国家自然科学基金(30600146)
- 作品数：6 被引量：21H指数：3
- 相关作者：梁东春孙蓓赵荣兰左爱军任玉平更多>>
- 相关机构：天津医科大学天津医科大学代谢病医院山东万杰医学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金天津市自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- Cdx2 LI-CD和p63在Barrett食管中的表达及相互关系被引量：7
- 2009年
- 目的:探讨Cdx2、LI-CD和p63在Barrett食管中的表达及相互关系。方法:随机选取胃镜下食管黏膜10例、食管炎组织标本20例和Barrett食管组织标本22例。进行Cdx2、LI-CD和p63免疫组化染色,对不同组织中上述指标的表达情况以及Barrett食管中Cdx2与LI-CD的相关性进行分析。结果:Cdx2、LJ-CD在正常食管黏膜和食管炎组织中均无表达,在Barrett食管中表达阳性率分别为86.4%(19/22)和77.3%(17/22),并且二者在Barrett食管中的表达具有显著正相关性(r=0.750,P<0.01)。p63在肠化生组织中没有表达。在部分柱状上皮化生的组织中,有少量p63蛋白表达。结论:Cdx2和LI-CD蛋白在Barrett食管组织中异位表达,可作为Barrett食管的早期标志;在Bar-rett食管中二者表达具有相关性。p63在Barrett食管中下调表达。p63和Cdx2等基因可能参与了Barrett食管的发生。
- 陈鑫王邦茂李麟邓宝茹李姝
- 关键词：CDX2肝肠钙粘连蛋白P63BARRETT食管
- 可磷酸化底物肽促进基因转染效率的研究
- 2010年
- 目的进一步探讨可磷酸化碱性短肽提高短肽作为基因转移载体的转染效率。方法合成基序为LLL-RRRDNEY*FY*VRRLL的短肽(SP),以体外磷酸化实验观察哺乳动物细胞裂解液使SP磷酸化并促进SP/DNA复合物种DNA的释放。以荷荧光素酶报告基因的SP/DNA复合物转染C2C12细胞,观察转染效率。结果细胞裂解液可有效地使可磷酸化短肽发生磷酸化,并促进DNA与SP的解离。可磷酸化短肽对C2C12细胞的转染效率显著高于不可磷酸化短肽。结论可磷酸化短肽可以显著提高短肽的转染效率,外源DNA与SP载体在细胞内的解离情况对SP/DNA复合物的转染效率具有重要影响。
- 曹晓娜任玉萍赵荣兰梁东春
- 关键词：短肽磷酸化解离转染
- 可磷酸化短肽偶联壳聚糖促进CS/DNA转染效率被引量：3
- 2010年
- 合成基序为LLLRRRDNEY*FY*VRRLL的短肽(pSP),其中含有两个可被JaK2蛋白激酶磷酸化的酪氨酸残基.将此短肽与壳聚糖(CS)相偶联,体外磷酸化及DNA释放实验检测哺乳动物细胞裂解液对短肽的磷酸化及pSP-CS/DNA复合物中DNA释放的影响.放射性标记DNA转移实验验证pSP-CS/DNA复合物的入胞能力后,将荷荧光素酶或GFP报告基因的质粒与pSP-CS制成pSP-CS/DNA复合物,转染体外培养的C2C12小鼠成肌细胞,观察GFP的分布及细胞裂解液中的荧光素酶活性以表征转染效率.继而进行多种细胞系的转染,衡量pSP偶联的壳聚糖对不同种属细胞的转染效率.结果表明,哺乳动物细胞裂解液可有效地使短肽发生磷酸化,并藉此促进DNA与壳聚糖载体的解离.以pSP修饰的壳聚糖进行转染时,细胞裂解液的荧光素酶活性可达普通壳聚糖转染的两倍,细胞中GFP的含量也明显增加.据此推论,短肽被磷酸化后产生电荷属性的改变,促进DNA与壳聚糖载体的解离从而显著提高壳聚糖的转染效率.
- 任玉平赵荣兰孙蓓孙蓓梁东春
- 关键词：短肽磷酸化壳聚糖解离转染效率
- JAK-STAT途径活化人前列腺癌雄激素受体的研究被引量：3
- 2003年
- 目的 研究4种集落刺激因子(CSF):粒细胞集落刺激因子(G-CSF)、粒细胞-单核细胞集落刺激因子(GM-CSF)、白细胞介素-3(IL-3)和干细胞因子(SCF)对前列腺癌PC-3M细胞雄激素受体(AR)活化的途径。方法 将含人雄激素受体和雄激素受体报告基因氯霉素乙酰转移酶质粒转染至人前列腺癌细胞株PC-3M,集落刺激因子作用于转染了雄激素受体及其报告基因的细胞,对照组中同时加入终浓度为 50 mmol/L的 JAK-STAT途径持异性阻断剂 AG-490,检测外源性雄激素受体和报告基因的表达量。结果 PC-3M细胞能够表达外源性雄激素受体,10～100μg/L的G-CSF、GM-CSF、IL-3和SCF均能激活PC-3M细胞中外源性雄激素受体,检测到CAT的表达量在(0.58±0.16)μg/g到(3.80±0.89)μg/g之间,其表达量与培养基中的CSF浓度成正比;在终浓度 50 mmol/L AG-490的对照组中报告基因表达量显著下降或检测不到表达。结论 SCF能够激活PC-3M中外源性雄激素受体表达,JAK-STAT途径可能是人前列腺癌细胞雄激素受体旁路激活的机制之一。
- 陈朝晖赵军
- 关键词：前列腺癌雄激素受体集落刺激因子SCF
- 壳聚糖转染胰岛素样生长因子基因促进兔关节软骨损伤修复的实验研究被引量：7
- 2010年
- 目的探讨壳聚糖(chitosan,CS)介导IGF-1基因(igf-1)局部转染对关节软骨损伤修复的作用。方法 3月龄健康雄性大耳白家兔12只,体重2.0～2.5kg,随机分为对照组和干预组(n=6)。其中对照组实验动物左侧为正常对照组,右侧为生理盐水对照组;干预组实验动物左侧为CS干预组,右侧为CS/igf-1干预组。后3组实验动物分别制备兔膝关节外侧髁软骨缺损模型,正常对照组不制备。CS/igf-1干预组于术后当日关节腔内注射CS/igf-1复合物0.5mL,每周2次,共4周;CS干预组注射等体积CS溶液;正常对照组和生理盐水对照组注射等体积生理盐水。术后28d,取关节软骨组织,分别行组织学观察和实时荧光定量PCR检测Ⅱ型胶原及聚集蛋白聚糖基因表达。结果 HE染色及甲苯胺蓝染色示,CS/igf-1干预组及CS干预组损伤部位均有明显软骨性修复,前者明显优于后者,同时均可见纤维组织增生和炎性细胞浸润;生理盐水对照组仅见大量纤维组织增生和炎性细胞浸润,未见明显软骨性修复。正常对照组、生理盐水对照组、CS干预组、CS/igf-1干预组Ⅱ型胶原、聚集蛋白聚糖基因相对含量均依次增高,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论 CS/igf-1复合物可增加软骨细胞中Ⅱ型胶原及聚集蛋白聚糖基因的表达,促进损伤软骨修复。
- 赵荣兰任玉平孙蓓张瑞梁东春
- 关键词：软骨损伤
- ^pSP偶联低分子量壳聚糖介导siRNA对靶基因的沉默被引量：2
- 2011年
- 放射性标记针对荧光素酶报告基因(Luc)的siRNA,与不同分子量的壳聚糖(CS)制备成CS/siRNA复合物,转染可稳定表达Luc基因的MDA-MB-231/Luc人乳腺癌细胞系.与较大分子量壳聚糖相比,低分子量壳聚糖(LMWC)与siRNA形成的复合物具有更小的粒径及更强的siRNA转染能力,但是对靶基因的沉默效应却不高.其原因归咎于低分子量壳聚糖(Mr为2 000或5 000,LMWC)与siRNA间强烈的电荷引力限制了siRNA在细胞内的释放.合成基序为LLLRRRDNEY*FY*VRRLL的可磷酸化短肽(p SP)与LMWC相偶联,合成p SP-LMWC.分别对siRNA及p SP-LMWC进行FAM及Dabcyl标记,利用FRET技术检测细胞内p SP-LMWC与siRNA的解离.结果表明,p SP修饰可大幅度增加siRNA与LMWC在细胞内的解离,成为有功能的游离形式,从而显著下调靶基因的表达.本文的结果表明,低分子量壳聚糖具有良好的siRNA递送能力,促进其与siRNA在细胞内的解离可有效提高siRNA对靶基因的沉默效应.
- 周树民孔繁强孙蓓左爱军梁东春
- 关键词：短肽小干扰RNA
