陕西省科学技术研究发展计划项目(2006K14-G3) 作品数:9 被引量:55 H指数:5 相关作者: 马志伟 王荣 王晓娟 张邦乐 吴织芬 更多>> 相关机构: 第四军医大学 西安交通大学口腔医院 第四军医大学口腔医院 更多>> 发文基金: 陕西省科学技术研究发展计划项目 陕西省卫生厅科学研究基金 更多>> 相关领域: 医药卫生 理学 更多>>
盐酸米诺环素微球凝胶的制备及对大鼠实验性牙龈炎的抑制作用 被引量:5 2007年 目的:制备含盐酸米诺环素微球的功能性壳聚糖温敏凝胶,并观察载药凝胶对大鼠牙龈炎模型的抑菌效果。方法:将小分子药物盐酸米诺环素先制备成微球,共混于温敏凝胶中,观察其理化性质及释药性能;建立大鼠的实验性牙龈炎模型,观察载药凝胶对实验性牙龈炎模型的消炎效果。结果:实验制得的缓释凝胶,T50%可延长至4.24d;动物实验初步结果显示,与对照组相比实验组的牙龈指数和探诊深度有明显的减少,炎症细胞浸润数量少,毛细血管扩张程度轻。结论:加载盐酸米诺环素的缓释凝胶对大鼠实验性牙龈炎有一定的消炎作用。 王荣 马志伟 王晓娟 王勤涛 陈悦 常晓亮关键词:米诺环素 明胶微球 温敏凝胶 牙龈炎 缓释骨形态发生蛋白-2的壳聚糖温敏凝胶促进牙周组织再生的实验研究 被引量:22 2008年 目的观察自制的加载重组人骨形态发生蛋白-2(rhBMP-2)的壳聚糖温敏凝胶修复牙周组织缺损的效果。方法选取3只健康雄性杂种犬制备前磨牙区人工Ⅱ度根分叉区组织缺损模型,随机分为空白对照组、空白凝胶组及载药凝胶组,术中先严密缝合组织瓣,然后对空白凝胶组及载药凝胶组区域分别注射先期配制并消毒好的空白凝胶和载药凝胶,术后8周取材行大体及组织学观察。结果载药凝胶组出现明显的牙周组织再生,而空白对照组和空白凝胶组仅有少量的牙周组织再生。载药凝胶组与空白对照组及空白凝胶组均有统计学差异(P<0.05),空白对照组和空白凝胶组相比,没有统计学差异。结论载rhBMP-2的壳聚糖温敏凝胶可有效促进牙周组织再生,同时简化手术操作,是一项有潜力的牙周组织再生手段。 马志伟 张勇杰 吴织芬 王荣 朱浩 李媛 许杰 刘青关键词:牙周组织再生 温敏凝胶 壳聚糖 骨形态发生蛋白-2 可生物降解的盐酸米诺环素微球凝胶的研制及其含量测定方法 被引量:7 2008年 目的:制备盐酸米诺环素微球的功能性壳聚糖温敏凝胶。方法:将小分子药物米诺环素先制备成盐酸米诺环素微球,共混于壳聚糖温敏凝胶中,观察其理化性质及释药性能;并建立药物的HPLC测定方法。结果:通过试验筛选微球、凝胶制备工艺,温敏凝胶系统的流变学性质几乎未受加入药物的影响;实验制得的缓释凝胶,T50%可延长至4.24d;HPLC方法如下:线性范围为99~495ng-mL^-1,标准曲线为A=1170.6C+52235,r=0.9995。结论:本实验为可生物降解的盐酸米诺环素微球凝胶的进一步研究奠定了初步基础。 王荣 马志伟 王晓娟 顾宜 黄永刚关键词:盐酸米诺环素 温敏凝胶 高效液相色谱 rAAV-hBMP2-GFP载体感染滴度测定方法的建立 2010年 目的建立携骨形态发生蛋白2基因的重组腺相关病毒载体(rAAV-hBMP2-GFP)感染滴度测定的方法,并制备高滴度的rAAV-hBMP2-GFP病毒液,为进一步实验hBMP2诱导大鼠牙槽骨骨缺损修复的基因治疗提供有利的工具。方法通过分析腺相关病毒-HT1080(AAV-HT1080)细胞接种量、培养时间及病毒吸附时间等参数,建立应用荧光计数法测定rAAV-hBMP2-GFP病毒感染滴度的方法,并分析其精密性及检测病毒的稳定性。结果 AAV-HT1080细胞的最佳接种浓度、培养时间及病毒吸附时间分别为3×105个/孔、24h及48h,在此条件下收获的病毒液的感染滴度最高可达3.82×1011/ml,所建立的荧光计数检测方法精密性较好。制备的病毒液的平均感染滴度为3.60×1011/ml,4℃和37℃保存7d及反复冻融5次,稳定性良好。结论建立了rAAV-hBMP2-GFP感染滴度的测定方法,并制备了高滴度及滴度稳定的rAAV-hBMP2-GFP病毒液。 王敏 程政 姚天华 代泉 郭秀全壳聚糖温敏凝胶共混环糊精缓释氯己定的体外实验 被引量:5 2007年 目的:探索壳聚糖温敏凝胶缓释广谱抗菌药物氯己定的解决办法。方法:实验于2006-03/06在解放军第四军医大学化学实验室进行。将小分子药物氯己定先通过饱和水溶液法与β-环糊精制备成包结物,再共混于壳聚糖温敏凝胶中,制备载药凝胶系统。根据不同配方分为4组:空白凝胶组:壳聚糖温敏凝胶溶液;β-环糊精/氯己定包结物6mg或12mg组:壳聚糖温敏凝胶溶液+6mg或12mgβ-环糊精/氯己定包结物;氯己定组:壳聚糖温敏凝胶溶液+4.8mg氯己定。检测最终的凝胶体系的流变学性质、稳定性、体外释药特性。结果:①氯己定与β-环糊精的包合率为(40.11±4.28)%。②流变学检测显示,β-环糊精/氯己定包结物6mg或12mg组凝胶黏度随温度升高而略有升高,但其变化趋势与空白凝胶组无差异;恒温37℃条件下,此2组凝胶黏度随时间波动性变化,但其变化趋势与空白凝胶组无差异。③稳定性检测结果:37℃条件下,无论是否加载药物,溶液都在8min左右形成稳定的凝胶,凝胶外观在1个月内无明显变化。④体外释放测定结果:实验条件下,氯己定组大约12h即释放完毕,而β-环糊精/氯己定包结物6mg组在40d时,仅释放药物的60%左右。结论:氯己定共混于壳聚糖温敏凝胶后,温敏凝胶系统的性质几乎未受加入药物的影响,而氯己定从凝胶系统中释放的速度大大减慢,药物持续释放可保持1个月以上,达到了缓释的目的。 马志伟 王荣 吴织芬 陈栋 张邦乐 何炜 王晓娟 王勤涛 周威 刘青 董广英关键词:温敏凝胶 Β-环糊精 氯己定 缓释 一种新型壳聚糖固载环糊精分子的合成 被引量:6 2007年 以β-环糊精(-βCD)为原料,经过对甲苯磺酰化、胺化制得胺化环糊精(3);以壳聚糖为原料,制备O-羧甲基壳聚糖(4);4的羧基与3的氨基在催化剂EDC{1-[3-(D im ethyl am ino)propyl]-3-ethylcarbod iim ide hydrochlo-ride}作用下水相反应,制得了一种新型壳聚糖固载环糊精分子(1),总收率29%,-βCD表观固载量9.5%。1的结构经1H NMR和IR表征。 马志伟 张邦乐 何炜 吴织芬 孙纪元 王勤涛关键词:Β-环糊精 壳聚糖 固载 人骨形态发生蛋白2基因治疗大鼠牙槽骨缺损的实验研究 被引量:5 2010年 目的:观察重组腺相关病毒(rAAV)介导的人骨形态发生蛋白2(hBMP2)对大鼠实验性牙槽骨缺损的修复作用。方法:将30只实验大白鼠随机分为实验组和对照组。在两组动物下颌1 1牙间牙槽骨人工制备2mm×2mm骨缺损区。实验组骨缺损区植入浸有携目的基因hBMP2和标记基因绿色荧光蛋白(GFP)的重组腺相关病毒液(rAAV-hBMP2-GFP)的明胶海绵块,对照组植入只浸有携GFP的空病毒液(AAV-GFP)的明胶海绵块。术后15d、30d、60d分别处死动物,进行放射学和组织学观察。结果:1两组样本牙槽骨缺损处的骨密度值随时间的增加而增高;在15d、30d、60d,实验组样本牙槽骨缺损处骨密度值(0.062,0.236,0.456)均高于对照组(0.054,0.158,0.216),其中30d、60d两组有显著性差异(P<0.05,P<0.01)。2术后15d两组样本牙槽骨缺损处周边组织均可见到GFP;术后30d、60d,实验组样本较对照组绿色荧光强度明显加强。3实验组:术后15d,牙槽骨人工缺损区周围成纤维细胞和毛细血管生长活跃,周边有骨样组织和少量的骨组织形成。术后30d,骨缺损处新骨数量增多。术后60d,缺损区几乎被新生骨组织充满;对照组:术后15d可见少量炎性细胞,成纤维细胞和毛细血管生长活跃;术后30d,骨缺损区周边可见成骨细胞和少量骨样组织;术后60d,骨缺损区边缘有少量新骨沉积,腔内被纤维组织充满。结论:rAAV-hBMP2-GFP成功修复大鼠实验性牙槽骨缺损。 王敏 程政 姚天华 代泉 郭秀全关键词:骨形态发生蛋白质类 基因疗法 牙槽骨质丢失 pAAV-hBMP2-IRES质粒的构建及病毒包装 被引量:3 2009年 目的:构建含人骨形态发生蛋白2(hBMP2)基因的重组腺相关病毒载体。方法:根据hBMP-2基因序列设计引物,上游引入SalI酶切位点,下游引入EcoRI酶切位点,以胚胎骨髓组织总RNA为模版进行rt-PCR反应扩增hBMP-2基因。将hBMP-2片段定向亚克隆进pAAV-IRES-GFP的MCS中,获得重组表达质粒(pAAV-hBMP2-IRES-GFP),采用磷酸钙沉淀法将该质粒与包装质粒pAAV-RC和辅助质粒pHelper共同转染到AAV293细胞,进行rAAV-hBMP2-IRES-GFP重组病毒包装。收获的病毒液按氯仿处理、PEG/NaCl沉淀、氯仿反复抽提法浓缩纯化,采用荧光计数法测定重组病毒感染滴度。结果:酶切鉴定、测序结果表明,hBMP2成功克隆入pAAV-IRES-GFP载体中。在AAV293细胞中包装出重组腺相关病毒载体的感染滴度为3.6×1011/ml。结论:成功制备了rAAV-hBMP2载体,可满足骨组织工程的需要。 程政 王敏 石建峰 时志斌关键词:人骨形态发生蛋白 腺相关病毒 骨组织工程 同时缓释骨形态发生蛋白和氯己定的功能性壳聚糖温敏凝胶的制备 被引量:7 2007年 壳聚糖温敏凝胶是一种新型的可注射、在体固化的载体材料,该材料在室温条件下呈生理中性的溶液状态,在37℃左右可由溶液转变成水凝胶。该水凝胶对大分子药物具有良好的缓释效能,但对小分子药物缓释效能极差。为制备同时缓释生长因子重组人骨形态发生蛋白-2(recombined human bone morphogenetic protein-2,rhBMP-2)和抗菌药物氯己定的功能性壳聚糖温敏凝胶,将小分子药物氯己定先与β-环糊精制备成包结物,再将rhBMP-2与β-环糊精/氯己定包结物共混于壳聚糖温敏凝胶中,通过HAAKE粘度测量仪,对比加入目标药物前后系统的流变学性质,并且分别通过高效液相(high performance liquid chromatography,HPLC)和酶联免疫吸附(enzyme-linkedimmunosorbent assay,ELISA)方法测量目标药物的体外释放性质,温敏凝胶系统的流变学性质几乎未受加入药物的影响。而氯己定从凝胶系统中释放的速度大大减慢,药物持续释放可保持1月以上。同时,rhBMP-2也获得较好的缓释效果。通过先行环糊精包结共混的方法,成功制备同时缓释rhBMP-2和氯己定的功能性温敏凝胶。 马志伟 王荣 吴织芬 陈栋 张邦乐 何炜 王晓娟 刘青 许杰 朱浩关键词:温敏凝胶 重组人骨形态发生蛋白-2 氯己定 缓释