福建省科技计划项目(2008N2001)
- 作品数：12 被引量：32H指数：3
- 相关作者：赖钟雄林玉玲陈裕坤田奇琳陈登云更多>>
- 相关机构：福建农林大学福建省农业科学院福建省产品质量检验研究院更多>>
- 发文基金：福建省科技计划项目国家自然科学基金国家教育部博士点基金更多>>
- 相关领域：农业科学生物学理学更多>>
- 植物干细胞研究进展被引量：1
- 2013年
- 从近年来研究发展的植物干细胞概念、茎尖分生组织、根尖分生组织、维管形成层组织的结构特征及其各自调控的分子机制等方面进行总结,重点阐述了近年来植物干细胞在植物体内发生与分化所涉及的分子调控机制,并对植物干细胞研究的未来前景进行了展望。
- 田奇琳赖钟雄
- 关键词：茎尖分生组织根尖分生组织分子机制
- 龙眼胚性愈伤组织中ELF4家族基因克隆及其表达分析
- 2015年
- ELF4家族是植物特有基因,能调节生物钟、调控开花时间、感受光周期和参与幼苗去黄化等。以龙眼松散型胚性愈伤组织为材料,采用RT-PCR结合RACE法克隆了ELF4家族3个成员c DNA全长,分别命名为DlELF4、DlELF4-LIKE 1和DlELF4-LIKE 4。DlELF4全长599 bp,编码140个氨基酸;DlELF4-LIKE 1全长762 bp,编码142个氨基酸;DlELF4-LIKE 4全长661 bp,编码114个氨基酸;DlELF4家族成员均为不稳定的亲水蛋白,无信号肽与跨膜结构,都含有DUF1313保守功能结构域。进化树分析表明,植物中ELF4家族可分成二个亚组,ELF4与ELF4-LIKE 1聚为一组,ELF4-LIKE 2、3、4聚为另一组。q PCR结果表明:在体胚发生过程中DlELF4、DlELF4-LIKE 1和DlELF4-LIKE 4表达模式相同,均在球形胚时期表达量极高,而在其它时期表达量很低;DlELF4家族对不同光质和不同处理时间的响应存在差异:DlELF4的表达经24 h处理时可能受绿光和红光诱导,经72 h处理时可能受红光、蓝光和白光诱导;DlELF4-LIKE 1的表达在24 h处理时可能受绿光诱导,经72 h处理时受红光和绿光抑制;DlELF4-LIKE 4的表达在24 h和72 h处理时可能受蓝光和白光诱导。水杨酸和茉莉酸甲酯能促进龙眼胚性愈伤组织中DlELF4家族成员的表达。以上结果表明,ELF4家族可能参与龙眼体胚发生过程中球形胚的形态建成与胁迫应答。
- 陈裕坤林玉玲赖钟雄
- 关键词：龙眼体胚发生克隆
- 龙眼胚性愈伤组织Remorin家族成员的克隆及其在体胚发生过程中的表达分析被引量：1
- 2014年
- 以龙眼松散形胚性愈伤组织为材料,采用RT-PCR结合RACE法克隆Remorin家族5个成员的c DNA全长,Dl Remorin1全长2 127 bp,编码572个氨基酸;Dl Remorin2全长1 829 bp,编码444个氨基酸;Dl Remorin3全长1 937 bp,编码541个氨基酸;Dl Remorin4全长1 743 bp,编码466个氨基酸;Dl Remorin5全长1 043 bp,编码181个氨基酸。Dl Remorin1~5 DNA序列长度分别为:4 054、3 097、3 505、4 690和1 935 bp,所有内含子剪切位点均符合真核生物"GT-AG"规则。所有成员均是不稳定亲水性蛋白,都不具有信号肽,只有Dl Remorin1具有跨膜结构,都具有Remorin家族保守结构域,与其它植物的Remorin具有较高的同源性。系统进化树分析结果表明,Dl Remorin5为经典的Remorin蛋白,Dl Remorin1与Dl Remorin2属于长链Remorin。qRT-PCR结果显示,随着龙眼体胚的发育,Dl Remorin1的表达量呈类"N"状趋势,在心形胚时期和子叶形胚时期较高;Dl Remorin2在心形胚和子叶形胚时期迅速下降;Dl Remorin3在发育中后期迅速升高,并在子叶形胚时期最高;Dl Remorin4在球形胚和鱼雷形胚时期最低,而Dl Remorin5在不完全胚性紧实结构时期最低。说明Dl Remorin1~5在龙眼体胚发生过程的转录水平具有一定的组织特异性和时序性。ps RNA Target预测显示Dl Remorin还可能受到mi RNA家族的调控。
- 陈裕坤徐洋屈莹林玉玲姚文赖钟雄
- 关键词：龙眼体胚发生克隆QRT-PCR
- 龙眼体胚CDC48基因的克隆、原核表达及其在体胚发生过程中的表达分析被引量：1
- 2014年
- 为探讨龙眼(Dimocarpus longan)体胚CDC48基因的表达方式,采用RT-PCR和RACE方法,从龙眼胚性愈伤组织中克隆得到1条长度为2620 bp、含有完整开放阅读框的DlCDC48基因cDNA序列(GenBank登录号:EU606206)和长度为2418 bp的DNA序列(GenBank登录号:FJ590953)。DlCDC48编码1个含有805个氨基酸的蛋白质。DlCDC48基因不含内含子。生物信息学分析表明:DlCDC48蛋白为不具跨膜结构域的亲水性胞质蛋白,不具有信号肽,定位在细胞核;与其他植物的CDC48有较高的同源性。将DlCDC48基因构建成原核表达载体,经IPTG诱导表达了1个分子量约为89 kD的蛋白。利用实时荧光定量PCR(qPCR)技术,DlCDC48在龙眼体胚发育过程中的各个阶段均有表达,其中球形胚时的表达量最低,胚性紧实球形结构阶段的表达量最高。这为进一步研究CDC48基因在植物体胚发生中的作用奠定基础。
- 陈义挺赖钟雄方智振蔡英卿林玉玲李焕苓陈登云
- 关键词：龙眼体细胞胚胎发生LONGAN
- 龙眼胚性愈伤组织限制生长保存及其染色体数目变异被引量：14
- 2009年
- 以龙眼"红核子"品种为材料,研究甘露醇与肌醇交互培养及蔗糖含量、琼脂含量、盐浓度、PP333浓度、光质等对龙眼胚性愈伤组织(Embryogenic callus,EC)限制生长保存的影响,结果表明:同时添加20g/L甘露醇、0.10g/L肌醇,并把接种量控制在0.1g/瓶,龙眼EC的继代周期可进一步延长到70d左右。同时,以"红核子"、"松风本"和"聚龙105"为材料,对保存的龙眼EC及其体胚发生过程中染色体数目的变异进行研究,结果表明:染色体变异始于胚性愈伤组织,但有趋于稳定的趋势。
- 林秀莲赖钟雄
- 关键词：龙眼胚性愈伤组织限制生长保存染色体变异
- 金花茶多酚氧化酶基因的克隆及其体胚发生过程中的表达分析被引量：2
- 2014年
- 以金花茶胚性培养物为材料,对体胚PPO基因克隆以及在体胚发生过程中的转录水平进行q PCR分析和酶活性变化检测.结果表明:克隆获得的金花茶PPO基因c DNA序列1788 bp,含有完整的开放阅读框(ORF),编码595个氨基酸;与登录Gen Bank的山茶属其他植物PPO基因序列进行核苷酸和氨基酸比对发现,同源性分别为74%和72%左右.同时,以18S rRNA作为内参基因进行的q PCR分析表明:金花茶体胚发生过程中PPO基因表达量呈下降趋势,球形胚PPO基因表达量最大,子叶胚和心形胚次之,成熟胚最小;而正常子叶胚和花状多子叶胚的表达量存在明显差异.此外,对金花茶体胚发生过程中PPO活性变化检测结果表明:在此过程中PPO活性明显比较低,变化趋势与PPO基因定量表达结果相似,推测PPO基因可能在金花茶体胚发生早期发挥重要作用.
- 高宇琼林玉玲赖钟雄
- 关键词：金花茶体胚发生PPO活性
- 龙眼胚性愈伤组织fw2.2家族2个基因的克隆与分析被引量：2
- 2012年
- fruit weight 2.2(fw2.2)是植物中控制果实重量的重要数量性状的主效基因。以龙眼转录组数据库为基础,采用同源克隆法及RACE技术,从龙眼的胚性愈伤组织中获得fw2.2家族的2个cDNA全长序列,命名为Dlfw2.2-1与Dlfw2.2-1,并对其核甘酸序列及推导的氨基酸序列进行生物信息学分析。结果表明:Dlfw2.2-1基因的cDNA全长为970 bp,编码184个氨基酸;Dlfw2.2-2基因的cDNA全长为941 bp,编码175个氨基酸。Dlfw2.2-1与Dlfw2.2-2的核甘酸序列及其推导的氨基酸序列与其它植物的fw2.2具有较高的同源性,亚细胞定位于细胞质膜,不含信号肽,具有跨膜结构与典型的与PLAC8同源的富半胱氨酸蛋白(Cysteine-rich Protein)的保守结构域。植物中fw2.2系统进化树分析结果表明,Dlfw2.2-1和Dlfw2.2-2为同一分枝,与番茄和油梨的fw2.2的距离最近。因此,推测Dlfw2.2-1与Dlfw2.2-2属于fw2.2基因家族的2个成员。
- 陈裕坤林玉玲赖钟雄
- 关键词：龙眼胚性愈伤组织果实重量基因克隆生物信息学分析
- 龙眼胚性愈伤组织DlGRAS4与DlGRAS54基因的克隆及表达分析被引量：7
- 2014年
- 以龙眼松散型胚性愈伤组织为实验材料,采用RT-PCR结合RACE法,克隆了植物特异转录调控因子DlGRAS4和DlGRAS54的cDNA全长序列和DNA序列,并进行生物信息学以及表达分析。结果表明:DlGRAS4全长1 668bp,开放阅读框(ORF)1 296bp,编码431个氨基酸(GenBank登录号:KC127683);DlGRAS54全长2 113bp,ORF 1 659bp,编码552个氨基酸(GenBank登录号:KC127684);DlGRAS54的DNA序列在5′-UTR含有1个1 533bp的内含子。生物信息学分析表明:DlGRAS4和GRAS54是不稳定亲水蛋白,不含信号肽,具有跨膜结构和GRAS家族的保守结构域,亚细胞定位于细胞膜中;与毛果杨、葡萄、蓖麻和可可等具有较高的同源性。系统进化树分析显示,DlGRAS54与拟南芥AtPAT1、葡萄VvPAT1、毛果杨PtPAT1、大豆GmPAT1处于同一分枝;DlGRAS4与拟南芥AtSCL23、玉米ZmSCL23处于同一分枝。推测DlGRAS4和DlGRAS54是GRAS基因家族的成员。qPCR结果表明,DlGRAS4在整个发育阶段转录水平呈"W"型变化趋势,在球形胚和子叶形胚阶段的表达量达最大值;DlGRAS54在整个发育阶段的转录水平呈"M"型变化趋势,在球形胚和鱼雷形胚阶段表达量达最大值,表明DlGRAS4和DlGRAS54主要在发育的中晚期起作用。外源赤霉素处理后DlGRAS4和DlGRAS54的表达量明显上调,说明DlGRAS4和DlGRAS54对赤霉素处理能做出积极的反应。
- 陈裕坤林玉玲田奇琳林丽霞赖瑞联赖钟雄
- 关键词：龙眼体细胞胚胎发生GRAS生物信息学实时荧光定量PCR
- 龙眼GPX基因的克隆、原核表达及其在体胚发生过程中的表达分析被引量：2
- 2013年
- 采用RT-PCR与RACE相结合的方法,从龙眼胚性愈伤组织中克隆了长947 bp含有完整开放阅读框的龙眼DlGPX cDNA序列(GenBank登录号为EU364813)和长度为1 736 bp的DNA序列(GenBank登录号为EU680970)。其编码1个含有168个氨基酸的蛋白质。DlGPX基因中含有5个内含子,均符合真核生物内含子通用的GT-AG法则。生物信息学分析显示:该蛋白为亲水的酸性蛋白质,定位于叶绿体;与其他植物的GPX有较高的同源性。将该基因构建成原核表达载体,经IPTG诱导表达了1个分子量约为23 ku的蛋白。利用实时荧光定量PCR(qPCR)技术研究该基因在龙眼体胚发生发育过程中的表达情况,结果显示,从松散型胚性愈伤组织到不完全胚性紧实球形结构阶段,DlGPX mRNA的转录水平逐渐升高,在胚性紧实球形结构阶段降到最低水平,子叶形胚阶段又上升到与不完全胚性紧实球形结构阶段相当的水平。
- 陈义挺赖钟雄方智振蔡英卿林玉玲李焕苓陈登云
- 关键词：龙眼体细胞胚胎发生GPX实时荧光定量PCR
- 应用ICP-MS法对枇杷果实中痕量元素的研究被引量：5
- 2014年
- 以15年生的枇杷果实为试材，采用微波消解法处理样品，电感耦合等离子体质谱法（ICP—MS）分析测定果实中V、Mn、Fe、Co、Ni、Cu、Zn、Se和Mo等9种人体必需痕量元素的质量分数（叫）。结果表明，各元素的线性相关系数均大于0．999，检出限为0．003～0．126μg/L，相对标准偏差均低于3．00％；枇杷果实中痕量元素含量存在显著差异，其中Mn、Zn和Fe含量丰富，高于10mg，kgDW；不同品种果实Co、Mo、Se和V等元素的变异系数高于40％：聚类分析结果表明，果实中矿质元素与果实风味品质有明显的相关性。
- 祁芳斌陈发兴卢海芬邱秀玉赖钟雄
- 关键词：枇杷果实微波消解痕量元素
