模型具有与人类颞叶癫痫相似的行为、脑电图与神经病理改变。
- 杨小岗刘卫平章翔王剑博姬西团
- 关键词：海人酸癫痫小鼠疾病模型
