国家自然科学基金(31171007)
- 作品数:4 被引量:3H指数:1
- 相关作者:刘梅杨柳花娟巫荣华胡遵鲁更多>>
- 相关机构:南通大学南通市第一人民医院更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金江苏省高等学校大学生实践创新训练计划项目江苏省高校自然科学研究项目更多>>
- 相关领域:生物学医药卫生更多>>
- 干扰Kinesin-12表达对星形胶质细胞周期和凋亡的影响被引量:1
- 2015年
- 目的 :比较驱动蛋白家族成员Kinesin-12和Kinesin-5对星形胶质细胞周期和凋亡的影响差异,探讨Kinesin-12在细胞增殖中的作用机制。方法 :采用si RNA方法干扰Kinesin-12、Kinesin-5基因表达,通过实时定量PCR、Western Blot检测干扰表达效率;Hoechst33342染色观察细胞凋亡;经AnnexinⅤ/PI双染色检测细胞凋亡率;流式细胞术检测细胞周期变化;细胞免疫化学染色观察Kinesin-12失功能后MyosinⅡB的分布改变。结果:Kinesin-12和Kinesin-5蛋白表达下调达65%以上;Hoechst33342染色和AnnexinⅤ/PI双染色法发现干扰Kinesin-12和Kinesin-5表达后细胞凋亡率显著增加(P<0.05);流式细胞术检测发现Kinesin-12 si RNA处理后细胞周期被阻滞在G1期,而Kinesin-5si RNA处理后,细胞周期被阻滞在G2/M期。细胞免疫化学染色发现,抑制Kinesin-12表达后MyosinⅡB(即Myh 10)的分布发生改变。结论:抑制Kinesin-12或Kinesin-5表达,均可明显阻滞细胞分裂并诱导细胞凋亡,但作用机制与Kinesin-5不同,推测Kinesin-12可能与MyosinⅡB相互作用形成异源聚合体作用于微管微丝骨架重构。
- 冯杰花娟胡遵鲁严莹莹巫荣华刘梅
- 关键词:星形胶质细胞凋亡细胞周期
- 干扰Kinesin-12表达对大鼠脊髓损伤后形态和功能的影响
- 2017年
- 目的:探讨干扰Kinesin-12表达对大鼠脊髓损伤后形态和功能的影响。方法:建立大鼠脊髓挫伤模型,通过实时定量聚合酶链式反应(quantitative real time polymerase chain reaction,q RT-PCR)检测脊髓损伤后不同时间Kinesin-12基因表达,及胶质瘢痕相关基因硫酸软骨素蛋白聚醣(chondroitin sulfate proteoglycans,CSPGs)mRNA水平表达变化;脊髓损伤术后1周,在损伤处注射siRNA干扰Kinesin-12基因表达,并于干扰表达后不同时间进行运动功能(Basso Beattie Bresnahan,BBB)评分评估损伤后神经功能,磁共振成像(magnetic resonance imaging,MRI)观察脊髓损伤修复程度,免疫组织化学法观察胶质纤维酸性蛋白(glial fibrillary acidic protein,GFAP)和CSPGs表达。结果:脊髓损伤后Kinesin-12基因表达显著升高,与胶质瘢痕CSPGs相关的基因表达也逐渐升高。在大鼠脊髓损伤模型中,与对照组相比,干扰Kinesin-12表达使大鼠脊髓损伤运动功能BBB评分增加,CSPGs表达下降,脊髓组织保存较多,空洞区减小。结论:在大鼠脊髓损伤后采用siRNA干扰Kinesin-12表达,可以减少空洞和胶质瘢痕的形成,利于脊髓形态和功能恢复。
- 赵攀峰巫荣华花娟王萍刘梅
- 关键词:脊髓损伤胶质纤维酸性蛋白
- SASH1基因在肿瘤研究中的进展
- 2021年
- 肿瘤发生是一个多因素作用、多阶段发展的过程,其中原癌基因的激活与抑瘤基因的失活是最为重要的事件。支架蛋白SASH1基因在多种肿瘤中表达下调或缺失,被认为是一个抑癌基因。目前的研究已表明SASH1与肿瘤发生之间存在着密切的关系,对SASH1基因功能及其分子机制的研究不仅有助于了解其在肿瘤发生和进程中扮演的角色,更为其成为肿瘤治疗的基因靶点积累了研究数据。本文对SASH1基因在肿瘤研究中的进展作一综述。
- 张思铭陈汉杨柳刘梅
- 关键词:肿瘤支架蛋白抑癌基因
- 活体成像技术观察胶质瘤荷瘤鼠中过表达SASH1基因的作用被引量:2
- 2018年
- 目的 :采用小动物活体成像技术,观察过表达SASH1对荷胶质瘤裸鼠的抗肿瘤生长作用。方法 :将稳定表达GFP绿色荧光蛋白及荧光素酶报告基因(luciferase)的胶质瘤SHG-44细胞接种于裸鼠皮下,待成瘤后,将ADV4-SASH1慢病毒注射入裸鼠肿瘤组织中,对照组注射相同剂量的ADV4-NC空载体对照病毒;1周后,腹腔注射底物荧光素(luciferin),用小动物活体成像仪采集荧光值,分析肿瘤生长情况。结果:过表达SASH1的裸鼠中有70%(7/10)肿瘤减小;对照组中有71.4%(5/7)裸鼠肿瘤增加,且有30%(3/10)裸鼠死亡。过表达SASH1 1周后肿瘤大小减小至90%,对照组肿瘤增大至166%。结论:本实验表明活体成像技术可以实时观察荷瘤鼠异位接种的胶质瘤体的生长情况,初步结果表明在胶质瘤体中过表达SASH1基因可以抑制肿瘤的生长。
- 张思铭马超胡樱子尤正晨陈汉巫荣华杨柳刘梅
- 关键词:病毒载体