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国家现代农业产业技术体系建设项目(nycytx-0107): 作品数：18 被引量：46H指数：4; 相关作者：仲跻峰王长法黄金明李秋玲李建斌更多>>; 相关机构：山东省农业科学院山东师范大学沈阳农业大学更多>>; 发文基金：国家现代农业产业技术体系建设项目国家高技术研究发展计划山东省农业良种工程项目更多>>; 相关领域：农业科学生物学更多>>

牛Src基因三个内含子单核苷酸多态性: 2010年; 采用巢式PCR、DNA测序、创造酶切位点法PCR(Created restriction site-PCR,CRS-PCR)及PCR-RFLP(Poly-merase chain reaction-restriction fragment length polymorphism assay)方法,研究中国荷斯坦牛、鲁西黄牛及渤海黑牛的Src基因内含子6,8,9的单核苷酸多态性(SNPs),发现了14062(C/T)、17302(G/A)和18107(T/C)共3个SNPs,均为首次报道的位点。Src基因14062(C/T)、17302(G/A)和18107(T/C)3个位点在中国荷斯坦牛和鲁西黄牛两个群体中的优势等位基因相同,分别为C、G、C,其等位基因频率分别为0.671/0.647、0.583/0.640、0.558/0.577,而渤海黑牛在这三个位点的优势等位基因分别为T、G、C,其等位基因频率分别为0.525,0.913,0.763。经χ2适合性检验,中国荷斯坦牛、鲁西黄牛和渤海黑牛三个群体在14062(C/T)位点均达到Hardy-Weinberg平衡状态(P>0.05);在17302(G/A)位点则均未达到Hardy-Weinberg平衡状态(P<0.05);中国荷斯坦牛和鲁西黄牛在18107(T/C)位点均达到Hardy-Weinberg平衡状态(P>0.05),而渤海黑牛未达到Hardy-Weinberg平衡状态(P<0.05)。中国荷斯坦牛和鲁西黄牛在14062(C/T)和18107(T/C)位点均表现为中度多态(0.25; 刘文艳李秋玲鞠志花王洪梅黄金明刘顺德李荣岭仲跻峰王长法; 关键词：SRC 单核苷酸多态性

Src基因研究进展被引量：6: 2010年; Src是非受体蛋白酪氨酸激酶家族成员之一,属原癌基因,Src表达及活性异常往往引起乳腺癌、结肠癌、胰腺癌、前列腺癌、肺癌等某些肿瘤发生、发展。最近研究表明Src基因与乳腺的提前退化及泌乳失败相关。文从Src基因的定位、蛋白质结构、分布及功能等几方面进行简要的介绍。; 刘文艳鞠志花刘顺德仲跻峰王长法; 关键词：蛋白结构肿瘤产奶性状

奶牛乳腺炎金黄色葡萄球菌溶血型及溶血素基因分布的研究: 目的:建立金黄色葡萄球菌溶血型分型及hla基因、hlb基因分型的方法,初步研究生鲜牛乳中金黄色葡萄球菌溶血素基因的分布状况,并探讨溶血型与溶血素基因分型的相关性。方法:利用表型生化分型,利用PCR分型技术对其进行分型,电...; 王飞刘代成杨宏军何洪斌王长法高运东仲跻峰; 关键词：金黄色葡萄球菌乳腺炎溶血素基因; 文献传递

三个牛品种MBL1基因第一内含子与第二外显子遗传多态性研究被引量：4: 2010年; 采用巢式PCR、DNA测序和CRS-PCR方法,研究中国荷斯坦牛、鲁西黄牛、渤海黑牛的MBL1基因内含子1和外显子2的单核苷酸多态性(SNPs),发现了855(G/A)、2651(G/A)和2686(T/C)3个新SNP位点。855(G/A)位于内含子1上,2651(G/A)导致Val24 Ile氨基酸的改变,2686(T/C)为同义突变。3个SNP位点在3个牛品种群体中优势等位基因相同,分别为G、G、C,其等位基因频率分别为0.87/0.58/0.57、1/0.75/0.74、1/0.76/0.63。经χ2适合性检验,荷斯坦牛在855(G/A)位点、鲁西黄牛在855(G/A)、2651(G/A)位点、渤海黑牛的所有位点达到Hardy-W e inberg平衡状态(P>0.05)。3个牛品种在855(G/A)位点均表现为低度多态;在2651(G/A)和2686(T/C)位点均表现为中度多态(0.25; 刘梅鞠志花李秋玲王洪梅黄金明李建斌仲跻峰王长法; 关键词：遗传多态性

牛结核杆菌mpb-83基因的扩增和表达: 2010年; 采用PCR方法扩增牛结核杆菌mpb-83基因,并将其连接到T3克隆载体,然后克隆到原核表达载体PET-32 a中,构建重组质粒PET-32 a-mpb-83。以重组质粒转化大肠杆菌BL21,用NI柱纯化,最后纯化产物在SDS-PAGE中检测。结果得到约664 bp的目的片段,且MPB-83可在大肠杆菌BL21中高效表达。; 李树春斯肯达尔杨宏军何洪斌王长法杨少华高运东仲跻峰; 关键词：克隆原核表达

牛轮状病毒VP4基因与LTB基因的融合表达及免疫原性研究被引量：1: 2010年; PCR扩增轮状病毒VP4基因和大肠杆菌LTB基因编码区,将其克隆至pET32a载体上,构建pET32a-VP4-LTB质粒,转化大肠杆菌BL21(DE3),PCR、酶切鉴定后进一步测序,测序结果表明融合基因片段由2637 bp组成,为编码879个氨基酸残基的多肽。经IPTG诱导和SDS-PAGE检测发现表达产物分子量约为118.9 KD,以包涵体的形式存在。融合蛋白经镍离子螯合次氨基三乙酸(Ni-NTA)亲和层析纯化后免疫小鼠,结果所产生的抗体效价高于单独VP4蛋白的免疫结果但差异不显著(P>0.5),但与对照组相比差异显著。表明所表达的融合蛋白具有较好的免疫原性,为研制牛轮状病毒亚单位疫苗奠定了基础。; 南晓伟杨少华高运东王长法杨宏军刘晓何洪彬申之义仲跻峰; 关键词：牛轮状病毒融合基因免疫原性

牛结核杆菌的mpb-83基因扩增和表达: 【目的】扩增牛结核杆菌mpb-83并在大肠杆菌中表达,为今后临床诊断奠定基础。【方法】用PCR方法扩增牛结核杆菌mpb83基因,将其连接到T3克隆载体,然后把它们克隆到原核表达载体PET-32a中,构建重组质粒PET-m...; 李树春斯肯达尔杨宏军何洪斌王长法杨少华高运东仲跻峰; 关键词：克隆原核表达纯化; 文献传递

中国荷斯坦牛IRAK2基因遗传多样性与乳腺炎的相关性研究被引量：1: 2011年; 【目的】研究中国荷斯坦牛白细胞介素1受体相关激酶2(IRAK2)基因上5个SNP位点的多态性与奶牛体细胞评分(SCS)的相关性,为奶牛抗乳腺炎育种提供理论基础。【方法】采用PCR-RFLP技术、CRS-PCR技术和DNA测序,对1 292头中国荷斯坦牛、129头鲁西黄牛、32头渤海黑牛IRAK2基因g.28879、g.28916、g.29212、g.40035和g.40120共5个SNP位点进行研究,通过SAS软件进行相关性分析并采用SHEsis软件进行单倍型分析。【结果】共构建出30种单倍型,发现71种单倍型组合;对个体数量大于8头的单倍型组合与SCS进行关联分析表明,H21H23(TTAGGCTCCC)单倍型组合SCS最低。各个位点基因型与SCS关联分析表明,28 879突变位点的CC基因型个体SCS显著低于CT基因型个体(P<0.05),28 916突变位点的GG基因型个体SCS显著低于AG基因型个体(P<0.05),而其它3个位点不同基因型之间与SCS没有显著差异(P>0.05)。【结论】H21H23单倍型组合在SCS方面为有利单倍型组合,可作为选择抗乳腺炎奶牛个体的分子遗传标记。; 孙淑霞王长法张连江鞠志花黄金明李建斌仲跻峰张嘉保李秋玲; 关键词：中国荷斯坦牛单倍型分析

正确解读DHI报告科学管理牛场被引量：5: 2011年; 利用DHI技术指导奶牛生产和育种工作是奶牛养殖中最重要的技术之一。本文以山东某奶牛场2011年2月份的DHI报告为例,对奶牛生产性能相关指标进行不同月份、不同泌乳阶段、不同胎次的对照分析,帮助牛场找出管理中问题所在,使DHI报告在实际生产中发挥重要指导作用。; 赵秀新李荣岭侯明海李建斌仲跻峰; 关键词：DHI报告牛场

中国荷斯坦牛HSP70基因3＇-非翻译区多态性与耐热性的关联分析被引量：4: 2010年; 用PCR-SSCP和测序技术研究了541头中国荷斯坦奶牛热休克蛋白70(HSP70)基因的3'-非翻译区的多态性,并研究了多态性对奶牛产奶性状和耐热性状的影响。设计引物扩增片段大小549 bp,通过PCR-SSCP技术发现参与试验的奶牛出现了3个复等位基因:A、B和C,6种基因型:AA、AB、AC、BB、BC和CC基因型。测序发现复等位基因是由3个新的突变引起的,第6 400、6 600和6 601位碱基分别发生了G/C、C/T和G/A突变。χ2适合性检验表明,该群体在这三个位点的突变没有达到Hardy-Weinberg平衡状态(P<0.01)。中国荷斯坦牛BB基因型个体红细胞钾含量和产奶量下降率显著低于其他基因型个体(P<0.05),表明BB型的中国荷斯坦牛耐热性能优于其他类型。BB基因型个体305 d产奶量高于其他5种基因型的个体,进一步说明BB基因型可能在选育高产抗热应激奶牛中得到应用。; 杜方磊王洪梅黄金明李建斌仲跻峰张廷荣刘剑飞李秋玲王长法; 关键词：HSP70基因多态性 PCR-SSCP

国家现代农业产业技术体系建设项目(nycytx-0107)

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