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黑曲霉DB056分泌的柚苷酶分离纯化及酶学性质研究被引量：9: 2010年; 对黑曲霉DB056发酵产生的柚苷酶进行分离纯化并研究其基本特性。粗酶液经硫酸铵沉淀、离子交换层析和凝胶过滤层析分离,所得柚苷酶的比活力为1716.41U/mg蛋白,纯化倍数为17.52倍。柚苷酶具有4个相对分子质量的组分,较适pH值范围4.0～5.0,最稳定的pH4.5;该酶适宜的作用温度范围45～55℃,温度50℃时酶活力最大,45℃和50℃条件下可以分别稳定4h和2h,55℃时柚苷酶1h失活50%;Ag+、Hg2+对柚苷酶具有强烈的抑制作用,其它金属离子对柚苷酶的影响随离子浓度的不同而不同,如0.1mmol/LCa2+、K+、Al3+、Mn2+、Cu2+可提高柚苷酶的活力,而5.0mmol/LFe2+、Al3+对柚苷酶显示抑制作用。; 卢云真倪辉蔡慧农李利君胡阳肖安风; 关键词：柚苷酶分离纯化酶学性质

蜜柚果酒脱苦工艺优化研究被引量：12: 2009年; 本实验采用吸附、添加苦味物抑制剂等方法对蜜柚果酒进行脱苦研究,并进行优化。单因素试验结果表明,大孔吸附树脂、活性碳在添加量分别为0.5%和0.4%时吸附效果最好,β-环糊精、白砂糖用量分别为0.4%和1.5%时脱苦效果最好,硅胶在0.3%时对柠檬苦素有较好的吸附效果。正交试验结果表明复合脱苦试剂的最佳组合为0.3%的大孔吸附树脂、0.3%的活性碳、0.2%的硅胶、0.2%的β-环糊精和添加1%白砂糖。; 李利君肖安风倪辉杨远帆杨秋明蔡慧农; 关键词：柚皮苷柠檬苦素脱苦

蜜柚中主要苦味物质的快速测定方法研究被引量：14: 2009年; 目的:建立HPLC法测定琯溪蜜柚中3种苦味物质,即柚皮苷(naringin)、柠檬苦素(limonin)和诺米林(nomilin)的含量。方法:Waters SymmetryC18柱(4.6mm×150mm,3.5μm),流动相为甲醇-乙腈-磷酸缓冲液(0.01mol/L、pH3.5,三者体积比9∶3∶8),检测波长210nm。结果:本体系条件下,柚皮苷、柠檬苦素和诺米林分别在1.80～115μg/mL、4.30～137.5μg/mL和5.82～186.25μg/mL范围内呈良好的线性关系,R2值分别为0.999、0.9968和0.9993;加样回收率分别为97.80%(RSD=1.86)、95.32%(RSD=2.04)和98.54%(RSD=3.17)。结论:本法操作简便、快速、重现性好,结果准确,可用于柚类果实天然苦味物质的检测。; 黄高凌倪辉胡阳杨远帆李利君蔡慧农; 关键词：高效液相色谱法柚皮苷柠檬苦素

黑曲霉DB056发酵α-鼠李糖苷酶和柚苷酶培养基的优化研究被引量：11: 2010年; 目的:优化黑曲霉DB056产α-鼠李糖苷酶和柚苷酶的培养基,提高这两种酶的产量。方法:以α-鼠李糖苷酶活力和柚苷酶活力为指标,研究碳源、氮源和乳化剂TritonX-100对α-鼠李糖苷酶活力和柚苷酶活力的影响,优化黑曲霉DB056摇瓶发酵α-鼠李糖苷酶和柚苷酶的培养基。结果:碳氮源的种类与浓度,乳化剂Tri-tonX-100的浓度对黑曲霉DB056产α-鼠李糖苷酶和柚苷酶有重要影响;黑曲霉DB056产酶的优化培养基是:柚皮苷3.5g/L,玉米浆4g/L,MgSO4·7H2O1.0g/L,KH2PO41.0g/L,KCl0.5g/L,无水CaCl20.1g/L,乳化剂TritonX-1001.0%。此时α-鼠李糖苷酶活力和柚苷酶活力分别为994U/mL和276U/mL,分别比发酵初始培养基提高了42.3%和147.8%。结论:通过培养基优化,大幅度提高了黑曲霉DB056液态深层发酵α-鼠李糖苷酶活力和柚苷酶活力。; 吴升山蔡慧农苏文金倪辉倪辉李利君; 关键词：黑曲霉发酵培养基柚苷酶高效液相色谱法

黑曲霉产柚苷酶的发酵条件优化被引量：15: 2011年; 利用高效液相色谱法,检测发酵液中α-鼠李糖苷酶和柚苷酶的活力,考察碳源、pH值、搅拌转速、发酵温度对柚苷酶产量的影响,对黑曲霉DB056产柚苷酶的7L罐发酵工艺进行优化。研究结果表明,以20g/L柚皮苷为唯一碳源,发酵黑曲霉DB056产柚苷酶的效果最佳。发酵过程的pH值、搅拌转速和发酵温度的最优控制值分别为6.0、700r/min和32℃,此时产酶效果最理想,发酵过程α-鼠李糖苷酶和柚苷酶最大酶活力分别达到1133.00和788.42U/mL。将优化的发酵工艺放大到200L发酵罐进行试验,α-鼠李糖苷酶和柚苷酶的最大酶活力分别为1069.30U/mL和727.44U/mL。中试放大效果良好。; 肖安风倪辉吴升山李利君蔡慧农; 关键词：黑曲霉发酵条件柚苷酶

黑曲霉α-鼠李糖苷酶高产菌株的选育被引量：13: 2009年; 本文首次报道利用Davis方法制备的透明圈法筛选α-鼠李糖苷酶高产菌株。用甲基磺酸乙酯对出芽8h的黑曲霉孢子进行诱变处理,用透明圈法初筛出的菌株中,产量提高40%以上的突变菌株占11%;用摇瓶培养对初筛出的菌株进行两轮复筛α-鼠李糖苷酶高产突变株T-226,摇瓶培养α-鼠李糖苷酶活达373.4U/mL,比出发菌株提高了22.7%。对该高产突变株进行5L罐发酵实验,发酵84h测得α-鼠李糖苷酶活为631.9U/mL。用新建立的方法选育高产α-鼠李糖苷酶的高产菌株,不仅具有较高的筛选效率,还具有良好的准确性。; 陈华根倪辉李利君肖安风苏文金蔡慧农; 关键词：黑曲霉诱变育种发酵

黑曲霉DB056产柚苷酶发酵条件初步优化被引量：18: 2010年; 以α-鼠李糖苷酶活力和柚苷酶活力为考察指标,研究了发酵条件对黑曲霉DB056产柚苷酶的影响。结果表明:发酵温度、菌丝形态、培养基初始pH、接种量和装液量对黑曲霉DB056产柚苷酶都具有重要影响。初步优化得到黑曲霉DB056产柚苷酶的条件为:培养基初始pH8.0,玻璃珠添加个数5个,装液量45mL,接种量7%,发酵温度34℃,摇床转速190r/min。采用此条件进行发酵,高效液相色谱法检测α-鼠李糖苷酶活力最大可达1076.32U/mL,柚苷酶活力最大可达420.68U/mL,分别比初始条件提高了72.35%和78.03%。黑曲霉DB056不仅在对数生长期能快速合成柚苷酶,在稳定期及衰亡期也会不断地分泌柚苷酶。阐明了发酵条件对黑曲霉DB056产柚苷酶的影响并获得了经过初步优化的发酵条件,为进一步优化发酵条件,提高黑曲霉DB056产柚苷酶的产量奠定了良好的基础。; 吴升山倪辉肖安风李利君蔡慧农苏文金; 关键词：黑曲霉发酵条件柚苷酶

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福建省农科院青年科技人才创新基金(2007F3073)