国家自然科学基金(30170429)
- 作品数：16 被引量：277H指数：13
- 相关作者：谌贻璞董鸿瑞高艳丽陈文张媺更多>>
- 相关机构：中日友好医院北京大学北京大学第三医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金卫生部部属(管)医院临床学科重点项目国家中医药管理局基金资助项目更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 益肾软坚散含药血清拮抗马兜铃酸对人近端肾小管上皮细胞的作用被引量：21
- 2005年
- 目的:研究益肾软坚散含药血清能否拮抗马兜铃酸(aristolochicacid,AA)诱发的人近端肾小管上皮细胞株(HKC)促纤维化效应。方法:用马兜铃酸钠盐(AA Na,40mg·L-1)加或不加10%大鼠含药血清与HKC细胞孵育,而后检测信使RNA(mRNA)和蛋白质表达。结果:大鼠含药血清能显著下调AA Na刺激后HKC细胞对转化生长因子β1(TGFβ1)、结缔组织生长因子(CTGF)和金属蛋白酶组织抑制物1(TIMP1)mRNA及蛋白质的高表达(P<0.05),但对纤溶酶原激活物抑制物1(PAI1)mRNA及蛋白质高表达无显著作用(P>0.05)。结论:益肾软坚散含药血清可下调AA刺激的HKC细胞促细胞外基质(ECM)合成因子及抗ECM降解因子的表达。
- 方静谌贻璞杨彦芳张媺
- 关键词：人近端肾小管上皮细胞含药血清马兜铃酸软坚散拮抗金属蛋白酶组织抑制物
- 益肾软坚散对慢性马兜铃酸肾病大鼠模型肾间质纤维化的保护作用被引量：35
- 2005年
- 目的研究中药方剂益肾软坚散能否对慢性马兜铃酸肾病(CAAN)大鼠的肾损害起到保护作用。方法雄性SD大鼠18只分为3组,每组6只。模型组予关木通浸膏水溶液间断灌胃制成CAAN动物模型,中药组在造模基础上同步予益肾软坚散水煎剂灌胃,对照组予自来水灌胃。于1、4、8、12、16周分别检测大鼠体重、24h尿蛋白定量、尿β2微球蛋白、血清肌酐(SCr);并于第16周末处死大鼠,取肾脏组织,切片做Masson染色观察肾脏病理变化;用RT-PCR及免疫组化方法检测肾组织中转化生长因子-β1(TGF-β1)、结缔组织生长因子(CTGF)、纤溶酶原激活物抑制物-1(PAI-1)、金属蛋白酶组织抑制物-1(TIMP-1)和Ⅰ型胶原(ColⅠ)mRNA及蛋白质表达。结果与对照组比较,模型组大鼠24h尿蛋白定量、尿β2微球蛋白、SCr自造模后1周出现不同程度的上升(P<0.01,P<0.05);16周时肾间质纤维化面积显著扩大(P<0.01);肾组织内TGF-β1、CTGF、PAI-1、TIMP-1及ColⅠ各指标的mRNA及蛋白质表达均显著上调(P<0.01)。中药干预后,上述上调指标除24h尿蛋白定量外均被显著抑制(P<0.01,P<0.05)。结论益肾软坚散可抑制肾间质内细胞外基质蓄积,从而改善CAAN的肾间质纤维化及肾功能。
- 张聪谌贻璞杨彦芳董鸿瑞
- 关键词：马兜铃酸间质纤维化慢性马兜铃酸肾病肾间质纤维化大鼠模型软坚散
- 波生坦及缬沙坦对马兜铃酸肾病大鼠肾间质纤维化的影响被引量：15
- 2005年
- 目的研究非选择性内皮素受体拮抗剂(波生坦)及血管紧张素Ⅱ1型受体拮抗剂(缬沙坦)能否抑制慢性马兜铃酸肾病(CAAN)大鼠模型肾间质纤维化的进程。方法雄性SD大鼠予关木通浸膏水溶液灌胃致成CAAN模型,并分为模型组,波生坦组(100mg·kg-1·d-1灌胃)和缬沙坦组(30mg·kg-1·d-1灌胃)。对照组予自来水灌胃。每组动物6只。检测大鼠体重、24h尿蛋白定量、β2微球蛋白(β2mG)、血清肌酐(SCr);于第16周处死大鼠,取肾组织切片做Masson染色;用RTPCR及免疫组化方法检测肾组织中转化生长因子β1(TGFβ1)、结缔组织生长因子(CTGF)、纤溶酶原激活物抑制物1(PAI1)、金属蛋白酶组织抑制物1(TIMP1)和Ⅰ型胶原(ColⅠ)mRNA及蛋白质的表达。结果与对照组相比,CAAN模型组大鼠24h尿蛋白定量、尿β2mG、SCr到实验后期均显著上升(P<0.05或0.01);肾间质纤维化面积显著性扩大(P<0.01);肾组织内TGFβ1、CTGF、PAI1、TIMP1及ColⅠ各指标的mRNA及蛋白质表达均显著上调(P<0.01)。在波生坦及缬沙坦干预组上述上调指标均被显著抑制(P<0.05或0.01),而两干预组间无明显差异(P>0.05)。结论波生坦及缬沙坦能抑制CAAN大鼠肾间质纤维化进程,延缓肾损害进展,此作用可能是通过抑制促细胞外基质合成因子(TGFβ1、CTGF)及抑制抗细胞外基质降解因子(PAI1、TIMP1)而获得。
- 张聪谌贻璞董鸿瑞邱长斌
- 关键词：马兜铃酸肾病动物试验药物治疗肾间质纤维化
- 益肾软坚散含药血清拮抗马兜铃酸对人肾间质成纤维细胞的作用被引量：5
- 2004年
- 目的研究益肾软坚散含药血清能否干预马兜铃酸 (aristolochicacid ,AA)对人肾间质成纤维细胞 (humanrenalinterstitialfibroblasts,hRIFs)的致细胞外基质 (excellularmatrix ,ECM )蓄积效应。方法用马兜铃酸钠盐 (AA Na ,4 0 μg/ml)加或不加 10 %大鼠含药血清与hRIFs孵育 ,而后检测hRIFs对转化生长因子 β1(transforminggrowthfactor β1,TGF β1)、结缔组织生长因子 (connectivetissuegrowthfactor,CTGF)、纤溶酶原激活物抑制物 1(plasminogenactivatorinhibitor 1,PAI 1)、金属蛋白酶组织抑制物 1(tissueinhibitorofmetalloproteinase 1,TIMP 1)和Ⅰ型胶原 (typeⅠCollagen ,ColⅠ )的mRNA(RT PCR方法 )和蛋白质表达(ELISA或Westernblot方法 )。结果大鼠含药血清能显著下调AA Na刺激后hRIFs对TGF β1、CTGF、TIMP 1和ColⅠmRNA及蛋白质高表达 (P <0 .0 5 ) ,但不影响PAI 1mRNA及蛋白质高表达 (P >0 .0 5 )。结论益肾软坚散含药血清可通过下调hRIFs促ECM合成因子及抗ECM降解因子的表达 。
- 方静谌贻璞杨彦芳张媺
- 关键词：含药血清RIF软坚散马兜铃酸肾间质成纤维细胞PAI-1
- 慢性马兜铃酸肾病患者伴发泌尿系统肿瘤被引量：29
- 2004年
- 目的探讨慢性马兜铃酸肾病患者伴发泌尿系肿瘤情况。方法回顾分析102例慢性马兜铃酸肾病患者中4例伴发泌尿系肿瘤患者的临床资料。结果(1)4例患者均有长期间断小剂量服含马兜铃酸药物史,并被确诊为慢性马兜铃酸肾病,慢性肾功能不全;(2)4例均有明显血尿,相差显微镜检查呈均一红细胞尿,其中2例有肉眼血尿;(3)膀胱镜检查、逆行尿路造影及手术证实,3例为膀胱乳头状移行细胞癌,1例为肾盂移行细胞癌。结论慢性马兜铃酸肾病患者若出现明显均一红细胞血尿时,即应高度警惕泌尿系肿瘤发生。
- 陈文谌贻璞李安
- 关键词：慢性马兜铃酸肾病泌尿系统肿瘤慢性肾功能不全肾间质纤维化肾小管萎缩
- 慢性马兜铃酸肾病动物模型的建立及牛磺酸对其早期保护作用被引量：16
- 2003年
- 目的:建立大鼠慢性马兜铃酸肾病模型,初步观察牛磺酸对其保护作用。方法:雄性 SD 大鼠分为3组,观察12周。模型组给关木通浸膏水溶液间断灌胃;治疗组在饮水中补充1%牛磺酸;对照组仅给自来水灌胃。第1、4、8和12周每组各处死6只,测体重,取血、尿和肾脏标本做相关检查。结果:模型组各周体重显著低于对照组(P<0.05或 P<0.01),血肌酐与体重比值(SCr/BW)和24h 尿蛋白定量显著高于对照组(P<0.01)。治疗组第1、4周 SCr/BW 和24h 尿蛋白定量显著低于模型组(P<0.01),模型组与治疗组体重比较差异无显著性(P>0.05)。光镜下见模型组和治疗组逐渐出现肾小管变性、萎缩及间质纤维化,第4周起纤维化面积显著高于对照组(P<0.01),而两组间比较差异无显著性(P>0.05)。电镜下见模型组和治疗组肾小管上皮细胞凋亡,微绒毛脱落,线粒体肿胀,溶酶体及吞噬泡增多;第4周起肾间质出现胶原纤维,并逐渐增多。对照组无明显病变。结论:建立了关木通致大鼠慢性马兜铃酸肾病模型;牛磺酸对该模型早期肾损伤可能发挥一定的保护作用。
- 高艳丽谌贻璞董鸿瑞陈文邹万忠
- 关键词：马兜铃酸间质纤维化牛磺酸
- 薄层扫描法测定龙胆泻肝丸中马兜铃酸的含量被引量：18
- 2002年
- 目的:用薄层扫描法对龙胆泻肝丸中马兜铃酸进行定量分析。方法:双波长反射法锯齿扫描,λ_S=395nm,λ_R=500nm;狭缝宽度:0.4 mm×0.4 mm;线性化器:SX=3;展开剂:苯-甲醇-36％醋酸(17:2:0.2)。结果:马兜铃酸标准曲线线性范围0.9～4.5μg(r=0.9998),平均回收率96.78％(n=6)。结论:方法准确,回收率好。
- 付桂香赵世萍陈文谌贻璞张相林刘晓高艳丽
- 关键词：薄层扫描法龙胆泻肝丸马兜铃酸
- 慢性马兜铃酸肾病肾间质纤维化发病机制的初步探讨被引量：48
- 2005年
- 目的制作大鼠慢性马兜铃酸肾病模型,初步探讨该模型肾间质纤维化的发病机制。方法雄性SD大鼠随机分为2组,模型组给关木通浸膏水溶液间断灌胃,对照组仅给自来水灌胃。灌胃后第4、8和12周每组各处死6只大鼠,留取两侧肾脏,应用实时定量反转录聚合酶链反应(realtimequantitativeRT-PCR)和免疫组织化学方法研究两组大鼠肾脏Ⅰ型胶原(ColⅠ)、转化生长因子-β1(TGF-β1)、结缔组织生长因子((CTGF)、纤溶酶原激活物抑制物-1(PAl-1)和金属蛋白酶组织抑制物-1(TIMP-1)的mRNA及蛋白质表达。结果模型组大鼠用药后第4周肾实质ColⅠ、TGF-β1、CTGF、PAI-1及TIMP-1mRNA表达显著上调,分别达对照组的9.31倍、5.16倍、1.79倍、8.66倍及2.54倍(P<0.01或P<0.05);第8周除TIMP-1有所升高外其余指标mRNA表达均有所下降,但与对照组比较差异仍有统计学意义(P<0.01或P<0.05);第12周全部指标mRNA表达继续下降,除CTGF外其余指标与对照组比较差异仍有统计学意义(P<0.01或P<0.05)。模型组大鼠用药后第4周ColⅠ、TGF-β1、CTGF、PAI-1及TIMP-1在肾小管间质的阳性染色面积显著扩大,分别达对照组的2.24倍、1.43倍、1.13倍、1.17倍及1.24倍(P<0.01),第8周和第12周全部指标阳性染色面积持续扩大(P<0.01)。结论慢性马兜铃酸肾病大鼠肾间质?
- 高艳丽谌贻璞董鸿瑞丛笑
- 关键词：慢性马兜铃酸肾病肾间质纤维化发病机制RT-PCR免疫组织化学
- 通过共培养观察被马兜铃酸活化后的肾小管上皮细胞对肾间质成纤维细胞的作用被引量：16
- 2004年
- 目的通过共培养观察被马兜铃酸钠盐(AA-Na)活化后的肾小管上皮细胞株(HK-2)对肾间质成纤维细胞(hRIFs)的作用。方法用AA-Na刺激HK-2,16h后用此活化的HK-2与hRIFs共培养(培养液中加或不加抗TGF-β1抗体),48h后检测hRIFs细胞层中Ⅰ型胶原(ColⅠ)含量。结果(1)AA-Na(20μg/ml)对HK-2无刺激增殖、转分化及细胞毒作用。(2)用此浓度AA-Na刺激HK-216h,能使HK-2分泌TGF-β1显著增加(P<0.05)。(3)用此活化后的HK-2与hRIFs共培养48h,能使后者合成ColⅠ显著增多(P<0.05);而抗TGF-β1抗体(1.0或2.0μg/ml)能部分抑制此反应(P<0.05)。结论被AA-Na刺激活化的HK-2能分泌TGF-β1促进hRIFs合成ColⅠ。
- 方静谌贻璞张媺
- 关键词：RIF共培养马兜铃酸肾小管上皮细胞
- 马兜铃酸对人肾细胞作用的实验研究被引量：62
- 2002年
- 目的 探讨马兜铃酸(AA)对体外培养的人肾小管上皮细胞株(HK-2)及人肾间质成纤维细胞(hRIFs)的作用。方法 (1)用MTT比色法检测细胞增殖反应。(2)用乳酸脱氢酶(LDH)释放试验检测AA的细胞毒作用。(3)应用RT-PCR观察细胞Ⅰ型胶原(Col Ⅰ)、转化生长因子β(TGF-β)、纤溶酶原激活物抑制物1(PAI-1)、基质金属蛋白酶1(MMP-1)及金属蛋白酶组织抑制物1(TIMP-1)的mRNA表达。结果 (1)AA在10、20和40 μg/ml时对HK-2及hRIFs无刺激增殖及细胞毒效应(P>0.05);而在80和160μg/ml时却能明显杀伤上述细胞(P<0.01)。(2)40μg/ml浓度的AA孵育细胞16 h,可显著上调HK-2的TGF-β、PAI-1和TIMP-1 mRNA表达(P<0.05),也可上调hRIFs的Col Ⅰ、TGF-β、PAI-1和TIMP-1 mRNA的表达(P<0.05);而10和20μg/ml浓度的AA未观察到上述作用。结论 80和160μg/ml AA对HK-2有明显细胞毒作用,此作用可能与急性马兜铃酸肾病发病相关;而40μg/ml AA可上调HK-2及hRIFs的TGF-β、PAI-1和TIMP-1 mRNA表达,并能上调hRIFs的Col Ⅰ mRNA表达,此作用可能与慢性马兜铃酸肾病发病相关。
- 唐功耀田雪飞谌贻璞
- 关键词：马兜铃酸成纤维细胞肾小管上皮细胞马兜铃酸肾病发病机制
