广东省医学科学技术研究基金(A2011566)
- 作品数：3 被引量：3H指数：1
- 相关作者：叶志中尹志华黄进贤罗秀霞邓宇斌更多>>
- 相关机构：广东医学院附属福田医院中山大学附属第一医院广东医学院更多>>
- 发文基金：深圳市医学重点学科建设基金国家自然科学基金广东省医学科学技术研究基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 微小RNA在风湿性疾病中的研究进展被引量：2
- 2013年
- 微小RNA（microRNA，miRNA）是长度约为21个核苷酸的内源性单链非编码RNA，自从1993年被发现以来，备受瞩目。它作为基因表达的转录后调控因子，参与了所有的细胞进程。
- 黄进贤尹志华叶志中邓宇斌
- 关键词：风湿性疾病微小RNA非编码RNA基因表达内源性核苷酸
- miRNA-16在系统性红斑狼疮患者外周血中的表达及作用
- 2015年
- 目的探讨miRNA-16表达在系统性红斑狼疮（SLE）发病中的作用。方法选取符合1997年美国风湿病学会修定的SLE诊断标准的SLE患者16例（SLE组），体检正常的健康对照者12名（健康对照组）作为研究对象。取研究人群外周血分离外周血单个核细胞（PBMC），提取和纯化总RNA，实时定量PCR检测miRNA-16的表达，以小分子RNAU6作为内对照，计算标准化后的2-△ct。值表示miRNA的相对表达含量。并分析其与SLE临床特征的相关性。结果SLE组PBMC中miRNA-16的表达水平919．87±715．45高于健康对照组413．63±330．69，差异有统计学意义（t=-2．497，P〈0．05）；SLE活动组miRNA-16的表达水平1298．79±803．79高于稳定组540．95±350．15，差异有统计学意义（t=-2．445，P〈0．05）；miRNA-16的表达水平与抗核小体抗体呈正相关（r=0．669，P=0．005），与红细胞沉降率呈正相关（r=0．608，P=0．012），与SLE活动指数评分呈正相关（r=0．530，P=0．035）。结论SLE患者PBMC中miRNA-16异常高表达，与狼疮活动有关。
- 尹志华郭粉莲曾惠琼曹智君罗秀霞叶志中孙华麟
- 关键词：系统性红斑狼疮外周血单个核细胞
- 微小RNA-155通过抑制Ets-1促进Th17分化被引量：1
- 2015年
- 目的 探讨微小RNA（miR）-155促进Th17分化的作用途径.方法 采用鼠CD4＋T细胞磁珠分离试剂盒分离小鼠脾CD4＋T细胞,加促Th17分化的IL-2、IL-23和IL-6刺激培养后,转染miR-155过表达或抑制慢病毒载体,流式检测CD4＋T细胞IL-17的表达;ELISA检测细胞培养液IL-17分泌水平;荧光定量PCR检测miR-155、IL-17A和Ets-1 mRNA的表达.筛选Ets-1的siRNA干扰序列,检测si-Ets与miR-155共同作用对Th17分化的影响.采用单因素方差分析,两两比较采用Dunnett法,组间比较采用t检验.结果 对照未刺激组几乎不表达和分泌IL-17,对照刺激组表达IL-17的细胞和分泌IL-17增多.4组表达IL-17细胞百分比差异有统计学意义（F=160.549,P＜0.01）,两两比较miR-155过表达组表达IL-17细胞百分比[（39.86±4.62）％]明显高于对照刺激组[（22.02±2.81）％,P＜0.01]和miR-155抑制组[（19.44±1.49）％,P＜0.01];miR-155过表达组上清液中IL-17水平[（1 509±136） pg/ml]也显著高于其他2个组[（923±42） pg/ml,P＜0.01;（767±94） pg/ml] （P＜0.01）.4组上清液中IL-17表达差异有统计学意义（F=260.813,P＜0.01）;两两比较与其他3组相比,miR-155过表达组miR-155高表达（12.53±0.80,1.78±0.14,7.16±0.62,6.47±0.92,P＜0.01）、IL-17A mRNA高表达（46.55±6.71,1.01±0.19,15.62±1.26,14.20±2.73,P＜0.01）,Ets-1 mRNA低表达（0.66±0.10,1.19±0.04,1.01±0.16,1.37±0.27,P＜0.01）.设计了3条针对Ets-1基因的siRNA,其中si-Ets-2抑制效果最好.si-Ets-2或si-Con与miR-155过表达或抑制慢病毒载体进行共转染,si-Ets-2组均比si-Con组IL-17A mRNA表达上调（17.19±3.58和10.08±0.76,t=-3.361,P=0.028）,而Ets-1 mRNA表达下调（0.27±0.01和0.74±0.03,t=-30.275,P＜0.01）,蛋白印迹法检测也可以看出si-Ets-2#组的Ets-1蛋白表达下降,在miR-155过表达组下降更为明显.结论 miR-155可以通过抑制Ets-1的表达而促进CD4＋T细胞向Th17细胞分化.
- 尹志华罗秀霞张春容陈新鹏黄进贤叶志中
- 关键词：CD4阳性T淋巴细胞白细胞介素17MIR-155ETS-1
