国家重点基础研究发展计划(2010CB126405)
- 作品数：7 被引量：23H指数：2
- 相关作者：石耀华战欣顾志峰王爱民谢莉萍更多>>
- 相关机构：海南大学清华大学更多>>
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- 脊椎动物源细胞因子对合浦珠母贝外套膜细胞培养及其矿化功能的影响被引量：1
- 2015年
- 筛选出能促进合浦珠母贝外套膜细胞培养及矿化功能的细胞因子,以作为优化本物种细胞培养基的参考,挑选三龄合浦珠母贝,获取其外套膜进行原代细胞培养。向各实验组细胞培养基中分别添加表皮生长因子(EGF)、内皮细胞生长添加剂(ECGS)、胰岛素样生长因子-1(IGF-1)和碱性成纤维细胞生长因子(b FGF),通过比较细胞活性、贴壁能力、迁移能力和4种基质蛋白基因(pif80、n16、msi7及accbp)表达水平的变化,来评判这些因子对细胞培养及细胞矿化功能的影响。结果显示:(1)EGF能显著提高原代培养细胞的活性、贴壁能力和迁移能力,并促进pif80、n16和accbp基因的表达;(2)ECGS能增强细胞的贴壁能力和迁移能力,并大幅提高pif80、n16和msi7基因的表达水平;(3)IGF-1能显著增强细胞活性、贴壁能力、迁移能力和msi7的基因表达水平,但对pif80、n16和accbp基因的表达有一定抑制作用;(4)碱性成纤维细胞生长因子能增强细胞的活性及贴壁能力,并显著提升pif80、n16和accbp基因的表达水平。研究表明,脊椎动物源细胞因子具有延长细胞培养时间、增强细胞活性及促进矿化相关基因表达的作用,能够用于优化合浦珠母贝外套膜细胞的培养基。
- 孔玮李世国谢莉萍张荣庆
- 关键词：合浦珠母贝细胞因子外套膜细胞系
- 栉孔扇贝几丁质酶基因的克隆及功能鉴定被引量：7
- 2017年
- 为研究栉孔扇贝贝壳形成机理,首先应用质谱分析的方法,研究了几丁质酶在栉孔扇贝贝壳的蛋白质组中所占的比例。进一步利用RACE技术克隆获得栉孔扇贝几丁质酶的c DNA,全长共1587 bp,可编码439个氨基酸残基。氨基酸序列的功能结构域分析表明,该几丁质酶具有保守的几丁质酶特征结构域。组织表达分析表明,栉孔扇贝几丁质酶在外套膜组织中表达量最高,并且在外套膜边缘的表达量高于外套膜中心,推测其参与了贝壳的形成。应用实时定量PCR方法,检测贝壳损伤修复过程中基因表达水平,结果显示,几丁质酶基因表达水平呈现下调趋势,暗示其作为负调控因子参与贝壳修复过程。利用RNAi技术降低外套膜组织中几丁质酶基因的表达水平,同时应用扫描电子显微镜观察贝壳内表面的结构,发现贝壳矿物晶体片层的轮廓呈现不规则沉积。综合以上实验结果,推测几丁质酶通过水解几丁质来保证有机框架的有序性,从而对贝壳形状和外观起到调控作用。研究几丁质酶的基因组织表达规律及其生物学功能,将有助于揭示贝壳生物矿化的机制。
- 王俊高静谢军郑向南谢莉萍张荣庆
- 关键词：栉孔扇贝几丁质酶生物矿化
- 不同海区养殖的马氏珠母贝珍珠质颜色比较被引量：11
- 2012年
- 为探讨不同环境对珍珠质颜色的影响,本研究将遗传背景相同的马氏珠母贝分布于海南黎安、广东流沙、广西北海和广西防城4个不同的海区养殖。一年后,用CSE-1型成像色度仪测量4个区域贝壳珍珠质的颜色,记录相应的颜色参数Lab值。结果显示,不同海域养殖的贝壳珍珠质颜色显示了不同的特征,其中广西北海、广西防城和海南黎安这3组贝壳珍珠质颜色较为接近,均表现为明度高、偏黄绿;而广东流沙与这3个地区的色差较大,表现为明度低、黄绿杂色浅、偏白色的特征。
- 顾志峰黄锋绍王海甘凯战欣石耀华王爱民
- 关键词：马氏珠母贝
- 马氏珠母贝EST-SSR标记开发及其与生长及珍珠层性状的关联分析
- 马氏珠母贝(Pinctada martensii Dunker,在日本也常用种名Pinctada fucata),又称合浦珠母贝,是培育海水珍珠的主要母贝。由于养殖水域自然条件的恶化、长期的人工养殖和繁育等多方面的原因,...
- 邱樱王嫣石耀华顾志峰王爱民
- 关键词：马氏珠母贝EST-SSR标记生长性状
- 文献传递
- 海南珠母贝属Pinctada6个种的分类鉴定被引量：2
- 2014年
- 通过测试海南省珠母贝属Pinctada 6个种的45个个体的16S和H3基因序列,并与GenBank数据库中相同物种进行比对,构建系统发育树对其进行分类,同时根据简单、明确的贝壳形态学特征予以最终确认。此分类法不仅可以较准确、快速地进行珠母贝属的分类鉴定,而且分类结果不易受被测试贝类生活环境的影响,不易受分类鉴定人员水平的限制,有利于发现杂交种和隐存种。
- 温海洋石耀华顾志峰战欣王爱民
- 关键词：H3
- 马氏珠母贝msi60基因表达量与经济性状的相关分析
- 2016年
- [目的]探讨矿化基因、贝壳和珍珠经济性状之间的相关关系。[方法]选择47个培育优质珍珠的马氏珠母贝,测量贝壳的壳宽、壳高、壳长、绞合线长、总壳重、左壳重、珠层厚度及珍珠的直径、重量、珠层厚度,并分析矿化基因msi60在外套膜内缘组织的相对表达量,珍珠经济性状和贝壳经济性状之间的相关关系。[结果]珍珠的珠层厚度、珍珠直径和珍珠重量3个经济性状均与受体贝贝壳的壳宽、壳长、总壳重和左壳重呈显著相关,推测育珠贝的生长状况在一定程度上影响珍珠的培育;msi60在外套膜内缘的相对表达量与珍珠重量之间存在相关性(P=0.059),贝壳和珍珠的珍珠层厚度存在显著相关性(P=0.019),推测在马氏珠母贝中,贝壳的矿化和珍珠的矿化可能具有共同的上游调控元件。[结论]msi60在形成贝壳珍珠质层的外套膜内缘组织中的基因表达量与珍珠的经济性状相关。该研究为马氏珠母贝生物矿化分子机制的研究提供基础资料。
- 战欣于呈呈石耀华顾志峰王爱民
- 关键词：贝壳经济性状马氏珠母贝
- 合浦珠母贝iPS细胞相关的转录因子的克隆及分析被引量：1
- 2014年
- 转录因子Sox2、Oct4、c-Myc和KLF4在iPS细胞研究中具有重要作用,将它们加入体外培养的细胞中,可以诱导体细胞去分化成为多能干细胞。作者通过RACE-PCR技术从合浦珠母贝(Pinctada fucata)的外套膜组织中克隆获得了3个转录因子——c-Myc、Sox2及KLF4的cDNA。c-Myc全长1585bp,开放阅读框的长度为1131bp,编码376个氨基酸,蛋白结构分析表明它具有保守的HLH和Myc-N结构域。Sox2全长1908bp,开放阅读框长度为990bp,编码329个氨基酸,蛋白结构分析它具有保守的HMG-box和Soxp结构域。KLF4全长2268bp,开放阅读框长624bp,编码207个氨基酸,预测该蛋白具有两个zf-H2C2_2结构域。BLAST分析它们均与太平洋牡蛎的相关蛋白具有较高同源性,说明其与太平洋牡蛎亲缘关系更近。RT-PCR实验发现这3个基因在合浦珠母贝外套膜、足、生殖腺、内脏团、闭壳肌和鳃6种组织中均有表达,表明它们是非常保守的转录因子。本研究对于合浦珠母贝细胞系建立和研究具有启发意义。
- 张若云徐广锐潘聪谢莉萍王洪钟张贵友张荣庆
- 关键词：诱导多功能干细胞转录因子克隆
- 方斑东风螺微卫星标记的开发及其野生和泰国引进养殖群体遗传结构分析
- 方斑东风螺(Babylonia areolata Link,1807)是一种具有重要经济价值的海水养殖腹足动物,属新腹足目(Neogastropoda),蛾螺科(Neogastropoda)。它主要分布于东南亚地区,是泰...
- 王嫣朱锦天石耀华顾志峰王爱民
- 关键词：方斑东风螺微卫星种群遗传结构野生群体
- 文献传递
- 马氏珠母贝生长与生物矿化相关基因的SNP标记开发
- 马氏珠母贝(Pinctada martensii Dunker)是我国目前最重要的海水珍珠生产贝类。提高育珠贝的生长性状(如壳高,壳宽和壳厚、壳重和总重)和珍珠质分泌性状(如珍珠层厚度、珍珠质量等)是马氏珠母贝遗传改良的...
- 张楠陆虎王嫣顾志峰石耀华王爱民
- 关键词：SNP标记
- 文献传递
- 马氏珠母贝基因组和EST微卫星标记的开发及其遗传特性比较
- 近年来,越来越多的研究结果表明,微卫星标记(microsatellite,或Simple sequence repeats,SSR)因其多态性高,扩增稳定,呈共显性且易于自动化检测等特性,已成为研究水产经济贝类群体遗传结...
- 陆虎王嫣石耀华顾志峰王爱民
- 关键词：马氏珠母贝分子标记EST-SSR基因组SSR
- 文献传递
