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人巨细胞病毒感染对宿主细胞周期素依赖性蛋白激酶2的影响: 2006年; 目的观察HCMV感染细胞周期素依赖性蛋白激酶2(Cdk2)的亚细胞定位,研究HCMV感染对Cdk2蛋白水平及对细胞周期蛋白E(CyclinE)/Cdk2激酶活性的影响。方法通过密度抑制使细胞同步化于G0/G1期,用HCMVAD169毒株感染人胚肺成纤维细胞(HEL),用免疫细胞化学技术分别测定HCMV感染前及感染后24hCdk2亚细胞定位;WesternBlot法测定HCMVCdk2蛋白丰度;用免疫沉淀,激酶活性分析法检测HCMV感染细胞内Cdk2的活性。结果接触抑制阻止在G0期细胞Cdk2游离在细胞质,HCMV感染24h内导致Cdk2从细胞质移位到细胞核。同时HCMV感染可引起cyclinE/Cdk2激酶的强烈激活,但HCMV感染并不诱导Cdk2蛋白丰度增加。结论HCMV感染G0/G1细胞,在24h内导致Cdk2从细胞质移位到细胞核,使之与细胞核内的调节亚单位CyclinE结合,激活CyclinE/Cdk2激酶,使细胞周期越过G1/S限制点,进展至晚G1期。; 刘楠余艳红赵杨张闻良珍; 关键词：巨细胞病毒感染细胞周期蛋白类

中药金叶败毒制剂抑制巨细胞病毒感染ERK／MAPK信号通路的研究被引量：10: 2006年; 目的:通过对感染丝裂素活化蛋白激酶(Mitogen-Activated Protein Kinase,MAPK)细胞外信号调节激酶(extracellular signal-regulated kinase包括ERK1和ERK2)的信号通路的抑制作用,研究中药金叶败毒制剂治疗巨细胞病毒(human cytomegalovirus,HCMV)感染的分子机制。方法:使用免疫印记技术检测中药金叶败毒制剂和更昔洛韦(ganciclovir,GCV)干预HCMV感染的人胚肺成纤维细胞(human embryonic lung,HEL)的ERK表达水平,并观察MEK(mitogen-activated protein kinase kinase)特异性抑制剂PD 98059,中药金叶败毒制剂对细胞的病变作用(cytopathic effect,CPE)的影响。结果:两种药物都可抑制HCMV在HEL中的增殖,以PD 98059与中药金叶败毒制剂合用效果明显。中药金叶败毒制剂使磷酸化ERK1／2表达降低,对ERK1的抑制作用在感染后10min出现,30min达到高峰,对ERK2的抑制作用在感染后10min出现,60min达到高峰,而GCV对ERK1／2无明显的抑制作用。结论:中药金叶败毒制剂可通过调节MAPK／ERK通路而抑制HCMV基因的表达和复制从而发挥其部分抗病毒作用。; 张宏秀闻良珍凌霞珍陈素华曾万江; 关键词：巨细胞病毒丝裂素活化蛋白激酶 PD 中药金叶败毒制剂

高迁移率族蛋白B1在小鼠巨细胞病毒感染小鼠内耳中的表达被引量：6: 2007年; 目的:探讨高迁移率族蛋白B1(high mobility group box chromosomal protein 1,HMGB-1)在小鼠巨细胞病毒(murine cytomegalovirus,MCMV)感染导致听力损失发病机制中的作用。方法:采用新生小鼠颅内注射病毒法建立MCMV感染动物模型,测定2周龄小鼠的听性脑干反应(auditory brainstem response,ABR),采用RT-PCR检测耳蜗组织HMGB-1mRNA表达,均与注射生理盐水的对照组比较。结果:ABR,病毒组(28.42±3.03)dB,对照组(15.66±0.38)dB(t=3.042,P<0.01)。HMGB-1mRNA,病毒组2.372±0.193,对照组0.754±0.322(t=7.537,P<0.01)。结论:HMGB-1可能通过维持并加重内耳的迟发性炎症,成为巨细胞病毒感染导致听力损失发生发展的病理基础。; 程苾恒闻良珍张英李丹王楠; 关键词：听觉丧失 HMGB1蛋白

金叶败毒及其拆方体外抗人巨细胞病毒的比较研究: 2005年; 张■闻良珍; 关键词：人巨细胞病毒金叶败毒拆方 HCMV活动性感染围产期感染体外

中药金叶败毒制剂对人巨细胞病毒感染细胞及细胞周期调控抑制基因WAF1/CIP1表达的研究被引量：1: 2005年; 目的　通过研究中药金叶败毒制剂对人巨细胞病毒 (HCMV)感染细胞及细胞周期调控抑制基因WAF1/CIP1蛋白丰度变化的影响 ,探讨中药金叶败毒制剂体外对HCMV感染的阻断和治疗效应及其机制。方法　 2 0 0 2年 11月至 2 0 0 4年 4月华中科技大学同济医学院附属同济医院采用蛋白免疫印迹 (Westernblot)方法检测HCMV感染后 2 4h、4 8h、72h、96h细胞中p2 1WAF1/CIP1丰度 ,检测中药金叶败毒制剂干预后p2 1WAF1/CIP1丰度的变化。结果　病毒感染后 2 4h、4 8h、72h、96h细胞中 p2 1WAF1/CIP1丰度呈下降趋势 ,而中药金叶败毒制剂可部分阻止这种趋势。结论　中药金叶败毒制剂部分上调HCMV感染引起的p2 1WAF1/CIP1丰度下降 ,可能是中药金叶败毒制剂抗HCMV效应的作用机制之一。; 刘楠闻良珍; 关键词：金叶败毒制剂中药 P21WAF1/CIP1 细胞周期调控抑制基因

金叶败毒制剂对人巨细胞病毒感染人胚肺成纤维细胞增殖及凋亡的影响被引量：2: 2010年; 目的:探讨中药金叶败毒制剂(简称中药)对人巨细胞病毒(HCMV)感染人胚肺成纤维细胞(HEL)增殖及凋亡的影响。方法:用HCMVAD169感染人胚肺成纤维细胞,分别用金叶败毒制剂和更昔洛韦(GCV)干预后,采用MTT法检测HCMV感染及药物干预后HEL细胞的增殖活性,并采用流式细胞术检测HEL、HCMV感染及药物干预后细胞凋亡指数。结果:在HCMV感染48h内,细胞增殖及凋亡指数与细胞对照组无明显差异。HCMV感染72h后,细胞增殖明显受抑制,凋亡指数明显增高;而两种药物干预后,72h后明显促进细胞增殖,抑制细胞凋亡。结论:金叶败毒制剂可能通过促进HCMV感染细胞的增殖,抑制感染细胞的凋亡而发挥抗病毒作用。; 袁慧刘璐闻良珍; 关键词：金叶败毒制剂巨细胞病毒增殖活性凋亡指数

巨细胞病毒感染小鼠学习记忆与CaMKⅡ表达的变化被引量：4: 2008年; 目的:探讨巨细胞病毒感染对小鼠学习记忆的影响、Ca2+/钙调蛋白依赖性蛋白激酶Ⅱ(CaMKⅡ)的表达,及其在学习与记忆中的作用。方法:采用颅内注射制造巨细胞病毒颅内感染小鼠模型,利用Morris水迷宫试验对病毒感染组和对照组动物的学习和记忆成绩进行3 d测试,记录其学习和记忆成绩,同时观察海马组织神经细胞[Ca2+]i及CaMKⅡ在胞膜中表达水平的变化。结果:Morris水迷宫测试的结果显示,病毒感染组小鼠的学习记忆成绩明显下降,神经细胞[Ca2+]i较对照组增高,胞膜蛋白CaMKⅡ的水平表达下降,且差异有显著性(P<0.01)。结论:巨细胞病毒感染能够导致小鼠学习记忆能力下降及CaMKⅡ在神经细胞胞膜的表达下降,说明CaMKⅡ参与了巨细胞病毒对学习记忆的影响。; 张英曹云霞程苾恒闻良珍丛林; 关键词：巨细胞病毒感染钙-钙调素依赖性蛋白激酶学习记忆能力

人巨细胞病毒感染对宿主细胞周期蛋白表达影响的实验研究被引量：1: 2007年; 目的观察人巨细胞病毒(HCMV)感染对宿主细胞周期蛋白(Cyclins)表达的影响。方法用HCMV感染同步化于G0/G1期的人胚肺成纤维细胞(HEL),分别于感染后0 h、3 h、6 h、12 h、24 h、48 h、72 h、96 h终止培养。用免疫蛋白印迹法(Western Blot)检测CyclinE、CyclinA、CyclinD1蛋白的表达。结果HCMV感染接触抑制细胞12 h时CyclinE蛋白被诱导,感染后24 h出现CyclinE峰值;HCMV不能诱导CyclinA蛋白表达;CyclinD1没有被诱导,且在感染后24 h开始下降。结论HCMV感染同步化于G0/G1期的细胞后,诱导CyclinE蛋白明显升高,激活CyclinE/Cdk2激酶,使细胞周期越过G1/S限制点,将细胞周期阻止于晚G1期。; 刘楠余艳红钟梅闻良珍

MCMV感染对小鼠海马[Ca^(2+)]i及线粒体膜电位的影响被引量：7: 2006年; 目的:观察鼠巨细胞病毒(MCMV)感染对小鼠海马细胞内游离Ca2+浓度(犤Ca2+犦i)及线粒体膜电位的影响。方法:将BALB/C乳鼠同母鼠随机分为实验对照组(24只)和病毒组(35只),感染后56d应用荧光分光光度计和流式细胞仪分别检测两组小鼠海马的犤Ca2+犦i及线粒体膜电位。结果:病毒感染组小鼠海马犤Ca2+犦i增高及线粒体膜电位明显下降,与实验对照组比较差异有显著性(P值均<0.01)。结论:巨细胞病毒感染所引起的小鼠海马犤Ca2+犦i及线粒体膜电位的改变可能是其导致神经系统功能紊乱的机制之一。; 张英闻良珍程苾恒; 关键词：巨细胞病毒海马线粒体膜电位

中药金叶败毒制剂对人巨细胞病毒感染细胞kip1基因转录水平的影响: 2007年; 目的研究中药金叶败毒制剂对人巨细胞病毒(HCMV)感染细胞细胞周期调控抑制基因kip1转录水平的影响,探讨中药金叶败毒制剂体外对HCMV感染的阻断机制。方法2005年7月至12月于南方医科大学南方医院,采用逆转录聚合酶链法(RT-PCR)检测HCMV感染后24h、48h、72h、96h细胞中kip1mRNA水平,检测中药金叶败毒制剂干预后kip1mRNA水平的变化。结果病毒感染后24h、48h、72h、96h细胞中kip1mRNA水平呈下降趋势,而中药金叶败毒制剂可部分阻止这种趋势。结论中药金叶败毒制剂部分上调HCMV感染引起的kip1mRNA水平下降,可能是中药金叶败毒制剂抗HCMV效应的作用机制之一。; 刘楠余艳红钟梅闻良珍; 关键词：人巨细胞病毒中药金叶败毒制剂 KIP1

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