国家自然科学基金(30170950)
- 作品数：5 被引量：50H指数：4
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- 嗅鞘细胞在周围神经中迁移特性的初步研究被引量：11
- 2004年
- 目的 :了解OECs在周围神经中的迁移特性。方法 :从新生乳鼠嗅脑中培养出OECs ,用荧光染色剂hochest标记 ,注入大鼠坐骨神经中 ,在不同的位置对坐骨神经与脊髓造成损伤 ,观察OECs的迁移情况。结果 :1个月后取病理标本观察 ,坐骨神经中损伤一侧OECs迁移距离大于未损伤侧 ,但若损伤在脊髓 ,或脊髓中注射OECs在坐骨神经处进行损伤时对细胞两侧迁移没有影响。结论 :在周围神经中 ,嗅鞘细胞不表现为中枢趋向性 ,而表现为一定的损伤趋向性 。
- 王献章孙天胜张立仁刘树清任继鑫
- 关键词：嗅鞘细胞周围神经坐骨神经
- 大鼠脊髓损伤后轴突再生与NT-3基因体内转染的影响被引量：2
- 2005年
- 目的:研究阳离子脂质体介导的神经营养因子3基因在大鼠损伤脊髓内的表达,观察外源性神经营养因子3对损伤脊髓轴突再生的作用。方法:试验于2003-10/2004-04在北京军区总医院全军骨科中心实验室进行。采用NYU脊髓打击器制备脊髓完全损伤模型(T9平面)。以直接注射法将脂质体Lipofectamine2000和重组质粒pEGFP-神经营养因子3混合后注入大鼠损伤脊髓。采用反转录聚合酶链反应技术和荧光显微镜检测神经营养因子3基因转染后的体内表达,并通过菜豆凝集素L顺行示踪标记,神经中丝免疫组化染色,神经纤维计数和图像分析来评价神经营养因子3基因转染对轴突再生的影响。结果:经脂质体Lipofectamine2000介导神经营养因子3可有效的转染脊髓组织并得到表达。神经营养因子3转基因后可明显增加神经中丝阳性轴突数目(P<0.01),促进皮质脊髓束再生并通过损伤区。结论:外源性神经营养因子3在损伤区局部大量表达具有神经损伤保护和促进轴突再生作用,表明脂质体介导神经营养因子3体内转染治疗创伤性脊髓损伤的方法是可行的。
- 吴军孙天胜王献章
- 关键词：脊髓损伤神经营养因子3基因疗法神经再生
- 嗅鞘细胞移植促进脊髓损伤修复的长期实验和临床观察被引量：12
- 2005年
- 目的:嗅鞘细胞在大鼠完全损伤脊髓内长期存活和修复作用的研究以及嗅鞘细胞移植治疗人类脊髓损伤的观察。方法:解放军北京军区总医院全军骨科中心实验室用新生Wistar大鼠嗅球做嗅鞘细胞原代纯化培养,大量增殖后植入完全损伤的大鼠脊髓内,同时设立注入DMEM培养液和单纯椎板切除的对照组。术前及术后2,4,8,16和24周进行动物神经功能评定BBB评分();术后24周取损伤段及其邻近脊髓标本,行苏木精-伊红染色、嗜银染色,及透射电镜观察了解脊髓再生情况;同时荧光显微镜下观察Hoechst标记的嗅鞘细胞在体内存活情况。选择解放军北京军区总医院2003-06/12住院的脊髓损伤患者进行嗅鞘细胞移植,术后随访。结果:①手术后4周,嗅鞘细胞移植组,DMEM注射组开始有运动功能恢复,嗅鞘细胞移植组运动功能好于DMEM注射组(P<0.01);在各个时间段BBB分值嗅鞘细胞移植组均高于DMEM注射组(P<0.01)。②苏木精-伊红及嗜银染色显示,嗅鞘细胞移植组,DMEM注射组脊髓损伤区及其近端都有神经纤维,排列紊乱,嗅鞘细胞移植组数量多于DMEM注射组P<0.01),但都少于相应节段的对照组P<0.01)。③((24周后荧光显微镜下观察到Hoechst标记的嗅鞘细胞仍存在于OEG移植组脊髓损伤段周围。
- 孙天胜任继鑫吴军史建国戴刚胥少汀
- 关键词：脊髓损伤细胞移植神经再生
- 神经营养素-3基因修饰嗅鞘细胞移植对急性脊髓损伤作用的实验研究被引量：16
- 2006年
- 目的:观察神经营养素-3(NT-3)基因转染嗅鞘细胞(OEG)移植对急性大鼠脊髓损伤的作用。方法:将自行构建的质粒pEGFP-NT3应用脂质体介导的方法导入体外培养的嗅鞘细胞,并移植入急性脊髓损伤大鼠体内,连续观察12周,与接受单纯OEG、空白质粒转染OEG移植的脊髓损伤大鼠进行比较。结果:移植转染pEGFP-NT3后的OEG能在体内长期存活,表达NT-3基因,与对照组比较能更好地促进脊髓损伤区轴突的再生和后肢功能的恢复。结论:OEG是脊髓损伤基因治疗较好的受体细胞。转染NT-3基因的OEG移植后可以在体内较长时间存活,能明显促进急性脊髓损伤神经纤维的再生和功能恢复,为基因修饰嗅鞘细胞在脊髓损伤治疗中的应用提供了实验和理论依据。
- 吴军孙天胜王献章任继鑫张立仁陈迎朝
- 关键词：脊髓损伤神经营养素-3嗅鞘细胞非病毒载体
- 嗅鞘细胞移植促进急性脊髓损伤的修复作用被引量：12
- 2005年
- 目的研究嗅鞘细胞(OEG)移植后在体内存活情况以及对大鼠脊髓损伤长期的修复作用。方法用新生Wistar大鼠嗅球做OEG培养,大量增殖并标记。80只大鼠,随机分为4组,每组20只。A、B、C组以250mm·g打击T13脊髓致运动诱发电位和体感诱发电位完全消失,A组在打击区中央用尖刀横行切断脊髓;D组仅做与A、B组相同节段的椎板减压,不挫伤脊髓。A、B组在脊髓远近断端距离挫伤区边缘1mm的脊髓中线上,深度分别为1.75、1.5、1.0、0.5mm处,各注入200000个OEG;C组用同样的方法注射等量的DMEM培养液;D组不做处理。术后观察脊髓功能恢复情况(BBB运动功能评分法)和体重变化。术后24周取脊髓标本,做HE染色、嗜银染色、抗神经原纤维(NF)免疫组化染色、荧光显微镜下观察Hoechst标记的OEG在体内存活情况。结果手术后4周,A、B、C组开始有运动功能恢复,术后4～24周BBB运动功能评分A、B组均高于C组(P<0.01),16周以后BBB评分变化较小。HE染色A、B两组脊髓损伤区结构紊乱,纤维走行方向扭曲不一致,细胞数目较多,C组大鼠脊髓损伤段常有明显空洞存在,纤维含量少且扭曲。嗜银染色和免疫组化抗NF染色显示无论在损伤区还是损伤头、尾端,A、B组神经纤维数量多于C组,但都少于相同节段的D组(P<0.01)。荧光显微镜下观察到Hoechst标记的OEG大量存在?
- 孙天胜任继鑫史建国
- 关键词：脊髓损伤嗅鞘细胞移植细胞标记神经再生
