国家自然科学基金(30700847)
- 作品数：9 被引量：58H指数：4
- 相关作者：朱庆棠刘小林郑灿镔江丽顾立强更多>>
- 相关机构：中山大学附属第一医院解放军第401医院广州中大医疗器械有限公司更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家高技术研究发展计划广东省自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 灵长类动物桡神经缺损修复模型的功能学评价
- 2013年
- 目的 探讨灵长类动物桡神经缺损修复后功能学的评价方法.方法 解剖3只猕猴桡神经,建立5只猕猴双侧桡神经25 mm缺损的模型,分别用自体神经（A组）及去细胞猪神经（B组）桥接神经缺损（5侧/组）.术后观察猕猴一般情况及伸腕活动;于术前、术后1周、术后5个月,诱导、测量并计算术后累积最大伸腕角度（DEmax）和伸腕角度恢复率（R）以评价神经功能的修复效果.结果 桡神经在桡侧腕长伸肌第一肌支发出点以近可显露长度为52 ～ 62 mm,直径为3.3～4.1 mm;术后猕猴即时出现垂腕、垂指畸形,一般情况好,术后5个月A、B组DEmax和R的均值分别为120°、96°和99％、69％.结论 该模型安全、简便,可动态、定量评价神经功能恢复情况.
- 黄喜军朱庆棠江丽郑灿镔朱昭炜胡军何波路庆森许银峰
- 关键词：周围神经损伤神经再生猕猴
- 人类外周神经在化学萃取前后的组织形态变化研究
- 2009年
- 目的研究人类外周神经在化学萃取前后的组织形态变化,探讨化学萃取法制备人类长段粗大去细胞神经的可行性。方法用Triton X-100和脱氧胆酸钠对人体长段胫神经作不同次数的萃取处理,经常规HE染色、砂罗铬花青、网状纤维组织化学染色和S-100免疫组织化学染色后,在光镜下观察神经萃取前后的组织形态变化,并比较不同萃取次数对神经结构的影响。结果人体长段胫神经经2次萃取后,其轴突、髓鞘、许旺细胞及其他结缔组织中的细胞均已消失,仅见网格纤维,而神经基底膜管、神经束膜等纤维性支架保存完整,与未经萃取的神经相仿。萃取1次者仍残留少量细胞碎屑,而萃取3次者,细胞清除更彻底,但纤维性支架结构明显破坏。结论人类长段粗大神经干经化学萃取后不含细胞,而保留有完整的纤维性支架结构。化学萃取法制备人类长段粗大去细胞神经可行。
- 赖英荣朱庆棠刘小林
- 关键词：外周神经化学萃取
- 去细胞同种异体神经修复材料临床应用初步报告被引量：22
- 2009年
- 目的观察去细胞同种异体神经修复材料（hANG）修复周围神经缺损的安全性和临床疗效。方法对指固有神经缺损10～20mm4例5侧，用hANG（广州中大医疗器械有限公司提供）移植桥接神经缺损，其中急诊一期手术移植3例4侧，二期手术移植1例1侧，均为单侧指固有神经移植。在10倍手术显微镜下进行神经清创修复，确保移植物两端的神经断端均无损伤，以9-0显微缝合线端端间断缝合。未使用免疫抑制药物。术后随访1～3个月，通过手术部位物理检查及血生化和免疫检测以评价hANG移植的安全性。采用英国医学研究会评定标准评价指神经功能，以观察hANG修复指神经缺损的临床疗效。结果4例伤口均一期愈合，未发生免疫排斥反应、过敏性反应、感染、肝肾毒副作用等不良反应。术后1～3个月血生化检测均正常。所有hANG移植侧指神经功能恢复良好，其中2例移植侧术后3个月两点分辨觉为8mm（S3^＋，优）。结论hANG移植修复指神经缺损在短期内未发现移植物被排斥或对人体产生毒性反应，神经功能恢复良好。
- 丁小珩刘小林刘育杰姜凯屈志刚张宏勋焦鸿生方光荣顾立强朱庆棠李智勇何波朱家恺
- 关键词：周围神经神经移植去细胞神经
- 富血小板血浆对大鼠许旺细胞生物学行为的影响被引量：8
- 2013年
- 目的观察不同浓度的富血小板血浆（PRP）对体外培养的许旺细胞（SCs）增殖、分泌功能及迁移的影响，探讨其促进周围神经再生的可能作用机制。方法从SD大鼠心脏穿刺取血，利用二次离心法制备PRP，对全血和PRP中血小板计数和血小板源性生长因子BB（PDGF—BB）和转化生长因子（TGF-B1）浓度测定；取3～5d龄的大鼠坐骨神经培养纯化SCs，将P1细胞分为实验组与对照组分别进行处理，实验组以含40．0％、20．0％、10．0％、5．0％和2．5％PRP的条件培养液干预，并设立空白对照组。于干预不同时间点采用CCK-8法测定SCs增殖活性情况，用实时荧光定量PCR方法检测细胞神经生长因子（NGF）和胶质细胞源神经营养因子（GDNF）mRNA表达的变化，ELISA检测SCs分泌NGF和GDNF的水平，Transwell小室检测各组SCs的迁移能力。结果PRP血小板回收率达65％，PDGF．BB和TGF-β1浓度明显高于血清（P〈0．01）；与空白对照组相比，低于20．0％浓度的PRP呈浓度依赖性促进SCs增殖和迁移，而40．0％浓度组细胞增殖和迁移受到抑制；SCs分泌的NGF和GDNF和其mRNA表达均较对照组明显增加，同样在低于20．0％浓度的范围内呈现量效关系，40．0％浓度组则显示抑制作用。结论PRP在适当浓度范围可以促进SCs的分裂增殖，合成分泌NGF和GDNF以及迁移的能力，具有潜在的促周围神经再生的作用。
- 郑灿镔朱庆棠刘小林黄喜军何彩凤江丽周翔朱昭炜
- 关键词：富血小板血浆神经生长因子许旺细胞细胞迁移周围神经
- 周围神经缺损修复材料临床适应证的考虑被引量：24
- 2013年
- 由于严重创伤、肿瘤切除、先天性畸形等原因造成的周围神经缺损的修复与重建是当前周围神经外科领域的一大难题。随着社会经济的快速发展、机械化程度的增加、交通日益发达和人口流动倍增，周围神经的损伤急速上升。据统计，欧洲每年有约30万周围神经损伤患者，美国有将近20万，我国也有此类残疾患者可能达数百万。
- 朱庆棠郑灿镔刘小林
- 关键词：周围神经缺损临床适应证先天性畸形严重创伤肿瘤切除外科领域
- PKH26标记法在组织工程神经种子细胞体内示踪中的应用被引量：2
- 2010年
- 目的探讨PKH26标记骨髓间充质干细胞（BMSCs）的效果及其应用于组织工程神经种子细胞体内示踪实验的可行性。方法取Wistar大鼠股骨和胫骨的骨髓，用全骨髓贴壁的方法分离、培养BMSCs。用PKH26荧光染料进行标记，荧光显微镜下观察标记效果，流式细胞仪检测荧光标记率，MTT法测定细胞的活性，体外成脂和成骨诱导鉴定细胞的分化能力，并与未标记细胞进行比较；使用显微注射的方法将BMSCs植入去细胞神经支架内制备成组织工程神经，于体外培养3d、5d,7d、14d，行组织切片，观察BMSCs在支架内存活、迁移的情况。另外．将体外构建组织工程神经桥接Wistar大鼠坐骨神经15mm的缺损，于术后1周、d周、6周、8周取出移植物，行组织切片观察植入的BMSCs在支架内的存活情况。结果PKH26能有效地标记BMSCs，标记率达95％以上．标记后细胞活性及诱导成骨成脂分化能力与未标记细胞无明显差异。在体外培养的环境下，BMSCs能在去细胞神经支架里粘附生长，并沿着支架迁移；在体内外周围神经再生的微环境下，BMSCs可存活8周以上。结论PKH26荧光染料标记法是一种有效的标记BMSCs的方法．可用于组织工程神经种子细胞体内示踪的研究。
- 黎建文李智勇朱庆棠胡军何彩凤刘小林江丽
- 关键词：周围神经
- 周围神经修复临床疗效的科学评价被引量：17
- 2011年
- 目的 探讨周围神经临床修复效果的科学评价的指标.方法以主题词方式检索Pubmed数据库（1990-2010）的英文文献,以关于周围神经修复材料临床应用的文献为目标文献,类型包括综述和临床研究,排除动物实验、重复研究及研究内容与目的 不符的文献,同时检索在美国临床试验信息网站注册的周围神经缺损修复材料临床研究的文献.结果 计算机初检得到1 578篇,通过对资料进行分析,排除不符合纳入标准的文献,最终31篇全文阅读分析.在美国临床试验信息网站检索到周围神经修复材料临床研究注册项目2个.通过对材料进行提取分析可知：①通过设置入选条件和排除条件可使遴选病例达到最大程度的齐同.②指固有神经疗效观察指标临床最为常用的是MackinnonDellon感觉评定标准,混合神经功能评定临床常用的是BMRC法,肌电图是次要评价方法.③目前的科学技术水平还达不到对植入物安全性的终生评价,仅能通过临床实践长期观察.④随机对照临床试验如采用随机化分组,均衡性好,可比性强,但非随机对照临床试验同样具有重要价值.结论 临床试验设计在限制的时空条件下不可能做到所有因素齐同,但可通过设置入选条件和排除条件使遴选病例达到最大程度的齐同.神经修复效果可采用合理、国际公认的神经功能评定方法、严格的符合要求的随访和统计方案来进行科学评价.
- 何波刘小林朱庆棠郑灿镔顾立强朱家恺
- 关键词：周围神经神经功能评价文献复习
- 猕猴脂肪干细胞体外多向分化潜能的实验研究
- 2014年
- 目的探讨猕猴来源的脂肪干细胞（ADSCs）的分离和培养方法及在体外多向分化的能力。方法健康成年雄性猕猴1只，年龄4岁，体质量4．5妇。从该猕猴胭窝深部脂肪组织中分离出成纤维样细胞，观察其生长特性，采用流式细胞仪检测其细胞表面标志，利用相应的诱导液分别诱导其向成骨细胞、脂肪细胞、施万细胞方向分化；观察诱导后细胞的形态变化，并分别用茜素红染色、油红0染色及细胞免疫荧光法检测诱导效果。结果猕猴脂肪组织分离、培养出的成纤维样细胞增殖迅速；细胞表面标志CD34、CD14、CD71、CD106、CD117、CD31、CD45、CD80、CD86及人白细胞DR抗原呈阴性表达；CD29、CD105、CD73、CD90呈阳性表达。在相应的诱导体系下可向成骨细胞、脂肪细胞、施万细胞分化，其中成脂诱导率为47．9％～61．5％（平均54．7％）；成施万细胞诱导后ADSCs胞体呈细小梭形，伸出2—3条细长突起；高表达神经胶质细胞标志蛋白S-100和胶质纤维性酸性蛋白质，平均诱导率分别为66．5％和60．6％，双重表达率平均为41．2％。结论从猕猴脂肪组织中可以分离并培养出具有较强的自我更新及多向分化潜能的ADSCs，在体外诱导条件下能分化为类施万细胞。
- 黄喜军朱庆棠江丽何彩凤郑灿镔刘小林
- 关键词：干细胞细胞分化猕猴属
- 猪与人去细胞神经结构与成分的对比研究被引量：2
- 2011年
- 目的 研究猪与人的周围神经脱细胞处理后其结构与成分的差别,为以猪去细胞神经替代人去细胞神经用于修复神经缺损作前期探索.方法 取健康成年猪和下肢截肢患者的胫神经,用化学去垢剂按一定程序进行脱细胞处理.通过大体观察、HE染色、甲苯胺蓝染色、免疫组织化学染色和透射电镜检查,比较猪与人的周围神经去细胞处理前后其结构、许旺细胞与轴突标志蛋白以及细胞外基质的变化.结果 经脱细胞处理后,猪与人的神经结构均略变疏松,仍保留较好的弹性和伸展性.显微镜下观察,两者均未见细胞或其碎屑残留,髓鞘消失,纤维性支架结构保持良好,S-100蛋白和神经丝蛋白（neurofilament,NF）的表达较处理前显著减弱,而层粘蛋白（laminin,LN）的表达无显著变化,神经基底膜管和神经组织的支持结构保留完好.与人去细胞神经比较,猪去细胞神经结构更疏松,神经束间细胞间质更丰富,但成分差异无显著性.结论 猪去细胞神经与人去细胞神经的结构和成分相近,可能取代人去细胞神经用于修复神经缺损.
- 何彩凤朱庆棠江丽胡军吴捷欣黎建文杨俐敏刘小林顾立强朱家恺
- 关键词：周围神经化学萃取组织学
