国家科技重大专项(2008ZX08004-004) 作品数:18 被引量:83 H指数:5 相关作者: 董英山 赵洪锟 张春宝 李玉秋 刘晓东 更多>> 相关机构: 吉林省农业科学院 南京农业大学 东北农业大学 更多>> 发文基金: 国家科技重大专项 国家高技术研究发展计划 国家自然科学基金 更多>> 相关领域: 农业科学 生物学 医药卫生 更多>>
烟草野火病菌hrpZ基因的克隆及蛋白的原核表达 被引量:8 2009年 采用PCR方法从烟草野火病病原菌Psta218中扩增harpin编码基因hrpZ,将其克隆到原核表达载体pGEX-4T-1上,获得重组表达质粒pGEX-hrpZPsta。将重组质粒pGEX-hrpZPsta转化至大肠杆菌BL21(DE3)菌株,得到重组大肠杆菌BL21/pGEX-hrpZPsta。经IPTG诱导得到14.7 kD的蛋白质。该蛋白质与其他已发现的harpins一样,能够使烟草等植物产生过敏性坏死反应、富含甘氨酸、热稳定以及对蛋白酶K敏感。 姜兆远 邹晓威 高洁关键词:烟草 野火病菌 HARPIN 白三叶基因工程改良研究进展 被引量:2 2011年 白三叶(Trifolium repensL.)作为优良牧草和地被植物具有重要的应用价值。但其耐盐碱、干旱能力差等原因致使应用受到广泛限制,转基因技术的快速发展为白三叶种质创新提供了有效技术手段,为开展白三叶分子育种奠定了基础。本文就近30年来有关白三叶组织培养、转化方法、转基因遗传改良方面的研究进展进行了综述,并对其应用进行了展望。 齐广勋 王金刚 杨向东 郭东全 薛健 张原宇 李启云 董英山关键词:白三叶 基因改良 八种植物线粒体基因组结构特征分析与比较 被引量:5 2011年 比较来源于GenBank中发表的8种植物(烟草、拟南芥、甜菜、油菜、高粱、水稻、小麦和玉米)线粒体基因组(mtDNA)。结果显示,它们共同的特点是编码30-40个蛋白,3个核糖体RNA,15-30个tRNA,G+C含量在40%-45%之间;各植物线粒体基因组的编码区约占mtDNA的10%-20%。比较发现,虽然8种作物线粒体基因组大小存在较大差异,基因排列顺序不同,但它们都编码几乎相同的基因产物。 李玉秋 赵洪锟 谭化 刘晓东 张春宝 董英山关键词:单子叶植物 双子叶植物 线粒体 基因组 可转化人工染色体(TAC)文库载体DNA的制备 2011年 对可转化人工染色体(TAC)pYLTAC747NH/sacB文库载体DNA的制备条件进行了较系统的摸索和研究。结果表明,该文库载体经碱裂解法提取、QIAGEN Plasmid Mini kit纯化后,可获得较纯净的载体DNA。对其闭环载体DNA分别用不同酶量的Hind III酶切处理,经琼脂糖凝胶电泳检测得出其最佳Hind III完全酶切条件为2 U Hind III/μg闭环载体DNA、37℃酶切30 min;分别用0.5 MBU和1 MBU HK脱磷酶/μg对其线性载体DNA进行脱磷处理,经电泳和载体自连产物电转化检测表明其适宜的完全脱磷条件为1 MBU HK脱磷酶/μg线性载体DNA,30℃脱磷1 h;将所制备的线性载体DNA与λDNA/Hind III酶切片段进行连接,连接产物转化频率较高,其电转化大肠杆菌DH10B感受态细胞频率可达到9.6×108。 李晓玲 李克秀 赵洪锟 赵茂林 董英山关键词:酶切 脱磷 不同蛋白质含量大豆结瘤特性与根瘤氮代谢物含量的比较分析 被引量:2 2011年 为了明确高蛋白野生大豆氮素积累规律,本试验选取3类不同蛋白质含量的大豆材料,在各生育期对根瘤生长特性及根瘤氮代谢物的含量变化进行研究,结果表明:籽粒蛋白质含量与R2~R8时期的根瘤数呈显著正相关。V6~R2期高蛋白野生大豆根瘤数增加较快,整个生育期根瘤重不断增加。三种类型大豆的血红蛋白含量、单株血红蛋白总量在R2~R8期与籽粒蛋白质含量呈显著正相关。在V6到R8期高蛋白野生大豆血红蛋白含量、总量都明显高于其它两种类型大豆材料,差异性均达到显著水平。R2~R8期三种类型大豆游离氨基酸含量、酰脲含量均呈下降趋势,高蛋白野生大豆游离氨基酸含量低于、而酰脲含量却又高于其它两种类型材料,且差异性显著。说明高蛋白野生大豆根瘤衰老较慢、根瘤内氮代谢物含量丰富,生育后期仍具有较强的酰脲合成与运输能力是形成该类型大豆籽粒高蛋白质含量的原因之一。 杨美英 王乾钦 赵洪锟 郑淑波 董英山关键词:籽粒蛋白质含量 大豆 根瘤 血红蛋白 游离氨基酸 植物病原细菌的Hrp致病岛与Ⅲ型泌出系统 植物病原细菌利用Hrp致病岛编码专化性的Ⅲ型泌出系统,这个泌出系统是细菌与寄主植物互作时必要的调节因子。Hrp致病岛含有hrp、hrc和hpa基因,这些基因构成Hrp致病岛的核心区域。其中,hrc基因编码的Hrc蛋白是Ⅲ... 张佳环关键词:HARPIN蛋白 文献传递 植物蛋白激酶研究进展 被引量:21 2011年 蛋白激酶是一类磷酸转移酶,其在细胞信号转导过程中起到较为重要作用。目前,在不同植物中分离了各种蛋白激酶基因。相关研究报道表明,这一类蛋白酶基因参与了植物的抗逆性、生长发育以及信号转导等一系列生命活动进程。着重从植物蛋白激酶分类、结构及其功能研究几个方面进行综述。 张春宝 赵丽梅 赵洪锟 董英山关键词:抗逆性 生长发育 信号传递 云南大豆品种抗虫性鉴定及评价方法研究 被引量:2 2012年 采用温室栽培接虫鉴定与田间套种自然鉴定相结合,对9个大豆育种新材料和品种进行了抗鳞翅目害虫鉴定及评价试验研究,用目测抗虫指数调查法,计算平均抗虫指数,得到综合抗虫指数进行评价。结果表明,大豆育种材料和品种12-1、滇豆6号、滇豆7号对鳞翅目害虫抗性表现为抗虫(R);大豆育种材料和品种11-1、29-1、67-1、89-1、滇豆4号、滇豆5号对鳞翅目害虫抗性表现为中抗(MR)。试验结果品种间差异明显,调查及评价方法简便易行,为大豆田间抗虫品种筛选及利用提供理论依据。 李向东 杨明英 耿志德 曹继芬 赵志坚 赵银月 裴卫华 王铁军关键词:大豆品种 大豆对大豆花叶病毒株系SC6和SC17抗病基因的精细定位 被引量:9 2013年 针对我国北方和长江流域大豆产区广泛分布的SMV株系SC6和SC17,利用2个抗病大豆品种Q0926和中豆35分别与感病品种南农1138-2和南农菜豆5号配制2个抗感杂交组合Q0926×南农1138-2和中豆35×南农菜豆5号以及一个抗抗组合Q0926×中豆35,研究3个组合的F1、F2、F2:3抗性遗传规律,探讨Q0926对SC6和中豆35对SC17及2个抗病品种对同一SMV株系抗性基因的等位关系,并对大豆对2个株系的抗病基因进行了标记定位。结果显示,Q0926×南农1138-2和中豆35×南农菜豆5号2个抗感杂交组合在分别接种SC6和SC17后,F1表现抗病,F2呈3抗∶1感分离比例,F2:3家系呈1抗∶2分离∶1感病的分离比率,表明Q0926对SC6和中豆35对SC17的抗病性分别由1对显性基因控制;抗抗组合Q0926×中豆35的F1和F2在接种2个株系后均未发现感病单株,表明Q0926与中豆35对SC6和SC17株系的抗病基因分别是等位或紧密连锁的。分别利用2个抗感组合的F2和F2:3群体对2个抗病基因的定位结果显示,第2染色体上的25个SSR标记与抗SC6的基因RSC6连锁,最近的2个标记与抗性基因RSC6的排列次序和遗传距离为BARCSOYSSR_02_0617(0.775cM)-RSC6-BARCSOYSSR_02_0621(0.519cM);第2染色体上的38个SSR标记与抗SC17的基因RSC17连锁。最近的2个标记与抗性基因RSC17的排列次序和遗传距离为BARCSOYSSR_02_0622(0.264cM)-RSC17-BARCSOYSSR_02_0627(0.262cM),其对应的物理区间分别为52kb和60kb。抗性遗传研究为抗大豆花叶病毒育种的亲本选配、后代选择提供了理论指导,抗性基因的标记定位研究为抗性基因的分子标记辅助选择和抗病基因的图位克隆奠定了基础。 阳小凤 杨永庆 郑桂杰 智海剑 李小红关键词:大豆 大豆花叶病毒 抗性遗传 等位性 大豆7S球蛋白α-亚基缺失型种质创新 被引量:14 2010年 采用常规杂交育种方法,人工去雄、授粉,以10份综合农艺性状优良的黑龙江省主栽品种(或优良品系)为母本、亚基组成为(α'+α+11S酸性亚基)-缺失型育种材料日B为父本进行有性杂交。将F1杂交种南繁,单粒点播、单株收获得到F2代分离群体。聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)法分析表明,F1代杂交种子7S球蛋白α'-与α-亚基的表现型全部为正常型。在杂交F2代种子中获得了具有中国大豆遗传背景的α-缺失、(α+A1aA1bA2)-缺失、A3-缺失、(α'+A4)-缺失和(α'+α)-缺失的贮藏蛋白亚基组成新类型种质,为我国大豆蛋白组分育种选择提供了重要的中间材料。 刘珊珊 滕卫丽 姜自芹 张彬彬 葛玉君 刁桂珠 郑天慧 曾蕊 吴帅 李文滨关键词:大豆 种质创新